門源縣陰田鄉牛流行熱的調查

郭俊梅

門源縣陰田鄉畜牧獸醫站,青海門源 810399

牛流行熱也叫三日熱或暫時熱，是一種由牛流行熱病毒感染引起急性熱性傳染病。牛流行熱臨床表現具有典型的突發性高熱熱點，牛流行熱的主要傳染源為病牛，該病的發生具有顯著的周期性和季節性特征。平均每3～5年或6～8年流行一次，往往為小流行與大流行交替發生。一般情況每次大流行間隔著一次小流行，且地方性流行發病具有時間長、損失大特點。

1 材料與方法

1.1 樣本采集

本文選取2016～2021年從青海省門源縣陰天鄉養牛場采集的牛血清1 200份病例作為研究對象。血清樣本采集于全鄉的養牛散戶和幾個中小型規模化養殖場。采集的牛血清樣本均統一帶回實驗室，在同樣的處理條件下完成檢測。牛血清樣本先在37 ℃的環境下靜置30 min，再放置在4 ℃的環境下靜置15 min，然后以3 000 r/min做血清離心分離。最后將分離好的血清放置在-20 ℃下保存，血清采用間接ELISA法檢測前應提前放置在4 ℃的環境下待檢[1]。

1.2 一般材料與儀器

1.2.1 檢測試劑

檢測試劑采用由中國農業科學院蘭州獸醫研究所診斷中心所提供的牛流行熱病毒間接ELISA抗體檢測試劑盒。

1.2.2 檢測儀器

美國BIO-RAD公司的iMARK型酶標儀；德國eppendorf公司的離心機及微量加樣器。

1.3 檢測方法

采用間接ELISA法進行檢測，檢測方法參考如下：①取10 μL待檢血，將其余90 μL血清稀釋液混合均勻，加入準備好的抗原ELISA反應板，放置在37 ℃的環境下30 min進行孵育；②PBST洗滌3次，再加入1:100稀釋酶標記二抗，同樣放置在37 ℃的環境下30 min進行孵育；③PBST洗滌3次，再加入底物TMB，對其采取遮光處理，同樣放置在37 ℃的環境下進行反應；④反應10 min后加入終止液；⑤使用酶標儀讀取OD450值。

1.4 判斷標準

結果判斷依據公式S/P＝（OD450樣本-OD450陰性對照）/（OD450陽性對照-OD450陰性對照）的原理進行判斷。依據公式計算出S/P值：若S/P≥0.3，則為陽性；若S/P＜0.22，則為陰性；若S/P值介于0.22～0.3，則為可疑病例。對于檢出結果存在疑問的，可通過重復檢測進行驗證。若重復檢測的結果S/P＜0.3，則為陰性；若S/P≥0.3，則為陽性。

1.5 統計分析

對1 200份樣本血清信息進行檢測分析，并對檢測結果采用綜合分析、卡方檢驗（χ2）進行數據統計與分析。最后結合結果比對血清采樣的場點，分析牛流行熱的流行情況和感染率，分析不同場點間牛流行熱的感染率差異情況，分析和討論牛流行熱的發生與流行條件，以及防治牛流行熱的措施。

2 結果

2.1 檢測結果

采 用 間 接ELISA法 對1 200份 血 清 樣 本 進行牛流行熱病毒抗體檢測分析。表1為陰田鄉2016～2021牛流行熱病毒抗體檢測統計表。從表1中可以看出，本次調查統計結果顯示陽性樣本共計59份，檢出陽性率4.92%。其中牛養殖散戶病毒抗體陽性檢出率為3.08%，規模化牛養殖場陽性檢出率為1.83%。散戶場點與中小型規模化場點牛流行熱病毒抗體檢出陽性率存在差異性，差異具有統計學意義（p＜0.05）。這從側面反映出陰田鄉散戶養殖牛流行熱感染率高于規模化養殖[2]。

表1 陰田鄉2016～2021牛流行熱病毒抗體檢測統計表

2.2 空間分布分析

根據檢測結果，門源縣陰田鄉的散戶養牛場點和中小型規模化養牛場的牛流行熱檢出率存在差異，差異具有統計學意義（p＜0.05）。這從側面反映出散戶養牛點的牛流行熱感染率高于中小型規模牛養殖場點。

陰田鄉位于門源縣東部，南部大部分地區為高山草甸類草場，北部則為平坦開闊的谷地。氣候屬高原冷溫半濕潤氣候區，具有雨熱同期，夏季炎熱多雨，冬季寒冷干燥的特點。全年最高氣溫7 ℃，最低氣溫-18 ℃，年降水量為445 mm。整體來看，陰田鄉牛群牛流行熱的空間部分差異不大。本次研究所采集的牛血清樣本中，各村均有檢測陽性率。

2.3 種間分布分析

本次研究選取的樣本包含奶牛、黃牛。表2為陰田鄉2016～2021牛流行熱奶牛、黃牛檢出陽性率統計表。從表2中可以看出奶牛與黃牛的牛流行熱病毒抗體陽性檢出數量為24和35，奶牛與黃牛陽性檢出率分別為2.00%、2.92%。奶牛與黃牛流行熱病毒抗體檢出陽性率存在差異，差異具有統計學意義（p＜0.05）。這反映出黃牛流行熱感染率高于黃牛流行熱感染率。

表2 陰田鄉2016～2021牛流行熱奶牛、黃牛檢出陽性率統計表

3 討論

牛流行熱病毒是一種生命力強、傳染力強的病毒。該病毒傳播擴散迅速，短期內流行特征顯著。該病毒的傳播媒介為吸血昆蟲。牛群一旦有牛發生感染，即可在短期內造成多牛發病，呈現地方流行或大流行趨勢，部分疫區常常發生跳躍式流行或疫區與非疫區的地方性流行。牛感染牛流行熱病毒后一般經過流行發病，雖然發病率高，但致死率相對較低。該病在臨床表現最急性型、急性型、慢性型三種病癥。其中以最急性型的死亡率最高，急性型、慢性型的致殘率更高。最急性型、急性型臨床表現突發高熱、流淚、流泡沫樣涎水、流鼻液，呼吸急迫，后期變僵硬，出現跛行，甚至于癱瘓。發病后體溫40～43.5 ℃，最急性型體溫可達42.5 ℃，急性型最高體溫達41.7 ℃，慢性型最高體溫達43.5 ℃。最高體溫一般出現在發病后3 d，發病2～3 d后高熱癥狀開始恢復。

在流行時間上，一般6～9月氣溫較高、降雨較多，且降雨較為集中的時段感染率最高。南方地區2～4月、8～9月多雨時段發生率較高，其中9月份大流行情況最為嚴重。在流行規律上，一般3～5年小流行一次，6～8年大流行一次。根據牛流行熱病毒的傳播媒介，高溫多雨時段蚊蟲大量繁殖，為牛流行熱病毒的傳播提供了良好的條件。因此，高溫多雨的時段牛流行熱的感染率最高。根據本文對陰田鄉牛流行熱的調查，陰田鄉感染牛流行熱的散戶點和規模化養殖場存在一些相同的特征：①養殖場環境臟、亂、差，糞污處理隨意；②養殖場消毒不全面、不徹底；③防疫免疫不及時；④牛舍基礎設施差，通風、采光條件差；⑤養殖戶缺乏防疫意識和專業系統的防疫知識，對牛流行熱認識不足；⑥治療方法單一，治療方式不當，過分依賴抗生素。這些特征從一定程度上反映了陰田鄉牛流行熱流行的原因。根據原因，預防牛流行熱就需要養殖戶加強對養殖場的環境管理、飼養管理。養殖戶要及時清除牛舍糞污，做好全場的全面徹底消毒工作，保持牛舍牛場的干燥潔凈。同時重視牛流行熱活疫苗的免疫接種，按照規定的接種流程、接種時間和接種操作，在每年5月份做好疫苗接種預防工作。每頭牛肌肉注射4 mL牛流行熱活疫苗。在治療上，建議采用中西藥結合治療，加強中藥對癥用藥，重視活血化瘀，才能起到標本兼治的效果。

本文調查研究，散戶養殖場點的感染率高于規模化養殖場點。黃牛、奶牛為主要的易感群體，其中黃牛的感染率高于奶牛。調查中感染牛流行熱的牛養殖場點的相似特征說明牛流行熱的流行與養殖管理和養殖人員的防疫準備有著緊密的關系。牛流行熱作為一種熱性急性傳染病，具有感染快、擴散快、季節性流行的特征。此外，牛流行熱具有典型的周期性流行特征。該病的小流行、大流行往往在新老疫區間隔發生。建議養殖戶根據牛流行熱病因及流行周期做好防疫準備，才能有效控制該病帶來的養殖損失。