Ⅰ群禽腺病毒病流行現狀及其疫苗研究進展

吳通奎 包濤濤 黃功明 彭彩麗 楊先富 趙孝木

（黔東南州動物疫病預防控制中心 貴州凱里 556000）

禽腺病毒（Fowl adenovirus，FAdV）為腺病毒科禽腺病毒屬成員，是一種能夠引起禽類發生傳染性疾病的重要傳染源。根據FAdV不同的特異性抗原結構，通常可以將其分為Ⅰ~Ⅲ三個亞群。Ⅰ及Ⅱ亞群與火雞出血性腸炎及雞的相關病毒病關系較為密切，而Ⅲ亞群則主要與禽的產蛋下降相關。使用血清交叉中和試驗，可以將Ⅰ群FAdV分為12個血清型（FAdV-1-7，FAdV-8a，FAdV-8b，FAdV-9-11等），不同血清型FAdV毒株均能感染雞且引起雞的包涵體肝炎，對我國禽類疾病防控帶來巨大威脅[1]。本文就Ⅰ群禽腺病毒病的流行現狀及其疫苗研究進展加以論述，旨在為該病防控提供理論基礎。

1 Ⅰ群禽腺病毒病流行現狀

通常來講，Ⅰ群禽腺病毒感染動物后主要能夠引起禽類包涵體肝炎 （IBH）、心包積液綜合征（HHS），Ⅰ群禽腺病毒中所有血清型均能引起IBH，而危害最嚴重的血清型是FAdV-4，該血清型能引起動物產生HHS[2]。1963年，Helmboldt等在美國首次報道IBH，而后世界各地均有IBH的報道，綜合來看，該病感染性較高，無明顯臨床表現，大多以隱性感染為主，主要以肉仔雞及患有免疫抑制性疾病的動物感染較為多見，偶有健康成年雞感染的報道。1987年，在巴基斯坦卡拉奇附近的安卡拉地區一大型肉雞場首次報道發生HHS病例，由于在安卡拉地區首次發生，故又將該病稱為安卡拉病，該病感染前期無明顯臨床癥狀，3周齡后動物出現發病開始死亡，發病高峰持續1周左右，整個發病過程在8~16 d，病死率可高達80%，自該病報道以后，全球其他國家也陸續出現該病不同程度暴發的報道[3]。2013年11月，我國江蘇一蛋雞場首次開始發病，隨后該病多以零星暴發為主。直至2015年，我國山東省暴發該病，并相繼在河北、江蘇、安徽等多個省份廣泛流行。不同地區的家禽開始出現IBH與HHS疫情，根據發病動物病原的血清型分析顯示，IBH主要由FAdV-7、8a、8b與FAdV-2、11引起，而HHS則主要由FAdV-4血清型引起，病死率高于30%[4]。

Ⅰ群禽腺病毒在雞群中普遍存在，3~5周齡肉仔雞最為易感，大多成年雞體內常呈現隱形感染狀態，動物感染后有1~2 d潛伏期，3~4 d動物病死率達到峰值，5 d后死亡情況開始減少，隨后進入轉歸期，整個病程長達10~15 d不等，個別病程可長達20 d[5]。Niu Y等[6]通過對2015-2016年商品雞感染FAdV的病例開展流行病學調查，結果顯示，Ⅰ群禽腺病毒已在不同品種雞中流行，且與雞傳染性貧血病毒、馬立克氏病病毒等免疫抑制性病原體出現共感染。因此，為了有效地控制Ⅰ群禽腺病毒病的流行，有必要采取有效的生物安全措施，持續動態監測雞群中免疫抑制性疾病的感染情況。

2 Ⅰ群禽腺病毒病疫苗研究進展

隨著FAdV感染范圍的不斷擴大，由該病毒所引發的IBH和HHS給我國養禽業帶來了巨大的經濟損失，為此研制出一種可適用于禽腺病毒病防控安全有效的疫苗成為當前研究者們所重點關注的方向。目前已分離出FAdV固定的血清型有12種，不同血清型之間的致病力差異不盡相同，這也對禽腺病毒病疫苗的研發帶來了一定困難。近年來，國內外有關于使用滅活疫苗、弱毒疫苗及基因工程苗等用于該病預防的報道。如在亞洲、非洲及拉丁美洲等國家地區已出現了商品化滅活苗，但大多以FAdV-4單價苗、FAdV-8/8a多價苗及與其他禽類疾病的多聯苗較為常見。僅有一種在澳大利亞未致弱的FAdV-8a毒株Esurient活疫苗。結合現有報道來看，這些疫苗在該病的防控中均取得了一定的保護效果，但是并不足以完全用于該病的防控[7]。為加快禽腺病毒病疫苗的研發，各國學者一直在努力，根據現有禽腺病毒病疫苗的報道，可暫將疫苗研發種類分為滅活疫苗、弱毒疫苗及基因工程疫苗3種。

2.1 滅活疫苗滅活疫苗是一種使用甲醛或β-丙內酯等滅活劑來滅活病毒，使病原體失去感染能力，但同時又能保留其免疫原性，在加入佐劑后接種動物可以有效地刺激動物機體產生較好的體液免疫，其所產生的抗體可以中和甚至清除來自胞外的抗原。具體來講，滅活疫苗具有研發周期短、方法便捷、穩定性好、能長時間保存且有利于運輸及保存等優點，但不可忽視的是滅活疫苗只能刺激機體產生體液免疫，因此，其也有保護周期短的缺點。

Kim等[8]研究的滅活疫苗可以有效地預防不同血清型的FAdV，其中對FAdV-5、8a及11這3種血清型具有完全保護作用，對已免疫的家禽在一定時間內能檢測出其血清抗體。巴基斯坦在暴發HHS時，當地養殖戶曾用雞肝臟的組織勻漿滅活疫苗來預防該病，最終取得了較為顯著的預防效果[9]。劉聚祥等[10]使用FAdV-8制備出了IBH油乳劑滅活疫苗，可以有效地預防FAdV-8所引起的疾病。韋悠等[11]分別將FAdV-4和FAdV-8兩種血清型制備成單價及雙價滅活苗，其雙價滅活疫苗對FAdV-4和FAdV-8的感染達到了100%的保護率。此外。陸瑋[12]也研制出了FAdV-2、4、5及FAdV-8b多價滅活苗，其保護率可高達100%。

2.2 弱毒疫苗弱毒活疫苗是一種使用物理、化學或生物方法對自然的細菌或病毒進行多次傳代，經過連續傳代使其自身毒力減弱（致弱毒株仍能保持良好免疫原性及遺傳特性），然后再加入適當的保護劑后凍干而制成。Mansoor等[13]選取了1株可引起HHS的病毒分離株，先經雞胚盲傳4次，待其適應雞胚環境后再連續傳代12次，通過毒力致弱，連續多次傳代研制出了一種可用于HHS預防的弱毒疫苗。將其用于接種2周齡肉仔雞驗證免疫效果，同時將傳代結束后的毒株制備成疫苗與商品化的滅活疫苗對雞進行免疫，用ELISA檢測方法進行抗體水平評估，結果顯示弱毒活疫苗免疫的雞保護率可達95%以上，并且免疫雞群的肝臟和心臟的損傷率也有所減少，以此證實該弱毒活疫苗在一定程度上能預防FAdV感染。弱毒疫苗免疫效果尚可，但應引起重視的是其也往往存在毒力返強等致命缺點，容易引發生物安全隱患。

2.3 基因工程疫苗基因工程疫苗是一種利用現代生物技術在分子水平上研制而成的新型疫苗，目前己有NDV、AIV等病毒的基因工程疫苗可用于動物疾病的防控研究，且均能達到理想的保護效果。盡管當前已有使用滅活疫苗或弱毒疫苗用于預防FAdV感染的報道，但病毒滅活不徹底、弱毒苗的毒力返強等安全隱患也在一定程度上限制了滅活疫苗及弱毒疫苗的應用。而作為一種使用現代分子生物學技術研制的基因工程亞單位疫苗，可以較好地彌補滅活疫苗及弱毒疫苗所帶來的不足，因為基因工程亞單位疫苗并無病毒核酸，無致病性且也不需要滅活，安全性較高。已有很多學者針對FAdV作了前期初步研究，并均取得了預期的試驗結果。

唐熠等[14]將I亞群禽腺病毒（CELO病毒）的Hexon基因、雞IL-2基因和真核表達載體pcDNA3.1進行融合，構建一種重組真核質粒pc DNA3.1-hexon-Linker-ChIL2，以其為免疫原將其注射到試驗動物后檢測其抗體，結果發現，能在短時間內產生抗體，且能夠有效地抑制感染機體排毒，該試驗的順利進行，也使得更多的研究者們將目光轉移至對FAdV基因工程疫苗的研發。Shah等[15]使用原核表達系統表達出FAdV-4 penton base蛋白，制備出一種亞單位疫苗，以其為免疫原免疫肉雞，同時開展免疫原性測定及強毒攻毒保護試驗，結果表明，該疫苗能促使肉雞產生較強的體液及細胞免疫應答，可以較好地抵御FAdV-4的攻擊，可作為防控HHS的候選疫苗。Hess等[16]通過表達纖維-2蛋白以及纖維蛋白，研制出了FAdV的亞單位疫苗，對禽類尤其是肉雞的HHS及IBH均有較好的預防作用。

3 小 結

隨著我國養禽業的快速發展，禽類疾病種類也呈現出不斷增加的趨勢，I亞群禽腺病毒病便是一種近年來在禽業養殖環節中一直困擾著養殖戶的重要疾病，經常會有關于I亞群禽腺病毒所引起禽類疾病的病例報道，對禽業健康養殖造成了巨大的經濟損失。疫苗接種是病毒性疾病的重要防控方法，然而對于血清型繁多的FAdV，目前尚未研制出一種可針對所有血清型的疫苗。因此，在FAdV的商品化疫苗尚未成功上市之前，為更好地控制該病的發生，在平時生產養殖環節應嚴格執行動物引種程序，加強場內飼養管理，規范場內免疫程序，定期接種，同時也必須做好養殖環節中各項衛生消毒及生物安全等其他工作。