早孕期胎兒超聲檢查聯合無創產前基因檢測的臨床應用價值

陳璐璐 羅微 王顯芝

胎兒染色體異常是比較嚴重的一種先天性疾病，產生的主要原因不一。主要包括胎兒自身發育異常、父母染色體異常以及基因突變。根據不同病因影響下胎兒發育出現的異常或異常表型，臨床處理方式不同。包括停止妊娠和可繼續妊娠觀察等。胎兒染色體異常其圍產期具有較高的病死率，并且新生兒出生后，往往合并智力障礙、臟器結構異常等，不僅危害患兒健康，在一定程度上也增加了家庭和社會的負擔[1]。當前，臨床上，在對胎兒染色體異常進行篩查時，有多種多樣的方法，比如，羊水穿刺染色體檢查、臍帶血穿刺等，雖然準確性較高，但是都具有一定的創傷性，并且會升高流產的風險[2]。而胎兒染色體非整倍無創基因檢測（noninvasive prenatal tesing，NIPT）技術可以對孕婦外周血中胎兒游離的DNA片段進行高通量測序，從而對胎兒染色體異常風險進行評估。同時，隨著現代醫學技術的不斷發展，逐漸提高了超聲成像儀器的圖像質量，在不斷改進和優化的過程中，胎兒早孕期超聲篩查畸形技術逐漸成熟，這也為廣大產科醫師和孕婦提供了早期篩查且有效的一種孕期檢查方法。因此，文章對胎兒染色體異常篩查中聯合運用早孕期胎兒超聲檢查和無創產前基因檢測的臨床效果進行了探討，現將具體研究內容報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇吉林市人民醫院2020年1月—2021年1月來產檢的6 175例早孕期孕婦為研究對象，年齡22～40歲，平均（30.5±6.3）歲，其中1 456例為經產婦，4 719例為初產婦，將其接受的產前篩查項目作為基本依據分為四組，分別是無創產前基因檢測篩查組（n=1 544）、超聲NT篩查組（n=1 549）、母血清學篩查組（n=1 542）以及無創產前基因聯合超聲檢測篩查組（n=1 540）。無創產前基因檢測篩查組年齡22～38歲，平均（30.1±5.1）歲；超聲NT篩查組年齡22～39歲，平均（30.2±5.3）歲；母血清學篩查組年齡22～40歲，平均（30.3±5.5）歲；無創產前基因聯合超聲檢測篩查組年齡22～40歲，平均（30.5±6.3）歲。

納入標準：（1）單胎妊娠；（2）孕周＜30周；（3）臨床資料完善；（4）意識清醒，可正常交流和溝通；（5）孕婦及家屬對本次研究知情，且簽署同意書；（6）經醫院倫理委員會批準。排除標準：（1）孕期前行干細胞治療、移植手術、異體輸血者；（2）多胎妊娠；（3）臨床資料缺失。各組的年齡、性別等資料比較差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 超聲NT篩查 選擇Voluson E6和GE Voluson E8彩色多普勒超聲診斷儀（生產廠家：上海歐啟電子科技有限公司），采用腹部凸陣或容積探頭，對探頭頻率進行設置，一般為2～5 MHz，檢查時，指導產婦合理擺放體位，通常為仰臥位，充分暴露腹部，對胎兒的臍帶、四肢、腹壁、腹腔、心臟、胸腔、頸部、面部以及顱腦等部位進行觀察，并且測量胎兒頸項透明層（nuchal translucency，NT），即取胎兒矢狀面，將胎兒頸后羊膜、皮膚以及皮下組織等結構清晰顯示出來且形成3條強回聲帶后，將圖像放大，測量胎兒頭部及上胸部皮膚，其測量以胎兒皮膚內緣到脊柱軟組織外緣最寬處的距離為主，則為頸項透明層值，其中陽性為NT≥3.0 mm，陰性則為＜3.0 mm[3]。

1.2.2 母血清學篩查 于清晨空腹狀態下，采集肘靜脈血2 mL后，以3 000 r/min轉速進行10 min離心處理后，對上層血清進行分離，然后運用時間分辨免疫熒光法（time resolved immunofluorescence，DELFIA）對游離β絨毛膜促性腺激素（free beta human chorionic gonadotropin，free-β-hCG）進行測定，并且與孕婦的基本資料如吸煙、是否患有糖尿病、體質量、年齡以及孕周等相結合，運用Multicalc軟件對風險值進行計算，其中18-三體綜合征的高風險值為1∶350，而唐氏綜合征高風險值則為1∶270[4]。

1.2.3 無創產前基因檢測 按照常規方法，采集空腹靜脈血后，經離心處理，對血漿游離DNA進行提取，然后運用新一代Illumina Hiseq2000測序儀對游離DNA進行大規模基因測序，并且將人類參考基因組作為基本依據，對基因序列進行統計分析，其中18-三體綜合征高風險為樣本的chr18的T值≥3；而唐氏綜合征高風險則為chr21的T值≥3[5]。

1.2.4 無創產前基因聯合超聲檢測 按照上述方法，先進行超聲NT篩查，再運用無創產前基因檢測技術篩查，在聯合檢查中，發現NIPT高風險或者超聲檢查胎兒異常為高風險，若NIPT低風險且超聲檢查未發現胎兒異常則為低風險。

1.3 觀察指標

在篩查的過程中，對于高風險孕婦，詢問其遺傳病史和家族史，在孕婦知情同意的基礎上，穿刺羊膜腔培養羊水細胞分析染色體核型，然后將羊水細胞培養染色體核型分析結果作為基本依據，診斷染色體疾病。若受檢者為低風險，則通過電話隨訪、孕期檢查等多種方法對孕期胎兒發育、新生兒情況、妊娠結局進行追蹤記錄，并且診斷胎兒染色體疾病。同時，根據檢驗結果計算靈敏度、特異度等，其中真陽性人數/（真陽性人數+假陰性人數）×100%=靈敏度；真陰性人數/（真陰性人數+假陽性人數）×100%=特異度；真陰性人數（/真陰性人數+假陰性人數）×100%=陰性預測值；真陽性人數/（真陽性人數+假陽性人數）×100%=陽性預測值。

1.4 統計學處理

由SPSS 20.0軟件分析數據，其中計數資料采用n（%）表示，組間對比行χ2檢驗或Fisher確切概率法，計量資料表示為（±s），采用t檢驗，以P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 超聲NT篩查結果

經超聲檢查，15例為陽性，其中5例確診，包括2例18-三體綜合征、3例21-三體綜合征，而陰性組1例確診，為21-三體綜合征，檢出率為83.33%（5/6），如表1。

表1 超聲NT篩查結果（例）

2.2 母血清學篩查結果

在母血清學篩查中，89例為陽性，6例確診，其中2例為18-三體綜合征，4例為21-三體綜合征；而陰性組2例確診，均為21-三體綜合征，檢出率為75.00%（6/8），如表2。

2.3 無創產前基因檢測篩查結果

在無創產前基因檢測中，6例陽性，4例確診，其中1例為18-三體綜合征，3例為21-三體綜合征，而在陰性病例中確診4例為21-三體綜合征，檢出率為50.00%（4/8），見表3。

表3 無創產前基因檢測篩查結果（例）

2.4 無創產前基因聯合超聲檢測篩查組的篩查結果

在聯合檢測中，6例陽性，5例確診，其中2例為18-三體綜合征，3例為21-三體綜合征，陰性組0例確診，檢出率為100%（5/5），如表4。

表4 聯合檢測篩查結果（例）

2.5 無創產前基因聯合超聲檢測篩查組與其他三組篩查結果對比

無創產前基因聯合超聲檢測篩查組的特異度高于母血清學篩查組，差異有統計學意義（P＜0.05）；與超聲NT篩查組、無創產前基因檢測篩查組相比，無創產前基因聯合超聲檢測篩查組的陰性預測值較高，比較差異有統計學意義（P＜0.05）；無創產前基因聯合超聲檢測篩查組陽性預測值高于母血清學篩查組，差異有統計學意義（P＜0.05）；其他各組的陰性預測值、陽性預測值、特異度以及靈敏度各項指標對比差異無統計學意義（P＞0.05），如表5。

表5 四組的各項指標比較（%）

3 討論

我國出生缺陷發生率較高，據統計為5.5%，并且每年新增90萬出生缺陷兒，也包括染色體畸形新生兒，其中唐氏綜合征的發生率為14.7萬[6]。研究[7]發現，胎兒染色體異常和結構畸形會降低出生時存活率，如果在產前篩查中，及時發現胎兒結構畸形和染色體異常，可以終止妊娠，使新生兒的存活率提高，所以產前檢查尤為重要。既往在對染色體異常進行產前診斷時，以獲取胎兒的組織、臍血、羊水或者絨毛為主，但是具有一定的侵襲性，可導致不良后果如流產、死胎以及宮內感染等，孕婦和家庭的接受度不高[8]。近年來，隨著現代醫學技術的不斷發展，尤其是檢驗醫學水平的提高，提高了孕婦血清生化指標對染色體病的檢出率，但是在孕婦血清學篩查中，具有較高的假陰性和假陽性率[9]。本次研究結果顯示，母血清學篩查的特異度、靈敏度分別為99.59%、75.00%，提示這一篩查方法具有操作簡單、無創性的優點，能夠使胎兒染色體病的產前診斷范圍縮小，減少產前診斷的盲目性。也有文獻[10]報道，胎兒染色體非整倍體畸形與NT增厚有關，由于超聲檢查具有經濟、安全以及價格便宜等諸多優點，被廣泛運用在臨床上。在本次研究中，超聲NT篩查的靈敏度、特異度、陽性預測值以及陰性預測值分別為83.33%、99.67%、33.33%和99.35%，這一結果與王鵬等[11]、鄭敏華等[12]報道一致，說明超聲NT篩查能夠使高危人群的范圍縮小，并且提高篩查準確度，但是也存在一定的假陰性。所以，超聲檢查與其他方法聯合篩查，不僅能夠減少漏診，還能使產前診斷的質量和染色體異常胎兒檢出率提高，也是對胎兒染色體異常進行篩查的一個有效手段[13]。同時，本次研究結果顯示，無創產前基因聯合超聲檢測篩查組的靈敏度、特異度、陽性預測值以及陰性預測值分別為100%、99.93%、83.33%和100%，這一結果與黃家亮等[14]、黃雅蘭[15]研究報道一致，提示無創產前基因聯合超聲檢測篩查具有較高的特異度和靈敏度，可以降低漏診率或誤診率[16]。

綜上所述，在胎兒染色體異常的產前篩查中，通過聯合運用無創產前基因檢測和超聲檢查，不僅可以提高檢出率，還具有安全性高、可重復性高等優點，具有一定的推廣運用價值。