豬口蹄疫O型免疫后不同時間抗體檢測與分析

曾麗金 莆田市城廂區(qū)動物疫病預(yù)防控制中心 福建 莆田 351100

口蹄疫是由口蹄疫病毒引發(fā)的一種高傳染性人畜共患一類傳染病，主要發(fā)生在豬、牛、羊等偶蹄動物，仔豬的發(fā)病率和病死率較高，病毒通過接觸帶毒及被病毒污染的動物產(chǎn)品傳染給人，嚴(yán)重影響畜牧業(yè)生產(chǎn)和人類健康。做好口蹄疫防控工作、提高畜牧業(yè)生產(chǎn)效益，除了要加強飼養(yǎng)管理、制定一系列管理制度、定期清理消毒豬舍等生物安全措施，還要根據(jù)豬場的實際養(yǎng)殖情況制定適合本豬場的免疫程序，通過免疫接種提高豬群口蹄疫抗體水平，才能從根本上提高豬群的抗病能力，有效防控口蹄疫的發(fā)生。近年來，規(guī)模化豬場使用政府統(tǒng)一供應(yīng)的豬口蹄疫O型、A型二價滅活疫苗，按規(guī)劃進行春秋兩季強制免疫。免費的疫苗極大造福了養(yǎng)殖業(yè)，但有部分養(yǎng)殖者心存疑慮，想知道疫苗的質(zhì)量如何？免疫多久后抗體能保護豬群健康？基此，筆者對豬口蹄疫O型免疫后不同時間的抗體水平進行檢測試驗。

1 材料與方法

1.1 試驗動物與分組 選取4個規(guī)模化豬場（用A、B、C、D表示）精神狀態(tài)良好60日齡左右的仔豬各30頭，分兩組進行試驗(均另設(shè)欄飼養(yǎng))，首免日齡均為60日齡左右。試驗分組及免疫方案見表1。

表1 試驗分組及免疫方案

1.2 血樣采集 第1組分別在第一次免疫（首免）后第28 d、35 d、42 d進行采血。第2組分別在加強免疫后第14 d、28 d、42 d、90 d、120 d進行采血。

1.3 抗體檢測 使用北京某生物有限公司生產(chǎn)的口蹄疫（FMD）O型抗體ELISA檢測試劑盒對所采血清進行口蹄疫O型抗體檢測。

1.4 標(biāo)樣測定與結(jié)果判定 在450 nm波長讀取OD值，陽性對照分別是0.1607、0.1842，陰性對照分別是0.8108、0.8314，計算得陰性對照OD平均值＞0.7，陽性對照S/N平均值＜0.3，本試驗成立。

計算方法：NC OD均值=（NC1＋NC2）/2=0.8211；樣品S/N=樣品OD值/NC OD均值。

判定標(biāo)準(zhǔn)：S/N≤0.5為陽性，S/N＞0.5為陰性。計算得免疫保護臨界值S/0.8211=0.4105，即樣品S/N≤0.5，判為陽性。

2 結(jié) 果

第1組仔豬首免后不同時間抗體檢測結(jié)果顯示（見表2），豬口蹄疫O型首免后28 d，抗體合格率為73.33%，隨著時間推移，抗體合格率急劇下降，首免后第42 d，抗體合格率低至3.33%。

表2 第1組仔豬首免后不同時間抗體情況

第2組仔豬首免28 d后進行加強免疫，加強免疫后不同時間抗體檢測結(jié)果顯示（見表3），豬口蹄疫O型二免后第14 d、28 d、42 d抗體高且合格率均為100%，二免后第90 d、120 d抗體合格率還在70%以上，可以有效保護豬群健康。

表3 第2組仔豬二免后不同時間抗體情況

3 分析與討論

1）第1組仔豬僅用口蹄疫O型、A型二價滅活疫苗免疫一次，樣品OD平均值接近免疫保護臨界值，抗體保護的時間短暫，首免28 d后抗體水平衰減快，在42 d基本消失，豬群沒有抵抗疫病能力，萬一被口蹄疫病毒侵襲，后果不堪設(shè)想。必須對已完成3次抽血檢測的試驗仔豬馬上進行第二次免疫，免疫劑量均為2 mL/頭，二免后30 d左右進行三免，根據(jù)豬只健康情況和體重確定免疫劑量。

2）第2組仔豬二免后3個月內(nèi)樣品OD平均值明顯小于免疫保護臨界值，產(chǎn)生抗體強且持續(xù)時間長，可見加強免疫在免疫接種中是一個不可缺少的程序。

3）動物免疫抗體水平受多種因素的影響。首免后28 d口蹄疫O型抗體平均水平不甚理想，分析其原因：（1）本次試驗太倉促，免疫前未采血檢測仔豬的母源抗體，首免時間安排不妥而影響免疫效果。有條件時要進行母源抗體檢測，以便科學(xué)安排首免時間。（2）同一時段接種了其他疫苗，造成相互干擾而使免疫抗體減弱。（3）口蹄疫滅活疫苗經(jīng)由上級部門調(diào)撥、運輸、發(fā)放，如果在達不到2～8℃儲運條件下的時間過長，會影響疫苗質(zhì)量，免疫抗體水平不能達到預(yù)期效果。

4 結(jié) 語

1）政府部門供應(yīng)的口蹄疫O型、A型二價滅活疫苗二免后120 d抗體合格率還能達到76.67%，表明通過二免能有效預(yù)防豬O型口蹄疫，能夠?qū)ωi群提供良好的保護，免疫效果良好，政府部門供應(yīng)的疫苗可以放心使用。

2）二免后第120 d，樣品OD平均值（0.3926）接近免疫保護臨界值（0.4105），有條件的場、受威脅的場、前期發(fā)生過免疫抑制性疾病的場或飼養(yǎng)大豬（體重150 kg以上）的場，建議二免3個月后使用政府疫苗進行三免，可以更有效保護豬群免受口蹄疫侵襲。

3）血清學(xué)檢測是當(dāng)前規(guī)模化豬場檢驗免疫效果的手段。定期對豬場進行抽血采樣檢測，了解豬群免疫水平，可以避免動物疫病防控的盲目性，為科學(xué)防控提供參考依據(jù)。