茶多酚對固定矯治牙齦炎的臨床效果研究

周星辰，曾 婕，李 偉，吳盼盼，沈秉新

（1.井岡山大學，江西 吉安 343000；2.內蒙古醫科大學，內蒙古 呼和浩特 010110）

在吉安市青少年正畸患者中，多數為固定矯治。固定矯治期間，牙齦炎在青少年固定矯治患者中發病率高達50%以上，所以患者的口腔衛生是正畸醫生重點關注的復診內容之一。口腔衛生嚴重者可能會導致牙周問題，比如牙槽骨吸收及牙齦退縮，同時食物殘渣黏附在托槽表面會增大摩擦力，導致托槽與鋼絲之間的滑動阻力增大，從而影響牙齒移動。使用含漱液是臨床上治療牙齦炎常用的輔助方法。在這類含漱液中復方茶多酚含漱液和西帕依固齦液臨床效果顯著。本文選取青少年固定正畸開始4周后，經臨床確診為牙齦炎的患者，觀察其分別使用復方茶多酚含漱液與西帕依固齦液對牙齦炎的治療效果，為臨床推廣提供實驗依據。

1 對象與方法

1.1 對象

選取2021年1月至2021年10月在井岡山大學附屬醫院口腔科進行固定矯治的青少年20例為研究對象?；颊呒捌浼覍倬炇鹆酥橥鈺⒘私獗緦嶒灥娜^程。納入標準：1）無全身系統性疾病及精神疾患；2）使用新亞8316-23b直絲弓托槽，并用金屬結扎絲綁扎；3）固定矯治一個月后診斷為單純性牙齦炎；4）無藥物過敏史；5）近四個月沒有使用抗菌藥物及任何影響牙周組織健康的藥物，例如非甾體抗炎藥或糖皮質激素、鈣拮抗劑、環孢素A或苯妥英；6)近兩個月沒有進行牙周基礎治療；7）年齡在11—16歲之間；8）居住于吉安市吉州區；9）無張口呼吸習慣。

1.2 實驗設計

1.2.1 實驗分組：將20例青少年隨機分為對照組10例及實驗組10例。實驗組男性3人，女性7人。對照組男性4人，女性6人。對照組使用復方茶多酚含漱液，實驗組使用西帕依固齦液。兩組含漱液外包裝以及液體顏色基本一致，僅用編號區別。

1.2.2 觀察指標：

1.2.2.1 檢測牙位：上頜兩顆第一磨牙頰腭側、下頜切牙唇舌側，共12個檢測位點。檢測醫生均為井岡山大學附屬醫院口腔科主治醫生，按照統一培訓內容，使用口鏡及探針進行視診及探診。

1.2.2.2 觀察指標：SBI：采用 Mazza改良的出血指數，探診20秒以后，以0至5級評估并記分。GI：采用LoeH和Silness提出的方式，分為0～3級標準。PLI：采用Quigley—Hein改良的Turesky菌斑指數檢測法，以0至5級記分。用菌斑染色劑對齦上菌斑染色并根據標準記分，染色在檢查過GI及SBI后進行。

1.2.3 用藥方案 與患者家長溝通實驗內容，盡量避免青少年對口腔清潔過于重視而影響結果。囑每位受試者不改變平時的口腔清潔習慣，每天三餐飯后及睡前含漱3分鐘，每次10ml，含漱后半小時內不飲水不飲食，一周后觀察每位受試者SBI、GI及PLI的情況。

1.2.4 統計學處理 用SPSS軟件包對數據進行統計學分析，使用t檢驗比較用藥前后兩組各指標的變化。

2 結果

如表，實驗組和對照組的SBI，GI和PLI差別有統計學意義（P＜0.5）。

表 兩組組間用藥前后比較

3 討論

3.1 青少年固定矯治的牙周情況

固定矯治器妨礙口腔清潔，且利于牙菌斑的形成，繼而可能會導致釉質脫礦和牙周炎癥。王曉宇等研究指出固定矯治中的青少年口內伴放線聚集桿菌的檢出率顯著高于未進行矯治的青少年患者，固定正畸開始3個月后，固定矯正青少年口內牙齦卟啉單胞菌及具核梭桿菌檢出率明顯增加，隨后檢查菌斑指數（PI）、牙齦指數（GI）及探診出血指數（BOP）這三個指標，百分比顯著高于未進行矯治患者。部分固定矯治青少年在醫生嚴格控制其口腔衛生的情況下，在矯治器開始6個月后，檢測的三個指標均明顯好轉，但牙齦卟啉單胞菌、產黑普氏菌、中間普氏菌等）的檢出量及檢出率均仍然升高。所以青少年在進行固定矯治的過程中更要加強口腔衛生保健。Papageorgiou SN等人認為，正畸治療對牙周組織有一定的危害，但大都是暫時的，這些包括菌斑增加、出血指數增加、牙周袋增大、邊緣骨質丟失和口腔微生物的數量或質量變化。正畸固定矯治器的特性為牙周致病菌提供有利的生存環境。加之由于青少年無法配合飯后既刷牙的頻次，所以青少年牙齦炎發生幾率較其他年齡段較高，故本實驗對象年齡段為11-16歲。

3.2 青少年固定矯治患者預防牙周疾病的方式方法

機械去除牙科生物膜仍然被認為是主要的方法，但無法抑制菌斑生成。采用基礎常規定期齦上潔治術、刮治、根面平整、刷牙和牙線、口服化學藥物、局部上藥進行牙齦炎的治療?？谇恍l生的高質量管理是正畸治療期間的是臨床正畸中最值得正畸醫生關注的方面之一。詹育香等人研究發現青少年在固定矯治中進行牙周基礎治療是有必要的，單純的口腔健康宣教，效果甚微。但是在作者所在城市患者家長無法接受定期做牙周基礎治療。使用含漱液是臨床上牙齦炎常用的輔助治療方法，消費者接受程度高，操作簡單。

3.3 茶多酚在固定矯治中輔助牙齦炎的相關研究

治療和預防牙齦炎的金標準是氯己定（CHX），因為它具有抗菌和防腐性能。然而CHX 的副作用包括牙齒呈褐色、味覺改變、腐蝕和苦味。復方茶多酚含漱液，其主要成份為——茶多酚，茶多酚是茶葉提取物。茶多酚由沒食子兒茶素-3沒食子酸酯（ECGG）、表兒茶素（EC）、表沒食子兒茶素（EGC）等構成，其中ECGG的占比最高，約占茶多酚含量的50%。茶多酚主要作用有清除有害自由基、抗菌、殺菌等，它能抑制和殺滅口腔中的致病菌，殺滅口腔變形鏈球菌和病毒抑制真菌的生長。有研究表明，該藥含漱治療牙齦炎取得了良好的效果。

茶多酚在降低炎癥GI（牙齦指數）、GBI牙齦出血指數和BOP探診出血方面表現積極的作用，且對宿主免疫系統的直接影響為主對口腔病原體有一定的影響。有研究者對慢性牙周炎患者的牙周病原菌（AA半放線聚集桿菌和PI中間普氏菌）進行了研究，其中茶多酚條局部給藥+齦上潔治+根面平整（SRP），與單獨齦上潔治+根面平整相比，牙周病原菌數量和PPD（牙周袋探診深度）顯著減小。這與研究一致。綠茶制劑或EGCG的人類干預研究中最常見的不良事件（AEs）是在胃腸道系統，而且報告的肝毒性也很低。綠茶兒茶素沒有遺傳毒性或致癌作用。Marta Mazur等人對常見輔助治療牙周病的制劑進行了系統評價和薈萃分析指出。同時有研究證實了洗必泰對成纖維細胞的毒性，也顯示出細胞毒性和遺傳毒性。對比安慰劑、三氯生相，綠茶沒有副作用，并顯示出有效的抗炎和抗氧化特性。得出結論：綠茶通過降低氧化應激來控制牙周炎的療效。EGCG還可減少成骨細胞中基質金屬蛋白酶-9的表達，并避免破骨細胞的形成。也可抑制自身MT-1金屬基質蛋白酶的活性，因此綠茶可用于預防牙周病患者的牙槽骨吸收。

3.4 茶多酚對牙齦卟啉單胞菌的作用機制

牙齦卟啉單胞菌可產生多種毒力因子，這些因子有助于定植組織和抑制宿主防御并破壞組織。牙齦卟啉單胞菌通過各種方式來侵入牙齦上皮并破壞其保護功能。牙齦假單胞菌可以破壞上皮屏障的功能，表現為TER的減少，FITC結合的4-kDa葡聚糖轉運的增加，以及細菌在雙腔系統中通過角質形成細胞單層的滲透。為了粘附和侵入上皮細胞，牙齦卟啉單胞菌靶向特定的宿主受體，調節宿主信號，并解除對宿主細胞因子的調節，破壞組織穩態從而使細菌持續存在使得牙周軟組織發生牙齦炎發展為牙周炎。

茶多酚和其主要成分EGCG可抑制牙齦卟啉單胞菌的生長和粘附，降低宿主定植和組織破壞有關的牙齦卟啉單胞菌毒力基因的表達，增強牙齦角質形成細胞的屏障功能并發揮保護作用的能力，增強了牙齦角質形成細胞單層的完整性，防止細菌通過角質形成細胞單層滲透。如TER 的增加和FITC結合的4-kDa葡聚糖轉運的減少所示。EGCG誘導人β-防御素的分泌來提高口腔上皮細胞的天然免疫。此外，全身應用EGCG可以通過減少參與骨丟失和組織破壞的細胞因子如腫瘤壞死因子-α和IL-6的表達而對牙周組織損傷起到治療作用。綠茶提取物和EGCG也可通過阻斷NF-κB信號通路來減弱牙周病原體刺激的巨噬細胞分泌TNF-α，從而減少牙周組織炎癥的發生。

3.5 茶多酚對具核梭桿菌的作用機制

具核梭桿菌是一種革蘭氏陰性絲狀紡錘形桿狀細菌，是口腔菌群中常見的寄主。具核梭桿菌是一種梭形細菌，在受慢性牙周炎影響的齦下部位數量增加。

具核梭桿菌通過連接早期的定殖者（鏈球菌和放線菌）和晚期的定殖者（牙齦卟啉單胞菌、連翹、齒密螺旋體）在齦下生物膜的形成中發揮關鍵作用。這些復合體最初是由Scriansky等人描述的，而且與活動性牙周病變密切相關。鑒于其在生物膜形成中的核心作用，核桿菌可能是控制生物膜形成的關鍵靶標。核桿菌外膜含有許多粘附素，與唾液蛋白、細菌和宿主細胞的黏附有關。與核桿菌相關的其他毒力特性包括溶血活性和產生硫化氫的能力。核桿菌以其侵襲性而聞名，這可能允許它進入血液遷移，并在身體其他地方引起感染。

3.6 茶多酚對正畸牙齦炎的治療效果相關研究

牙周病原體中抗生素耐藥性的發展是一個主要問題，因為這些細菌可能從口腔遷移到其他器官，在那里它們可能導致感染或將其抗生素耐藥性轉移到其他細菌物種。對阿莫西林、克林霉素和甲硝唑耐藥的核桿菌菌株已經分離到16-18株。鑒于抗生素耐藥細菌的出現，必須開發新的、最好是廉價的傳統抗生素的替代品。茶是世界上消費最多的飲料，僅次于水，是用茶樹的葉子釀造的。綠茶（未發酵的，兒茶素含量高）主要在中國和日本消費，而紅茶（發酵的茶黃素含量高）在西方國家更受歡迎。

大量的人體、動物和體外研究茶多酚可能有助于降低心血管疾病和某些癌癥發生的風險，還可能通過降低血壓、增加骨密度和控制體重來改善生理功能。茶多酚也顯示出作為抗菌劑的巨大前景，它對革蘭氏陽性和革蘭氏陰性病原體都有活性。在之前的研究中，我們發現綠茶和紅茶提取物、表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）和茶黃素降低了核纖毛蟲誘導的單核細胞中的核因子-κB的激活。此外，在與核假單胞菌孵育巨噬細胞之前，用茶多酚對其進行預處理，可顯著抑制促炎細胞因子和基質金屬蛋白的分泌。鑒于這些發現表明茶多酚可以減輕核盤藻誘導的宿主炎癥反應。

核假單胞菌在形成致病的齦下生物膜中起著核心作用，這種生物膜會引起慢性炎癥，進而導致破壞性牙周炎。F.nucleatum也可以從口腔外感染中分離出來，并且與炎癥性腸病和結直腸癌有關。在之前的一項研究中，我們使用巨噬細胞模型表明茶多酚（包括EGCG和茶黃素）可以減弱由具核梭菌誘導的炎癥反應。為了進一步研究茶多酚治療具核梭菌相關疾病的潛力，EGCG和茶黃素對生長和毒力的影響F.nucleatum的特性。我們首先表明，茶多酚抑制具核梭菌的生長，EGCG和茶黃素更有效，MIC為500μg/ml。有趣的是，我們最近報道了EGCG和茶黃素可能通過誘導口腔角質形成細胞分泌人β-防御素（-1，-2，-3）間接發揮抗菌活性26，27。這些抗菌肽對牙周病原菌有活性，包括F.nucleatum茶多酚可能以兩種方式對F.nucleatum發揮抗菌作用。首先，我們使用負載calcein-AM的具核梭菌細胞來證明茶多酚似乎會破壞細菌細胞膜的完整性并導致細胞裂解。其次，我們發現茶多酚具有螯合鐵（一種必需營養素）的能力，這可能有助于保持它們的抗菌活性。不能排除其他機制也可能有助于保持茶多酚的抗菌活性。例如，Navarro-Martinez 等人提供的證據表明，EGCG的抗菌作用可能與其抑制細胞質二氫葉酸還原酶（一種參與核酸前體合成的酶）的能力有關。所有這些結果表明茶多酚的抗菌特性可能是多因素的。據報道，EGCG和茶黃素可以抑制其他牙周病原體的生長，包括P.gingivalis、Prevotella intermedia和Aggregatibacteractinomycetemcomitans。有趣的是，我們最近發現EGCG和茶黃素可以增強牙周治療中使用的常規抗生素（甲硝唑、四環素）的作用。F.nucleatum共聚集和形成生物膜的能力在與牙周炎相關的齦下菌斑的發展中起關鍵作用。此外，當具核梭菌嵌入生物膜時，它比浮游細胞更能抵抗機械去除和抗菌劑。鑒于F.nucleatum形成的生物膜是牙周病發展的關鍵步驟，因此可以使用防止生物膜形成或殺死生物膜包埋細菌的化合物來預防牙周炎。本研究的結果表明，在低于其MIC值的濃度下，綠茶提取物、EGCG、茶黃素以及在較小程度上紅茶提取物抑制F.nucleatum的生物膜形成。此外，暴露預先形成的F.nucleatum。

綠茶和紅茶提取物、EGCG和茶黃素對F.nucleatum具有抗菌和抗粘附活性。更具體地說，它們減少了對牙齦上皮細胞的粘附和生物膜的形成，并殺死了生物膜包埋的有核梭菌細胞。茶多酚還減弱了具核梭菌的溶血活性和H2S 的產生。我們的研究結果表明，綠茶和紅茶多酚可能是治療牙周炎的有希望的輔助劑。

3.7 西帕依含漱液與牙齦炎

中醫認為，牙齦炎產生的病因為虛火上炎、腎陰虧虛而導致牙齦消灼，同時牙齒因氣血不足而失去潤養，以致于牙齦出現萎縮，故治療常采用清熱瀉火之法。西帕依固齦液的有效成分為沒食子，具有止血、固氣的功能，可使牙齒堅固牙齦健康。

4 結論

綜上所述，兩者相比，復方茶多酚的優勢在于使機體提升抗炎能力，同時能抑制牙齦炎致病菌的生長。