外周血sTREM-1、sIL-2R及leptin水平與新生兒肺炎病情程度及預后的相關性

梁云香，徐 容，趙穎瓊，唐碧璽

新生兒肺炎(NP)是新生兒階段常見的呼吸系統疾病之一，據統計因肺炎死亡的新生兒占所有死亡兒童的10%左右[1]。既往研究表明，若未及時給予治療或治療效果不好，NP易發展為重癥肺炎，甚至導致氣胸、肺不張等，使得患兒預后不良[2]。現階段病原菌培養仍是診治NP的重要依據，但因培養所需時間長，存在一定局限性。隨著學者對NP發生機制的深入研究，發現NP的發生發展與炎癥反應、免疫功能密切相關[3]。可溶性髓樣細胞觸發性受體-1(sTREM-1)是與炎癥相關的免疫球蛋白超家族成員，可促進炎性因子的產生，是激發、放大炎癥反應的重要介質[4]。可溶性白細胞介素-2受體(sIL-2R)是活化淋巴細胞膜IL-2R的主要成分，通過競爭性結合白細胞介素-2發揮免疫抑制作用，已被證實與炎癥性疾病、病毒感染等病情進展相關[5]。瘦素(leptin)屬于內分泌代謝激素，近年來研究發現其除可抑制進食、增加代謝外，還與炎癥反應應答、修復、免疫功能等相關[6]。目前少有研究將外周血sTREM-1、sIL-2R及leptin水平與NP相聯系。基于此，本研究探討上述血清學指標與NP患兒病情嚴重程度及預后的相關性。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇本院2017年4月—2020年6月診治的109例NP。納入標準：①符合肺炎診斷標準[7]；②無其他呼吸系統疾病；③患兒臨床資料完整。排除標準：①存在循環系統、消化系統、神經系統等合并癥或其他感染癥狀；②存在免疫系統缺陷疾病或先天性疾病；③近期有糖皮質激素或免疫球蛋白等免疫制劑使用史者。所有患兒中，男57例、女52例；日齡5～17(12.43±2.15)d；胎齡35～39(37.84±0.93)周；出生體質量2.3～4.5(3.15±0.46)kg；分娩方式：順產50例，剖宮產59例。

1.2研究方法 收集所有患兒臨床資料，包括性別、胎齡、疾病類型等。抽取患兒晨起空腹靜脈血3 ml，3000 r/min離心15 min，留取上清液儲存于-20 ℃環境保存備用。采用酶聯免疫吸附試驗檢測sTREM-1、sIL-2R及leptin水平。具體操作：將待測標本與試劑盒置于室溫下解凍，在酶標板上分設空白孔、標準孔、試驗組待測樣品孔、對照組待測樣品孔，其中前兩者分別加樣品稀釋液100 μl、標準品稀釋液100 μl，后兩者分別加試驗組、對照組血清樣本各100 μl，混勻后封閉，37 ℃溫育2 h；棄液體，甩干，每孔分別加檢測溶液A 100 μl，37 ℃溫育1 h；棄液體，甩干，每孔加洗滌液400 μl，洗板3次；每孔加檢測溶液B 100 μl，37 ℃溫育1 h；洗板5次，每孔加底物溶液90 μl，避光顯色15～20 min，然后加終止液50 μl，終止反應。測量光密度值。根據患兒疾病嚴重程度分為輕癥組和重癥組[8]，根據治療2周后預后情況分為預后不良組和預后良好組。預后判斷標準參照《兒科住院醫師手冊》[8]，將治療效果欠佳，生命體征不穩定，且出現心力衰竭、肺不張、呼吸衰竭等并發癥或死亡者視為預后不良，否則視為預后良好。

1.3治療方法 清理患兒呼吸道并保持通暢；給予抗感染治療，對于早發性肺炎患兒予革蘭陰性菌敏感抗生素治療，晚發性肺炎患兒予革蘭陽性菌敏感抗生素治療，必要時考慮呼吸機治療。

1.4觀察指標 比較不同程度NP患兒sTREM-1、sIL-2R及leptin水平；比較不同預后NP患兒sTREM-1、sIL-2R及leptin水平；采用受試者工作特征(ROC)曲線評估sTREM-1、sIL-2R及leptin水平預測NP患兒預后的價值；采用Cox單因素及多因素分析探討影響NP患兒預后的相關因素。

2 結果

2.1不同程度NP患兒sTREM-1、sIL-2R及leptin水平比較 重癥組患兒sTREM-1、sIL-2R水平顯著高于輕癥組，leptin水平顯著低于輕癥組(P<0.01)。見表1。

表1 不同程度NP患兒sTREM-1、sIL-2R及leptin水平比較

2.2不同預后患兒sTREM-1、sIL-2R及leptin水平比較 預后良好組患兒sTREM-1、sIL-2R水平顯著低于預后不良組，leptin水平顯著高于預后不良組(P<0.01)。見表2。

表2 不同預后NP患兒sTREM-1、sIL-2R及leptin水平比較

2.3sTREM-1、sIL-2R及leptin水平對NP患兒預后的預測價值 sTREM-1、sIL-2R及leptin水平預測NP患兒預后的最佳截斷值分別為>96.07 ng/L、>335.44 ng/L和≤4.33 ng/ml，三者聯合預測的曲線下面積(AUC)及特異度均高于單一指標預測。見表3和圖1。

表3 sTREM-1、sIL-2R及leptin水平對NP患兒預后的預測價值

2.4影響NP患兒預后的相關因素 將預后良好與預后不良作為因變量，將分娩方式、日齡、性別、出生體質量等指標作為自變量，分別賦值(表4)行Cox單因素及多因素分析，結果顯示sTREM-1、sIL-2R及leptin水平均是NP患兒預后不良的獨立危險因素(P<0.05，P<0.01)。見表5。

表4 NP患兒預后影響因素賦值表

3 討論

NP在新生兒疾病中發病率和病死率均占首位，其發生多因低體質量、呼吸中樞或器官發育不成熟、肺表面活性物質少、免疫功能低下等原因引起，極易引起呼吸衰竭、心力衰竭等并發癥[9]。因NP臨床表現多樣，癥狀、體征缺乏特異性，且日齡越小新生兒臨床癥狀越不典型，給疾病的診斷及病情監測帶來較大困難，導致貽誤病情，造成不良預后。既往通常經X線片、病原學檢查診斷NP，但存在所需時間長、特異度低等局限性，且難以用于疾病監測和預后評估。近年來，為快速高效診斷NP，已有多個生物學標志物被證實不僅在NP診斷方面具有較高的效能，還在疾病監測和預后評估方面也有一定的指導意義。

sTREM-1是新近發現的一個受體家族，鄭瑜等[10]研究發現其在銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌等細菌或真菌感染時明顯升高；相反，在非感染性疾病中無明顯升高。sTREM-1可釋放進入血液、體液，并與膿毒癥、肺炎等多種疾病密切相關，現已成為早期診斷炎癥性疾病的新指標[11]。sIL-2R由活化的T淋巴細胞及單核細胞產生，是一種重要的免疫抑制物質，可較好反映機體細胞免疫功能，其在血清及其他體液中水平變化與臨床多種疾病程度密切相關。leptin是一種ob基因編碼的以脂肪細胞合成的與代謝密切相關的蛋白激素，以單體形式存在于血漿中。最初多數學者認為leptin可通過抑制神經肽Y的分泌參與食物攝入與能量代謝調節，但近年研究發現其與感染性疾病的發生發展也存在一定的相關性[12-13]。本研究對NP患兒根據病情嚴重程度分組，結果顯示重癥組患兒sTREM-1、sIL-2R水平顯著高于輕癥組，leptin水平顯著低于輕癥組，提示外周血sTREM-1、sIL-2R及leptin水平與NP患兒病情嚴重程度密切相關。分析其原因，重癥NP發生時，常伴有缺氧、酸中毒，加之內毒素作用，抗原呈遞細胞分泌的前炎性因子會促進內皮細胞、成纖維細胞等釋放更多、更強烈的炎性介質，導致劇烈的炎癥反應，嚴重破壞機體組織和功能。上述諸多因素可能會抑制leptin水平，從而導致重癥患兒體內leptin水平降低[14]。NP發生感染的同時T淋巴細胞活化增殖，并釋放IL-2，從而增強T淋巴細胞的殺傷能力，當IL-2R高表達時，因親和力降低，血清中sIL-2R水平也會升高，降低IL-2活性，阻礙T淋巴細胞活化增殖，影響其殺傷能力，從而導致NP患兒病情加重[15]。NP的發生會刺激機體細胞合成和釋放多種細胞因子，sTREM-1作為細菌和真菌急性炎癥反應的觸發器和放大劑，會放大炎癥反應，觸發瀑布級聯反應，導致組織器官炎性損傷，加重病情[16]。當NP患兒病情進展至重癥時，預后情況較輕癥患兒差。

本研究對不同預后患兒外周血sTREM-1、sIL-2R、leptin水平進行分析，結果顯示預后良好組患兒sTREM-1、sIL-2R水平顯著低于預后不良組，leptin水平顯著高于預后不良組，提示外周血sTREM-1、sIL-2R水平較高及leptin水平較低的患兒病情更為嚴重，預后也更差。為明確上述各外周血指標對患兒預后的評估價值，筆者通過繪制ROC曲線進行分析，結果顯示三者聯合預測的AUC值及特異度均高于單一指標預測，提示sTREM-1、sIL-2R及leptin水平均對NP患兒預后有一定的預測價值，其中三者聯合預測效能最高。此外，本研究結果還顯示，sTREM-1、sIL-2R及leptin水平均是NP患兒預后不良的獨立危險因素，進一步證實了sTREM-1、sIL-2R及leptin水平異常變化與NP患兒預后不良的相關性。

綜上，外周血sTREM-1、sIL-2R及leptin水平與NP患兒病情嚴重程度相關，是影響患兒預后的重要因素，其水平高低可作為評估患兒病情、預測預后的重要指標，且三者聯合檢測可提高對預后的預測效能。但本研究也存在局限性，未從生物學角度探討sTREM-1、sIL-2R及leptin水平在NP中的變化情況，可能會影響結果判斷，故今后仍有待于論證本研究結果。