H-FABP、miRNA-21、GDF15對急性胸痛的預測價值研究

劉 勛，戴 領，馮 源，趙 貤

(1.四川省攀枝花市中心醫院急診科，四川 攀枝花 617067；2.四川省攀枝花市中心醫院藥學部，四川 攀枝花617067)

急性胸痛是急診科室常見的疾病之一，其臨床表現多樣復雜、輕重不一，嚴重的胸痛可能會致命，急性胸痛可由帶狀皰疹、胸膜炎、肺炎、肺部腫瘤、氣胸、心肌炎、心肌梗死、心絞痛等原因引起[1-2]。我國急性胸痛確診患者逐年上升，不同地區的數據存在不同的差異[3]。因此找到對急性胸痛預測的指標具有重要意義，有研究表明，心型脂肪酸結合蛋白(heart type-fatty acid binding protein，H-FABP)是心臟內的一種新型小胞質蛋白，是心臟最豐富的蛋白之一，占心肌細胞可溶性蛋白總量4%～8%，是由132個氨基酸組成的低相對分子質量蛋白質，其在心肌脂肪酸代謝中起作用[4]。當出現急性心梗死后，心肌細胞內H-FABP快速釋放出來，胸痛發作后1～3 h便可在血液內被檢測到，對于急性心梗死的早期鑒別具有良好敏感度和特異度[5]；微小RNA-21(microRNA-21,miRNA-21)是由約22個核苷酸組成的，小的、高度保守的非編碼RNA分子[6]。miRNA通過抑制靶基因的信使RNA翻譯或通過促進mRNA降解調節基因表達。有證據表明，miRNA在許多生物過程中發揮重要作用，包括增殖、分化和凋亡，且涉及各種類型心血管疾病[7]；生長分化因子15(growth differentiation factor 15，GDF15)作為心血管疾病危險因子，證明與急性胸痛發生率及病死率相關[8]。此外，GDF15水平與冠狀動脈狹窄有關，并與其嚴重程度具有相關性，可提示側支循環缺陷及病變冠狀動脈數。目前，H-FABP、miRNA-21、GDF15聯合在急性胸痛中研究的文章較少，本研究旨在探究H-FABP、miRNA-21、GDF15表達在急性胸痛中的預測價值，為其治療提供新思路。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年1月—2020年1月我院接診的急性胸痛患者600例為觀察組，包括男性397例，女性203例，年齡30～61歲，平均(45.5±12.4)歲，高血壓373例，糖尿病127例，空腹血糖(8.21±1.01)mmol/L，體重指數24.18±1.86，危險分層[9]：高危患者266例(意識改變；血壓異常且治療后無改善；呼吸困難，患側胸廓飽滿；合并致命性胸痛疾病，如高危急性冠狀動脈綜述合征、動脈粥樣硬化病、肺栓塞及張力性氣胸)、中低危患者334例(包括心源性和非心源性，不包括上述癥狀的患者，超過1周的輕度胸痛)。同期選取體檢人員600例為對照組，包括男性359例，女性241例，年齡28～62歲，平均(45.0±13.6)歲，高血壓75例，糖尿病24例，空腹血糖(8.15±0.98)mmol/L，體重指數24.21±1.90。2組一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

納入標準：符合中華醫學會急診醫學分會對急性胸痛的診斷標準[9]；依從性高者；無惡性腫瘤者；免疫功能正常者。排除標準：哺乳期或妊娠期女性；感染性疾病；臨床資料缺失者；無法完整配合評分者；凝血功能障礙者；血液系統疾病者。

本研究通過醫院倫理委員會批準實施，所有患者及家屬均知情同意且簽署知情同意書。

1.2指標觀察

1.2.1血清H-FABP、miRNA-21、GDF15水平檢測 所有病例均于就診時采肘部靜脈血2mL，樣本采集后離心處理10 min(離心半徑5 cm，轉速3 000 r/min)于-70 ℃冰箱保存待測。健康對照組人群采空腹靜脈血2 mL，如上述分離血清法分離并儲存。采用雙抗體夾心酶聯免疫法檢測血清H-FABP、GDF15。H-FABP、GDF15試劑盒購自(上海恒遠生物科技有限公司)檢測儀器為SuPerMax 3100型多功能酶標儀(上海閃譜生物科技有限公司)。提取miRNA-21總RNA，對提取總RNA的純度、含量進行檢測，隨后逆轉，逆轉錄處理后獲得cDNA，獲得cDNA后使用Primer5.0軟件設計引物，內參U6。miRNA-21引物序列：上游5′-ACACTCCAGCTGGGTAGCTTATCAGACTGA-T-3′,下游5′-ACTGGTGTCGTGGAGTCG-3,其余步驟按說明書嚴格進行。采用2-△△Ct方法計算出需要檢測的miRNA-21相對表達量。采用熒光定量聚合酶鏈反應試劑盒(上海澤葉生物科技有限公司)檢測miRNA-21相對表達量，檢測過程嚴格按照試劑及儀器使用說明書進行。

1.2.2HEART評分[10]由病史、心電圖、年齡、危險因素、肌鈣蛋白5項構成，每個條目賦值0～2分，總分10分；0～3分為低危，4～6分為中危，7～10分為高危。

1.2.3改良的早期預警評分(modified early warning score,MEWS)[11]由體溫(0～2分)、心率(0～3分)、呼吸頻率(0～3分)、收縮壓(0～3分)和意識狀態(0～3分)5個變量組成，總分0～14分，得分越高表示病情越重。

1.2.4腎功能檢測 檢查腎功能的指標是血清尿素、血肌酐、血β2-微球蛋白、尿酸等指標，其中有一項異常則判定為下降。

1.3統計學方法 應用SPSS25.0軟件分析數據。計量資料比較采用獨立樣本t檢驗；計數資料比較采用χ2檢驗，用GraphPad Prism 7軟件做受試者特征曲線(receiver operator characteristics curve，ROC)圖，分析H-FABP、miRNA-21、GDF15對急性胸痛患者的預測價值。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.12組血清H-FABP、miRNA-21、GDF15水平比較 急性胸痛組患者血清H-FABP、miRNA-21、GDF15水平高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 2組血清H-FABP、miRNA-21、GDF15水平比較

2.2不同患病程度急性胸痛患者血清H-FABP、miRNA-21、GDF15水平比較 高危患者血清H-FABP、miRNA-21、GDF15水平高于低危患者，差異有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 不同患病程度急性胸痛患者血清H-FABP、miRNA-21、GDF15水平比較

2.3H-FABP、miRNA-21、GDF15與急性胸痛患者病理特征關系 H-FABP、miRNA-21、GDF15與急性胸痛患者年齡、性別比較差異無統計學意義(P>0.05)，與MEWS評分、HEART評分、腎功能有關。MEWS評分≥7、HEART評分≥5、腎功能下降患者H-FABP、miRNA-21、GDF15表達水平較高，差異有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 H-FABP、miRNA-21、GDF15與急性胸痛患者病理特征關系

2.4H-FABP、miRNA-21、GDF15對急性胸痛的診斷價值 ROC分析H-FABP、miRNA-21、GDF15診斷急性胸痛的敏感度低于3項聯合，差異有統計學意義(P<0.05)。H-FABP、miRNA-21聯合GDF15檢測對急性胸痛診斷效能較高，差異有統計學意義(P<0.05)。見表4，圖1。

表4 H-FABP、miRNA-21、GDF15對急性胸痛的診斷價值

圖1 H-FABP、miRNA-21、GDF15對急性胸痛的診斷價值

3 討 論

胸痛是臨床常見的急診癥狀之一，主觀的感覺是胸部出現刺痛、鈍痛、悶痛或感到有物品壓迫進而表現出壓迫感，伴有呼吸困難等癥狀，常常出現緊張、焦慮、恐懼等情緒[12-13]。急性胸膜炎、自發性氣胸、外傷易引起急性胸痛，由細菌感染引起，也可由結核菌感染引起。急診科急性胸痛患者的病死率高于其他癥狀的入院者，急性胸痛表現多樣，病情千變萬化，危險性也存在著較大區別[14-15]。

高危急性胸痛發病急，臨床表現重，病因繁多，急性冠狀動脈綜合征、急性肺動脈栓塞、主動脈夾層等均可引發高危急性胸痛。高危急性胸痛的危害大，可引發心力衰竭、心源性休克、甚至心室顫動、死亡，臨床需立即對胸痛的危險程度作出準確的診斷，以采取及時有效的措施進行救治，保障患者的生命安全。但臨床對高危急性胸痛的診斷尚存在一定的不足，因此，需尋找更為有效的診斷方法。H-FABP在心肌脂肪酸代謝中起作用，可以協助脂肪酸通過特定的膜轉運到組織，是一種小相對分子質量的胞漿蛋白，存在于心肌細胞內，由于其分子結構與免疫學特性不同于其他類型的FABP而具有心肌特異度[16]。有研究表明，H-FABP通過對長鏈脂肪酸的攝取、運載、酯化和β氧化等環節調節長鏈脂肪酸的氧化供能及磷脂、三酰甘油的代謝[17]。薛炎等[18]研究顯示，H-FABP可以迅速透過細胞膜進入血液循環，在1～3 h內陽性率遠遠高于其他標志物，對其水平檢測能夠反應急性胸痛的嚴重程度，證實H-FABP在急性胸痛中的作用。本研究說明，H-FABP在急性胸痛患者血清中表達較高，且隨著疾病嚴重程度的加重，其表達水平逐漸升高，且MEWS評分≥7、HEART評分≥5、腎功能下降患者其H-FABP表達水平較高。

miRNA-21是miRNA家族中的一個亞型，定位于17號染色體，在多種心臟疾病中過表達[19]。Song等[20]研究顯示，miRNA-21在多種心血管疾病中起重要作用，miRNA-21還能通過抑制彈力蛋白同工異構體的表達激活蛋白激酶B信號途徑從而發揮抗細胞凋亡作用，誘導miRNA-21表達能減輕心肌缺血再灌注損傷。但臨床有關miRNA-21與急性胸痛相關研究較少，其作用有待進一步研究證實。本研究說明，miRNA-21隨著疾病嚴重程度的加重，其表達水平逐漸升高，且MEWS評分≥7、HEART評分≥5、腎功能下降患者其miRNA-21表達水平較高。

CDF-15也被稱為胎盤轉化生長因子，是一種炎性調節因子，其作為腫瘤壞死因子β超家族的一個成員，主要在胎盤組織表達，在心肌損傷中呈現高表達[21]。有研究認為GDF-15是一種組織損傷誘導的細胞因子，可保護心肌免受缺血或再灌注損傷，可提供很好的預測價值。馬冬璞等[22]研究顯示，GDF15為新顯示的心血管疾病危險因子，在急性胸痛發病機制方面可以進行更為深入的探討，其可能成為一種新型的急性胸痛病變程度預測指標，對急性胸痛患者危險分層顯示GDF15水平與急性胸痛發生率及病死率相關。但關于GDF15對急性胸痛的早期診斷預測價值相關研究較少。本研究說明，GDF15在急性胸痛中的表達較高，隨著病情加重其表達水平逐漸升高，且MEWS評分≥7、HEART評分≥5、腎功能下降患者其GDF15表達水平較高。

綜上所述，H-FABP、miRNA-21、GDF15在急性胸痛患者血清中高表達，H-FABP、miRNA-21、GDF15三者聯合檢測對急性胸痛患者的診斷價值較高，對預后作用比較重要。但本研究病例數較少，結果可能受影響，仍需進一步研究證實。