虎潛丸治療骨質(zhì)疏松癥研究進(jìn)展

姚鵬程，馬斌祥，關(guān)永林，孫樂偉，張洋，鄧夢(mèng)，常斌

1 甘肅中醫(yī)藥大學(xué) 甘肅蘭州 730000

2 甘肅省中醫(yī)院 甘肅蘭州 730050

骨質(zhì)疏松（OP）是一種以骨量減少、骨組織微結(jié)構(gòu)改變、骨強(qiáng)度減弱、骨脆性增加、易發(fā)生全身性骨折的系統(tǒng)性骨代謝疾病。隨著我國人口老齡化逐漸加重，我國老齡人口越來越多，中老年人身體各個(gè)器官功能逐漸衰退，使骨吸收大于骨形成而造成骨量丟失、骨質(zhì)越發(fā)松弛。根據(jù)我國流行病學(xué)調(diào)查絕經(jīng)后女性骨質(zhì)疏松的發(fā)病率為45.9%，骨折是骨質(zhì)疏松的常見并發(fā)癥之一，骨質(zhì)疏松性椎體壓縮性骨折（OVCFs）是中老年人常發(fā)性疾病。發(fā)病后，骨折局部會(huì)產(chǎn)生劇烈疼痛反應(yīng)，伴隨肢體活動(dòng)受限，嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量。經(jīng)多年對(duì)中藥的藥理作用研究發(fā)現(xiàn)，中藥對(duì)骨折愈合及骨質(zhì)疏松癥的治療具有良好的療效。近年來諸多學(xué)者對(duì)虎潛丸治療骨質(zhì)疏松癥的藥物作用機(jī)制及臨床應(yīng)用進(jìn)行了研究，臨床治療骨質(zhì)疏松癥療效顯著，本文綜述其相關(guān)研究，以期為臨床診療提供思路。

虎潛丸治療骨質(zhì)疏松癥的中醫(yī)理論依據(jù)

骨質(zhì)疏松癥在祖國醫(yī)學(xué)的范疇中當(dāng)屬于“骨痿”“骨枯”“骨痹”的范疇，根據(jù)中醫(yī)“肝腎同源”的理論，及《素問·陰陽應(yīng)象大論》日：“腎生骨髓，髓生肝”，骨質(zhì)疏松常與肝、腎功能失調(diào)有關(guān)，腎藏精、主骨、生髓，肝儲(chǔ)藏血液，兩者相輔相成，肝腎精血虧虛不能濡養(yǎng)筋骨。因此本病的治療應(yīng)以補(bǔ)益肝腎，益精填髓為原則。虎潛丸主要用于治療肝腎不足的痿癥，記載于《丹溪心法》，以標(biāo)本兼治為制方原則，有滋陰益腎，強(qiáng)筋壯骨的功效。該方用大補(bǔ)陰丸的同時(shí)配合虎骨（今多以狗脊，狗骨等代替）以補(bǔ)腎滋陰，強(qiáng)健筋骨，標(biāo)本兼治。

虎潛丸治療骨質(zhì)疏松癥的作用機(jī)制

1 虎潛丸中單味藥物治療骨質(zhì)疏松癥的作用機(jī)制

近年來，關(guān)于中藥治療各種疾病的臨床及實(shí)驗(yàn)研究表明其藥物作用機(jī)制是多靶點(diǎn)，多通道的，為中藥應(yīng)用于治療多種因素而造成的骨質(zhì)疏松癥的治療奠定了基礎(chǔ)，利用現(xiàn)代藥理學(xué)方法提取中藥有效成分治療OP值得深入研究探索。虎潛丸主要是由虎脛骨（今多以狗脊，狗骨等代替）、牛膝、熟地、鎖陽、龜板、當(dāng)歸、知母、黃柏、白芍、陳皮、干姜等11味藥物所組成，總結(jié)近年來相關(guān)藥物的藥理研究，探索其對(duì)骨質(zhì)疏松的作用機(jī)制。目前研究發(fā)現(xiàn)狗脊提取物較多，主要含有芳香族類、酚酸類、揮發(fā)油類、黃酮類、糖及糖苷類、蕨素類、皂苷類、氨基酸類化合物及無機(jī)元素。羅程等研究狗脊提取物對(duì)去卵巢骨質(zhì)疏松性股骨干骨折的大鼠模型愈后實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，狗脊提取物在有效上調(diào)轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）水平的同時(shí)還可以有效抑制白介素-1β（IL-1β）的分泌，從而調(diào)節(jié)骨代謝，促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖、分化，抑制破骨細(xì)胞活躍，降低骨細(xì)胞被分解、吸收、骨量下降的速度。索天驕等用狗脊制品提取物乙酸乙酯對(duì)骨質(zhì)疏松大鼠模型進(jìn)行灌胃，以觀察其提取物抗骨質(zhì)疏松的作用，發(fā)現(xiàn)去勢(shì)后大鼠子宮指數(shù)、骨密度、骨鈣含量及骨小梁排列密度明顯升高。經(jīng)大量研究發(fā)現(xiàn)并公認(rèn)認(rèn)為甾酮類、皂苷類是牛膝眾多化學(xué)成分中主要的活性成分。姜濤等研究牛膝甾酮對(duì)小鼠成骨細(xì)胞系增殖及分化的影響，結(jié)果表明牛膝甾酮能有效促進(jìn)小鼠成骨細(xì)胞的分化。楊豪等在研究牛膝多糖對(duì)骨質(zhì)疏松大鼠骨代謝的改善作用，發(fā)現(xiàn)牛膝多糖可通過Wnt/β-catenin信號(hào)通路（在骨代謝過程中起著關(guān)鍵作用）提升大鼠骨密度、血清ALP、BGP和PINP水平以促進(jìn)骨形成，降低NTx、TRAP水平以抑制骨吸收，從而改善大鼠骨質(zhì)疏松。梓醇（CTP）是熟地黃的主要活性成分之一，楊璐堯在研究熟地黃抗骨質(zhì)疏松的作用機(jī)理中，發(fā)現(xiàn)CTP能促進(jìn)MC3T3-E1成骨細(xì)胞的增殖與分化，對(duì)抑制骨質(zhì)疏松的發(fā)展有很好的治療作用。韓林靜等在研究熟地黃靶向治療骨質(zhì)疏松分子機(jī)制，從熟地中提取出谷甾醇與豆甾醇兩種有效成分，作用于VEGFA、IGFI等核心蛋白，通過PI3K-Akt、MAPK信號(hào)通路對(duì)細(xì)胞凋亡、雌激素應(yīng)答過程進(jìn)行調(diào)節(jié)，發(fā)揮藥效作用，實(shí)現(xiàn)對(duì)骨質(zhì)疏松的防治。黃錦菁在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中發(fā)現(xiàn)血清中核轉(zhuǎn)錄因子-kB（NF-kB）在老年性骨質(zhì)疏松癥發(fā)病過程中占著重要是機(jī)制（NF-kB通路在骨代謝的調(diào)節(jié)中啟著重要的調(diào)控作用），龜板水提液可下調(diào)NF-kB的表達(dá)，抑制破骨細(xì)胞形成，進(jìn)而降低骨轉(zhuǎn)換水平，延緩骨質(zhì)疏松。武海燕在基于Wnt/β-catenin信號(hào)通路研究不同濃度鎖陽含藥血清對(duì)小鼠前成骨細(xì)胞系MC3T3-E1細(xì)胞分化的影響，Wnt/β-catenin信號(hào)通路是成骨分化的主要途徑之一，表明不同劑量的鎖陽含藥血清均能促進(jìn)小鼠MC3T3-E1細(xì)胞增殖和細(xì)胞鈣化，進(jìn)而促進(jìn)小鼠MC3T3-E1細(xì)胞分泌堿性磷酸酶（ALP）、基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1（SDP-1）及促進(jìn)MC3T3-E1中β-catenin、Runx2、OSX mRNA的表達(dá)，以促進(jìn)成骨分化。張霞等通過對(duì)鎖陽80%乙醇提取物對(duì)去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松防治作用的研究，表明乙醇提取物能有效抑制骨質(zhì)疏松大鼠血清中酒石酸堿性磷酸酶（骨吸收指標(biāo)）及組織蛋白酶的活性，提高堿性磷酸酶（骨形成指標(biāo)）的活性，對(duì)骨質(zhì)疏松有良好的防治作用。Yang等研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)歸通過GPR30/EGFR通路促進(jìn)OB分化并阻止前成骨細(xì)胞凋亡，促進(jìn)骨形成防治骨質(zhì)疏松。知母皂苷B-Ⅱ（TB-Ⅱ）是知母的主要有效成分之一。Wang等通過研究知母皂苷對(duì)骨質(zhì)疏松大鼠模型治療作用時(shí)，發(fā)現(xiàn)TB-Ⅱ通過抑制mTOR/NFkB信號(hào)通路促進(jìn)成骨細(xì)胞自噬，改善高血糖引起的骨質(zhì)疏松。白芍總苷（TGP）是白芍的主要有效成分之一。Zhao等研究發(fā)現(xiàn)TGP能有效促進(jìn)成骨細(xì)胞（OB）的增殖、分化，促進(jìn)骨形成、調(diào)節(jié)骨代謝、防治骨質(zhì)疏松。諸藥配伍，共同發(fā)揮促進(jìn)骨形成、抑制骨吸收等藥理作用。隨著網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的進(jìn)一步發(fā)展，單味藥物的藥理研究分析更加明確，更有助于闡明虎潛丸組方治療骨質(zhì)疏松癥的作用機(jī)制。

2 虎潛丸復(fù)方治療骨質(zhì)疏松的作用機(jī)制

目前針對(duì)虎潛丸復(fù)方治療骨質(zhì)疏松的作用機(jī)制已經(jīng)深入到了分子水平，并取得了一定的成效。虎潛丸復(fù)方藥理作用廣泛，除有抗炎、鎮(zhèn)痛、抗疲勞作用外還能夠促進(jìn)成骨細(xì)胞分化等，同時(shí)通過調(diào)節(jié)下丘腦－垂體－性腺軸發(fā)揮抗骨質(zhì)疏松作用，但抑制破骨細(xì)胞增殖、分化，促進(jìn)成骨細(xì)胞分化，提高骨密度仍是本方藥理研究的主要方向。

在對(duì)骨質(zhì)疏松癥治療方面，研究表明虎潛丸可促進(jìn)骨髓基質(zhì)干細(xì)胞BMSCs的增殖，使其向成骨細(xì)胞分化。王進(jìn)等通過構(gòu)建骨質(zhì)疏松癥大鼠模型的實(shí)驗(yàn)研究，發(fā)現(xiàn)虎潛丸可使小鼠血清ALP、IL-6含量降低，血清骨保護(hù)素（OPG）含量升高，來抑制破骨細(xì)胞的分化與形成、以及促進(jìn)成熟破骨細(xì)胞的凋亡和促進(jìn)成骨細(xì)胞的發(fā)育，有效緩解骨質(zhì)疏松癥的發(fā)展進(jìn)程。謝義松等通過觀察虎潛丸對(duì)去勢(shì)大鼠BMP-2及骨密度的影響，發(fā)現(xiàn)虎潛丸組對(duì)比雌激素組與手術(shù)模型組，大鼠骨組織中BMP-2的表達(dá)及骨密度明顯提高，隨著BMP-2的表達(dá)增高大鼠體內(nèi)細(xì)胞自分泌的BMP-2的數(shù)量也隨之增多，BMP-2在骨的重建過程中啟著關(guān)鍵的作用，也是成骨細(xì)胞產(chǎn)生的重要調(diào)控因素之一，進(jìn)而促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖、分化、合成，加速骨的形成。研究表明虎潛丸可以調(diào)控BMP-2的分泌，促使骨細(xì)胞合成、提高骨密度。張紫銘通過觀察虎潛丸對(duì)去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松模型骨密度及轉(zhuǎn)化生長因子-β表達(dá)的影響，證明虎潛丸可以明顯提升成骨細(xì)胞中轉(zhuǎn)化生長因子-β水平及骨密度值，轉(zhuǎn)化生長因子-β在成骨細(xì)胞分化過程中起到促進(jìn)作用，促進(jìn)骨量增加。

總結(jié)相關(guān)研究可以推測(cè)，虎潛丸復(fù)方治療骨質(zhì)疏松癥的作用機(jī)制可能有：促進(jìn)骨髓基質(zhì)干細(xì)胞的增值、降低血清堿性磷酸酶及白細(xì)胞介素-6的含量、提高血清骨保護(hù)素（OPG）含量及調(diào)控BMP-2的分泌等。這些研究從細(xì)胞、分子層次驗(yàn)證了虎潛丸運(yùn)用中醫(yī)補(bǔ)益肝腎、益精填髓的理論，來改善治療骨質(zhì)疏松癥的可行性及有效性。

虎潛丸治療骨質(zhì)疏松的臨床研究

在臨床對(duì)照研究中，劉振林等通過對(duì)比觀察組（虎潛丸加維D鈣咀嚼片）對(duì)比對(duì)照組西藥（維D鈣咀嚼片加骨肽注射液）治療創(chuàng)傷骨折后骨質(zhì)疏松癥的臨床療效，治療2個(gè)月后比較兩組治療有效率、骨密度改善情況及骨代謝指標(biāo)，治療后兩組骨密度、骨代謝指標(biāo)較治療前顯著改善，但是觀察組的骨密度大于對(duì)照組、各項(xiàng)骨代謝指標(biāo)均顯著低于對(duì)照組、且觀察組的治療有效率更高（

P

＜0.05）。馬錚等在采用虎潛丸治療肝腎不足型骨質(zhì)疏松癥中VAS評(píng)分、股骨近端骨密度得出治療效果顯著優(yōu)于常規(guī)西藥治療（骨舒康顆粒），治療有效率高達(dá)80%（

P

＜0.05）。羅江對(duì)照分析了對(duì)照組（阿侖膦酸鈉片加鈣爾奇D3片口服）與觀察組（在對(duì)照組的基礎(chǔ)之上給予虎潛丸加減方），治療腎陰虛型原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥骨性疼痛的療效分析，治療3個(gè)月后，通過對(duì)VAS評(píng)分、MgGee疼痛標(biāo)尺法、骨質(zhì)疏松癥臨床癥狀評(píng)分及骨密度的變化進(jìn)行治療前后療效對(duì)比，發(fā)現(xiàn)VAS評(píng)分、MgGee疼痛評(píng)分及骨質(zhì)疏松癥臨床癥狀評(píng)分顯著低于對(duì)照組（

P

＜0.05），且未出現(xiàn)藥物不良反應(yīng)，但治療前后兩組骨密度值卻無明顯增加，證明虎潛丸加減可維持骨量，防治骨質(zhì)疏松進(jìn)一步發(fā)展。馬成等通過觀察常規(guī)抗骨質(zhì)疏松治療（肌注鮭降鈣素并口服葡糖糖酸鈣片）對(duì)比加用針灸聯(lián)合虎潛丸治療老年骨質(zhì)疏松性腰椎壓縮性骨折臨床療效，治療后1個(gè)月評(píng)估兩組VAS疼痛評(píng)分及骨密度值的變化，發(fā)現(xiàn)治療組疼痛評(píng)分明顯低于對(duì)照組、骨密度值優(yōu)于對(duì)照組（

P

＜0.05）。這表明虎潛丸連合針灸及西藥治療骨質(zhì)疏松性骨折療效明顯好于單純的西藥治療，能夠更好的提高療效，更好的緩解臨床癥狀。

虎潛丸在對(duì)骨質(zhì)疏松癥患者治療時(shí)，可以有效減輕患者癥狀，提高患者骨密度值，防治骨質(zhì)疏松以免發(fā)生骨折影響患者生活質(zhì)量。同時(shí)虎潛丸的臨床價(jià)值遠(yuǎn)不止于此，黃瑤等通過研究表明虎潛丸還可以通過誘導(dǎo)白細(xì)胞介素1受體及大鼠體內(nèi)外泌體拮抗劑的分泌，來促進(jìn)岡上肌肌腱及肩袖撕裂部的愈合。虎潛丸廣泛應(yīng)用于臨床治療多種疾病且療效顯著。

小 結(jié)

目前，虎潛丸在治療骨質(zhì)疏松癥中其單味藥物及其復(fù)方的藥理作用研究、復(fù)方在臨床應(yīng)用中的臨床療效都取得了一定的進(jìn)展和認(rèn)可，但作用機(jī)制尚未完全明確。從最近文獻(xiàn)報(bào)道中發(fā)現(xiàn)，有關(guān)虎潛丸的實(shí)驗(yàn)研究主要探討了其單味藥物及復(fù)方的藥效作用機(jī)制，但未進(jìn)行系統(tǒng)比較該方在不同制劑、不同配伍下的藥代動(dòng)力學(xué)研究，甚至在有些臨床對(duì)照研究中，有未設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照組，研究病例樣本較少，缺乏大樣本數(shù)據(jù)支持，缺乏嚴(yán)謹(jǐn)性，這些問題都會(huì)對(duì)研究產(chǎn)生科學(xué)性影響。希望在日后的工作學(xué)習(xí)中要正確規(guī)范的使用療效判定標(biāo)準(zhǔn)和正確使用醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)學(xué)。結(jié)合現(xiàn)代藥理研究，促進(jìn)中醫(yī)藥在臨床的應(yīng)用及新藥的開發(fā)。