PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3在肝細胞癌患者中的表達及診斷價值研究

黃創新 李崢嶸

廣州金域醫學檢驗中心有限公司合作與共建支持部，廣東省廣州市 510000

肝癌是臨床上常見的惡性腫瘤之一，位居全球常見癌癥第5位，死亡率卻位居癌癥死因第2位[1]。肝細胞癌(HCC)占肝癌的85%～90%[2]。HCC起病隱匿，進展迅速，大多數患者就診時已經處于中晚期，失去最佳根治性手術機會，病死率高。HCC患者5年生存率不足20%，復發率高達70%，主要的原因就是缺乏早期有效的診斷及治療手段[3]。因此，早診斷、早治療對提高HCC患者療效、延長生存期尤為重要。血清學腫瘤標志物由于創傷小、方便快捷而被認為是早期理想診斷指標。異常凝血酶原復合物(PIVKA-Ⅱ)作用于許多信號通路，在HCC的增殖、侵襲、轉移中發揮重要作用[4]；高爾基體糖蛋白73(GP73)是分布于高爾基體的Ⅱ型跨膜糖蛋白，其異常表達是肝癌發生敏感而有價值的標志物[5]；甲胎蛋白異質體(AFP-L3)為肝癌細胞特異度表達，與甲胎蛋白相比具有更高的靈敏度和特異度[6]。本文主要探討 PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3在HCC患者中的表達及診斷價值，并分析其與肝細胞癌患者不同病理特征的相關性，旨在為HCC的早期診斷和病情判斷提供參考依據，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 采用回顧性方法，收集2020年1月—2021年6月本院收治的106例肝細胞癌患者作為肝癌組，其中男62例，女44例，年齡35～70歲，平均年齡(57.1±8.8)歲。納入標準：(1)初次確診且未經治療；(2)符合《原發性肝癌診療規范(2019年版)》[7]中肝細胞癌的診斷標準；(3)臨床資料完整，依從性高，簽署知情同意書。排除標準：(1)合并血液系統、免疫系統疾病；(2)合并嚴重心腦血管疾病；(3)合并其他惡性腫瘤或既往惡性腫瘤史；(4)嚴重肝、腎功能不全。另收集100例肝硬化患者作為肝硬化組，其中男59例，女41例，年齡35～70歲，平均年齡(57.4±9.0)歲。同期收集體檢中心健康體檢者100例作為對照組，其中男59例，女41例，年齡35～70歲，平均年齡(56.8±8.7)歲。三組年齡、性別等一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)，三組具有可比性。本研究符合倫理學標準，經醫院倫理委員會批準備案。

1.2 檢測方法 所有觀察對象空腹8h以上，于第2日早晨8點左右抽取靜脈血3ml，注入紅色干燥試管，顛倒混勻數次后靜置30min。然后以3 000r/min的轉速離心10min，取上清液保存于-80℃超低溫冰箱統一進行檢測。采用羅氏Combas E602全自動電化學發光分析儀及其配套試劑盒進行檢測。陽性判斷標準：PIVKA-Ⅱ≥40mAu/ml，GP73≥150ng/ml，AFP-L3(%)≥10%。

2 結果

2.1 三組PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3水平比較 肝癌組患者PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3水平明顯高于肝硬化組、對照組，且肝硬化組明顯高于對照組，差異具有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 三組PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3水平比較

2.2 PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3在HCC患者中的診斷效能比較 PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3聯合檢測的曲線下面積(AUC)為0.905，靈敏度和特異度可達到90.6%、87.1%，比單獨檢測具有更高的診斷效能，見表2。

表2 PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3在HCC患者中的診斷效能分析

2.3 PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3在不同病理特征HCC患者中的表達 根據不同病理特征進行分組，結果表明PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3在腫瘤直徑≥3cm、TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期、Edmonson分級為Ⅲ～Ⅳ級、腫瘤轉移、腫瘤復發的患者中明顯升高，差異具有統計學意義(P<0.05)，見表3。

表3 PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3在不同病理特征HCC患者中的表達

2.4 PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3與HCC患者不同病理特征的關系 根據Spearman相關性分析可知，PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3與TNM分期、Edmonson分級、腫瘤轉移、腫瘤復發密切相關(P<0.05)，見表4。

表4 PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3與HCC患者不同病理特征的關系

3 討論

我國是一個肝癌大國，全世界50%以上的HCC源自我國，這與我國乙肝病毒的高感染率相關，大部分HCC患者均是繼發于乙肝或丙肝相關的肝炎及肝硬化[8]。HCC是肝癌最常見的原發類型，具有高發病率、高病死率、高轉移率、高復發率的特點。我國每年約有11萬人死于HCC，病死率高主要是由于中晚期患者常常伴有肝外轉移、肝內擴散、腫瘤侵襲而缺少有效的治療措施[9]。因此，尋找早期的生物學標志物，早發現、早治療對提高HCC患者的治愈率、延長生存期至關重要。

PIVKA-Ⅱ是一種維生素K缺乏誘導蛋白，主要在肝臟合成。PIVKA-Ⅱ也是一種異常的脫羧基凝血酶原，在HCC患者中，癌細胞對凝血酶原前體合成異常時就會導致凝血酶原前體羧化不足而產生大量PIVKA-Ⅱ[10]。PIVKA-Ⅱ是一種新型的腫瘤標志物，有研究[11]表明其診斷效能明顯高于甲胎蛋白，對HCC的早期診斷具有重要價值，可作為臨床常規篩查的有效指標。GP73在粗面內質網合成，位于高爾基體中，主要表達于膽管上皮細胞，參與上皮細胞的多項生理、病理活動。GP73主要通過PI3K-AKT、細胞因子相互作用、TNF、JAK-STAT等信號通路來實現對肝癌發展的調控[12]。研究表明，GP73在HCC的鑒別診斷上優于AFP的診斷效能，聯合檢測具有更高的診斷價值[13]。AFP根據與小扁豆凝集素親和力的不同，分為AFP-L1、AFP-L2、AFP-L3三種，其中AFP-L3為肝癌細胞特有,可用于鑒別良惡性肝病[14]。AFP-L3隨疾病進展逐漸升高，對HCC患者疾病的發生發展以及預后隨訪有較好的臨床價值[15]。本文發現HCC患者PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3水平明顯升高，說明這些指標參與了疾病的發生發展，與上述研究結論均一致。本文利用ROC曲線對三者進行了單獨和聯合檢測的診斷效能分析，結果顯示，聯合檢測可進一步提高診斷效能，靈敏度和特異度可達到90.6%、87.1%，優于單獨檢測的診斷效能。

HCC患者根據不同病理特征進行分組后PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3在腫瘤直徑≥3cm、TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期、Edmonson分級為Ⅲ～Ⅳ級、腫瘤轉移、腫瘤復發的患者中明顯升高，進一步采用Spearman相關性分析PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3與HCC患者臨床病理特征的相關性，結果表明PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3與TNM分期、Edmonson分級、腫瘤轉移、腫瘤復發密切相關。孫景武等、汪源等[13，16]的研究也證實了這一結論。

綜上所述，PIVKA-Ⅱ、GP73、AFP-L3在肝細胞癌患者中明顯升高，且與TNM分期、Edmonson分級、腫瘤轉移、腫瘤復發密切相關，聯合檢測有助于疾病的早期診斷和病情判斷。但本研究樣本量較小，且未進行前瞻性設計，可能存在一定偏頗，日后將擴大樣本量進行更深層次研究來驗證結論的準確性，以期為HCC患者的診治提供有力依據。