血清sFlt-1、PIGF和補體系統激活因子水平預測孕中期孕婦子癇前期發病的價值

曹云飛 馬薔 孫丹丹 黃萍華

子癇前期（preeclampsia,PE）指發生在孕期，同時伴有新發高血壓以及蛋白尿為主要表現的多系統紊亂綜合征[1]。PE會在一定程度上增加母體及胎兒的死亡率。目前全球PE發病率為2%～8%，部分患者病情逐漸加重，極易在3周內發生早產及嚴重的母體、胎兒并發癥[2]。目前，關于PE的研究較多，但其發病機制仍未明確，多項研究發現，PE患者會分泌過多的可溶性胎盤血管內皮生長因子受體-1（soluble fms-like ty‐rosine kinase-1,sFlt-1），導致胎盤生長因子（placental growth factor,PIGF）水平進一步降低，從而直接影響血管內皮細胞功能[3-4]。PE患者機體內補體系統過度激活，介導血管生成因子異常表達，在PE的發病過程中起到關鍵性作用。檢測血清中這些因子的水平，對PE進行早期預測及適當干預，能夠有效改善孕婦及胎兒的生產結局，但此類研究較少[5]。因此，本研究旨在探討血清sFlt-1、PIGF和補體系統激活因子水平預測孕中期（20～26周）孕婦PE發病的價值，為臨床診治提供理論依據，現報道如下。

1 對象和方法

1.1 對象 選取2018年6月至2020年6月嘉興市婦幼保健院產科就診的至少有1項PE危險因素的孕中期孕婦300例，將發展為PE的46例設為發病組；剩下254例設為未發病組。PE定義參考《中華婦產科學》[6]：在妊娠20周后，孕婦新發高血壓并合并有任何一種器官或系統受累，主要判斷指標涉及以下一項或多項：（1）胎兒生長受限；（2）血液系統受累：彌漫性血管內凝血、溶血等；（3）神經系統受累：視覺障礙、持續性痙攣等；（4）肝臟受累：轉氨酶異常、右上腹疼痛等；（5）心肺受累：肺水腫、心包積液等；（6）腎臟受累：血肌酐＞90 μmol/L，尿蛋白≥300 mg/24 h或蛋白肌酐比值≥30 mg/mmol。兩組孕婦一般資料及合并癥比較差異均無統計學意義（均P＞0.05），見表1。本研究經醫院醫學倫理委員會審批通過。

表1 兩組孕婦一般資料及合并癥比較

1.2 方法 抽取孕婦空腹靜脈血5 ml，注射到黃蓋惰性分離膠管后3 500 r/min離心5 min，取上清液儲存于-70℃冰箱中。采用ELISA法檢測sFlt-1和PIGF水平，試劑盒購自美國R&D公司，試劑批號及校準批號分別為P153922、333699和P153321、336774；采用德國DiaSys公司的免疫透射比濁法試劑在Beckman Coulter AU5800全自動生化分析上檢測補體3（C3）、B因子。所有操作均嚴格按照說明書進行。

1.3 觀察指標 （1）比較兩組孕婦sFlt-1、PIGF、sFlt-1/PIGF、C3以及B因子水平；（2）分析各指標的ROC曲線結果。

1.4 統計學處理 采用SPSS 26.0統計軟件。符合正態分布的計量資料以表示，組間比較采用兩獨立樣本t檢驗；不符合正態分布的計量資料以M（P25，P75）表示，組間比較采用Mann-WhitneyU檢驗。計數資料組間比較采用χ2檢驗。采用ROC曲線評估各項血清指標預測PE的效能，AUC越大，診斷效能越高。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組孕婦各項觀察指標比較 發病組孕婦血清sFlt-1、sFlt-1/PIGF、C3和B因子水平均高于未發病組，PIGF水平低于未發病組，差異均有統計學意義（均P＜0.01），見表2。

表2 兩組孕婦各項觀察指標比較

2.2 各項觀察指標預測PE的效能 ROC曲線顯示，sFlt-1、PIGF、sFlt-1/PIGF、C3和B因子預測PE的AUC分別為0.662、0.771、0.789、0.643和0.691，在對PE的預測中sFlt-1/PIGF效能最佳，其截斷值為3.4，靈敏度和特異度分別為0.859、0.771，見表3和圖1。

表3 各項觀察指標預測PE的效能

圖1 各項觀察指標預測PE的ROC曲線

3 討論

PE是孕婦死亡的主要原因之一，目前臨床上尚無有效治療方法，但有研究顯示，孕早期預防性治療可改善PE的病理生理變化[7]。既往關于血清各因子表達水平對PE發展的預測研究較少[8]，但有報道表明，PE在出現典型臨床癥狀之前會伴隨血清學指標的改變，其中包括sFlt-1、PIGF等，因此本研究選取300例處于孕中期20～26周的孕婦，對其血清中sFlt-1、PIGF、sFlt-1/PIGF、C3及B因子水平的變化進行觀察，以判斷其對PE發展的預測價值。

有研究認為，PE的發病與滋養細胞侵入不足、胎盤淺著床等因素有關。PIGF是一種血管內皮生長因子，sFlt-1是機體內一種具有酪氨酸激酶活性的糖蛋白，屬于PIGF的衍生物，兩者密切相關，且均與PE的發生聯系緊密[9]。sFlt-1主要通過結合以及分離促血管生成因子與受體flt-1和flk-1的相互作用，來對PIGF起到一定的拮抗作用，故而PE孕婦分泌較多的sFlt-1會使得PIGF減少，最終導致血管內皮功能受損，出現不同程度的內皮功能障礙和紊亂，誘發PE的發生[10]。本研究結果顯示，發病組孕婦血清sFlt-1、sFlt-1/PIGF均高于未發病組，PIGF水平低于未發病組，表示sFlt-1、PIGF表達水平失衡與PE的發生、發展有關，臨床可通過該兩者水平來預測PE的發生。

PE是一種較為常見的異質性疾病，其發病機制不能僅通過單一信號通路來進行解釋，機體內血管生成的不平衡以及補體系統的過度激活均與PE的發生密切相關。研究顯示，sFlt-1高表達可競爭性與PIGF結合，降低PIGF水平，從而使sFlt-1/PIGF升高[11]。Saleh等[12]和Chen等[13]研究表明，相較于正常孕婦，PE孕婦體內PIGF水平更低，sFlt-1水平更高，在預測PE中具有準確的應用價值，與本研究結果較為相似。

作為人體正常免疫保護機制之一，補體系統的適度激活對于維持正常的妊娠過程非常重要，但過度激活會對相應靶器官造成不同程度的損傷[14]。C3水平上升后會裂解成為C3a，其會激活血管緊張素Ⅱ型受體，同時在胎盤以及腎臟組織中堆積，導致sFlt-1的釋放進一步增加，故對于PE孕婦而言，抑制其機體內C3a的生成可達到減少sFlt-1釋放的目的[15]。目前關于B因子在PE的發展中如何活化和升高的機制尚未明確，但是C3的裂解產物C3b會同B因子發生作用產生C3bB，在D因子作用下再次裂解成C3bBb，進一步促進C3的裂解，從而使得激活效應進一步擴大[16]。本研究結果表明，發病組孕婦血清C3和B因子水平均高于未發病組，表明孕中期血清C3和B因子水平可用來預測PE。

本研究中，sFlt-1、PIGF、sFlt-1/PIGF、C3及B因子預測 PE 的 AUC 分別為 0.662、0.771、0.789、0.643及0.691，其中sFlt-1/PIGF表現情況最佳，其截斷值為3.4，靈敏度及特異度分別為0.859、0.771，具有較高的臨床價值，但與既往研究結果有一定的差別[17]，分析其原因在于本研究樣本量較小，可能產生結果上的偏倚。

綜上所述，血清sFlt-1、PIGF和補體系統激活因子在預測孕中期孕婦PE發病中有較高的價值，但其對PE發展和母嬰預后的評估仍需要進一步研究。