酶聯免疫技術應用在艾滋病初篩中的準確性分析

文/王雪蓮

艾滋病又被稱作獲得性免疫缺陷綜合征（acquired immune deficiency syndrome)，即AIDS。此疾病屬于一種具有極高危害性的傳染病，主要是由于受到艾滋病毒——HIV（human immunodeficiency virus)傳染所致。一直以來，在全球各地，艾滋病均具有較為嚴重的流行趨勢，在我國也明顯表現出高感染率、高增長速度的特點。其主要是通過性接觸、血液和母嬰傳播，將會對受感染者的CD4+T淋巴細胞造成嚴重侵犯和危害，損傷機體免疫細胞和功能，甚至可能導致缺陷，進而可能合并更多嚴重性感染或者惡化成腫瘤，具有迅速傳播、病程緩慢和病死率極高的特點。HIV抗體篩查是防治該疾病的關鍵所在，臨床上具有較多的檢測方法，此次探究將以酶聯免疫法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）與膠體金法的比較展開分析，特取2019年3月至2020年4月期間內進行艾滋病初篩的檢測者260例為對象進行，現就所得分析結果詳細報告如下。

1 資料與方法

1.1 基礎資料

從近年來（介于2019年3月至2020年4月之間）在我疾控中心進行篩查的具有高感染風險的艾滋病初篩者中有效納入260例檢測對象為該次分析對象，納入對象中，男性160例、女性100例，年齡范圍以17～76歲為區間，平均年齡為（45.18±3.50）歲。納入標準：（1）參與者樣本符合送檢相關要求。（2）因各種因素被判定為具有較高艾滋病感染風險者。（3）臨床相關資料顯示完整。排除標準：（1）檢查者自身存在有血液系統疾病等。（2）同時合并有其他傳染性疾病者。（3）年齡不符合該次取樣區間者。

1.2 方法

對所參與分析的檢查者的血清標本進行準確收集，基于《全國艾滋病檢測技術規范》相關標準展開檢測工作，整個操作過程需嚴格遵照相關儀器、試劑等說明要求進行操作和判斷。針對已初篩為陽性的標本需交送至確證實驗室加以復檢和抗體確證實驗，保證所有涉及的試劑均經藥品管理局批準、符合試劑盒規定、處于有效期內。將所有血液樣本進行及時的離心處理，大約8-10 min后吸出其上層清液留作待檢標本，應特別注意在進行血清吸取時不可吸入纖維蛋白。通過酶聯免疫吸附法進行檢測時，主要是在固相載體（聚苯乙烯微量反應板）表面將已知的抗原或抗體加以吸附，使得經酶標記的抗原抗體反應可在固相反應板表面順利進行，隨后再用洗滌法洗除液相中的游離成分，加入底物溶液，以其顏色變化來判定有無相應的免疫反應，標本中抗體或抗原的量與顏色反應的深淺呈正相關，最后再遵照有關使用說明進行后續的加樣、溫育、洗滌和顯色等操作。在采用膠體金法對HIV抗體進行檢測時，同樣應依據相關操作說明進行嚴格操作，按照說明書要求吸取規定量的待測血清，加入試劑條檢測孔中，需要滴加稀釋液的隨即加入稀釋液1滴，并在規定時間內判讀結果。

1.3 觀察指標

計算比較經酶聯免疫法和膠體金法對260例高危艾滋病感染檢查者的抗體篩查結果、靈敏性、特異性、約登指數、假陽性率及假陰性率結果。計算方式如下：（1）靈敏性=真陽性檢出例數/（真陽性檢出例數+假陰性檢出例數）×100%。（2）特異性=真陰性檢出例數/（真陰性檢出例數+假陽性檢出例數）×100%。（3）約登指數=（靈敏度+特異度）-1。（4）假陽性率=假陽性檢出例數/（真陰性檢出例數+假陽性檢出例數）×100%，假陰性率=假陰性檢出例數/（真陽性檢出例數+假陰性檢出例數）×100%。

1.4 統計學分析

對本次分析中涉及的有關數據資料均在系統軟件SPSS21.0版本中展開處理，其中的計數資料將以(%)呈現，同時采用x對其展開檢驗，其中的計量資料則將以均數±標準差呈現，同時采用t對其展開檢驗，若最終結果顯示P<0.05，則表示所得數據結果之間差異有統計學意義。

2 結果

2.1 酶聯免疫法和膠體金法的艾滋病抗體篩查結果比較

在該次所納入的260例高危艾滋病篩查者中，通過酶聯免疫法檢查結果顯示149例為抗體陽性，其余111例為抗體陰性。基于膠體金法的檢查結果顯示抗體陽性共計139例，抗體陰性共計121例。酶聯免疫法下的陽性檢出率稍高于膠體金法，但兩組數據計算結果差異有統計學意義(P>0.05）。詳如表1所示。

表1 兩種檢測方式下的艾滋病抗體篩查結果比較[n(%)]

2.2 酶聯免疫法和膠體金法的靈敏性和特異性結果對比

酶聯免疫法與膠體金法相比，其靈敏性和特異性結果均明顯呈更高顯示，靈敏性差異有統計學意義(P<0.05），特異性差異無統計學意義(P>0.05），詳如表2所示。

表2 酶聯免疫法和膠體金法的靈敏度和特異度結果對比[n(%)]

2.3 酶聯免疫法和膠體金法的約登指數結果比較

酶聯免疫法檢查的約登指數為0.92，明顯高于膠體金法檢查的0.76（P＜0.05）。

2.4 酶聯免疫法和膠體金法檢查的假陽性率和假陰性率結果對比

酶聯免疫法下的假陽性率和假陰性率結果均明顯低于膠體金法檢測結果，但兩組數據假陽性率差異無統計學意義(P>0.05），假陰性率差異有統計學意義(P<0.05），具體見表3。

表3 酶聯免疫法和膠體金法檢查的假陽性率和假陰性率結果對比[n(%)]

3 討論

艾滋病的發生主要是由HIV感染所致，是一種獲得性免疫缺陷綜合征，亦屬于常見的傳染疾病，并且具有較高的病死率。因此，世界衛生組織曾在1988年開始將每年的12月1日定為世界艾滋病日，以此來加強人們對該疾病的重視，并呼吁國際組織于這一天進行艾滋病知識的宣傳和普及，同時還以紅絲帶作為其標志，象征廣大群眾對艾滋病病人和被感染人群的支持和關心。一旦染上艾滋病后，將會導致人體的免疫系統受到嚴重破壞，進而累及多個相關系統和組織，極大增加了相關病原生物的入侵風險，嚴重威脅著患者的生命健康安全。HIV的傳播途徑尤為廣泛，常見的有血液傳播、體液傳播、共用針具傳播等，此外，有性生活不潔、男男性行為和吸毒史等人群具有更高的感染性。因此，為了能更好地加強相關人群的艾滋病防治工作，該領域研究人士提議應及時對高危感染人群加以HIV抗體篩查，以便能盡早對確認對象做好相應的處理措施。血清檢測是當前針對HIV抗體篩查的重要方式，WHO指出，對于HIV抗體的篩查方法應至少具有便捷、快速、靈敏性高的特點。而酶聯免疫法主要是通過在聚苯乙烯等固相載體上將可溶性的抗原或抗體結合一起，結合抗原體結合專一性進行檢測的方法，具有較好的定性和定量特點，此外，該方法還具有較為簡單的操作流程，能直接對所送檢樣本中的HIV抗體加以檢測，具有較高的靈敏性；膠體金法也是臨床中常用的檢測方法，具有檢測快速、操作簡便等優點。但是，目前臨床中關于膠體金法和酶聯免疫法的優劣勢仍然存在一定的爭議，雖然兩者均具有較快的檢測速度和操作簡便等優勢，但在實際運用中，酶聯免疫檢測的靈敏度、準確性稍高于膠體金法，因此，可在對HIV抗體的初篩中加以推廣運用。在該次分析結果中：酶聯免疫法的抗體陽性檢出率雖然明顯高于膠體金法，但兩組數據計算結果差異有統計學意義（P＞0.05）。就檢測特異性和靈敏性結果比較亦顯示酶聯免疫法高于膠體金法，靈敏性差異有統計學意義（P＜0.05），特異性差異無統計學意義（P＞0.05）。此外，約登指數結果顯示膠體金法低于酶聯免疫檢測法（P＜0.05）。酶聯免疫檢測法的假陽性率和假陰性率均明顯低于膠體金法的檢測結果，假陰性率數據差異有統計學意義（P＜0.05）。

綜上所述，將酶聯免疫技術運用于艾滋病臨床檢測中，實際診斷價值滿意，其在靈敏性、陽性檢出率等方面均較膠體金法更高，降低陽性漏檢率，對臨床艾滋病的防治工作具有重要的參考作用。