食管癌組織中血紅素加氧酶-1、血管內皮細胞生長因子受體-3表達與遠期預后的關系

葉家斌，連鐸煌，周順楷

(中國人民解放軍聯勤保障部隊第九〇〇醫院，福建 福州 350025)

食管癌是臨床消化系統常見的惡性腫瘤，其死亡率僅次于肺癌。據相關數據調查顯示，全球每年新發食管癌患者約30萬，我國食管癌發病率約占1/3[1]。食管癌根治術是目前臨床治療食管癌的常用方法。但據相關資料顯示，同一階段疾病，大部分患者預后生存期存在顯著差異[2]。未來研究應集中于采用分子生物標志物來預測患者遠期預后，并選取有效治療手段治療食管癌患者。血紅素加氧酶-1(Heme oxygenated plum，HO-1)是體內降解血紅素的限速酶，已有研究證實，腫瘤增殖、凋亡與HO密切相關[3]。腫瘤侵襲轉移與新生血管生成、基底膜組織破壞等有關。血管內皮細胞生長因子受體-3(vascular endothelial cell growth factor receptor-3，VEGFR-3)在新生血管生成中具有重要作用，VEGFR-3水平增高與惡性腫瘤淋巴結浸潤、轉移有關[4]。本研究探討食管癌根治術患者癌組織中HO-1、VEGFR-3表達與其遠期預后的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料2018年10月至2020年5月我院收治的76例食管癌患者，納入標準：①在本院進行手術治療者；②具有完整臨床資料；③無胸部手術史；④無交流、意識障礙者。排除標準：①伴精神疾病，溝通困難者；②伴全身感染性疾病者；③依從性差，不配合；④精神疾病或神經功能障礙者。其中男49例，女27例，年齡26～82歲[(64.71±7.36)歲]。

1.2 方法取患者術后的癌組織及距瘤體5 cm以上的正常組織制成石蠟切片，常規包埋與切片。采用免疫組織化學SP法檢測HO-1、VEGFR-3表達情況。結果判斷[5]：所有免疫組化學陽性均呈棕色顯色，按陽性細胞數與著色深度計分。0分為無色，1分為淡黃色，2分為棕黃色，3分為黃褐色；每張切片取5個高倍視野，無陽性細胞數為0分；1分陽性細胞<10%，2分10%～49%；3分50%～75%；4分>75%。兩項積分相乘，總分<3分為陰性。

1.3 觀察指標①比較不同組織、食管癌不同病理特征患者HO-1、VEGFR-3表達情況。②對患者進行1～2年門診或電話隨訪，隨訪截止至2022年5月。觀察其預后情況，并分析影響因素。

1.4 統計學方法采用SPSS 22.0統計學軟件分析數據。計量資料以均數±標準差描述；計數資料以n(%)表示，組間比較行χ2檢驗；影響因素分析采用多元Logistic回歸分析。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同組織HO-1、VEGFR-3表達情況比較食管癌組織HO-1、VEGFR-3陽性表達率高于正常組織(P<0.05)。見表1。

表1 不同組織HO-1、VEGFR-3表達情況比較 [n(%)]

2.2 食管癌不同病理特征患者HO-1、VEGFR-3表達比較食管癌Ⅲ～Ⅳ期、低分化者HO-1陽性表達率高于Ⅰ～Ⅱ期、中高分化者；食管癌Ⅲ～Ⅳ期、伴淋巴結轉移者VEGFR-3陽性率高于Ⅰ～Ⅱ期、無淋巴結轉移者(P<0.05)。不同性別、年齡患者HO-1、VEGFR-3陽性表達率比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。見表2。

2.3 食管癌患者預后的影響因素分析經隨訪，76例食管癌患者中死亡16例(21.05%)。多元Logistic回歸分析顯示，臨床分期、淋巴結轉移、HO-1及VEGFR-3是影響食管癌患者預后的確定性因素(P<0.05)。見表3。

表2 食管癌不同病理特征患者HO-1、VEGFR-3表達比較 [n(%)]

表3 食管癌患者預后的影響因素分析

3 討論

近年來，我國食管癌發病率逐漸增高，遠高于心腦血管及呼吸系統疾病，使得患者生活質量大大降低[6]。食管癌根治術治療雖具有一定療效，然而，大多數患者在中晚期診斷，錯過了最佳治療時間，導致了高死亡率。故早期診斷食管癌、預測患者預后是臨床目前關注的重點。臨床研究發現，腫瘤標志物等臨床病理因素與治療效果密切相關，根據分子生物標志物的檢測結果可一定程度上預測患者生存率，從而為臨床制定合理方案提供依據[7,8]。

HO-1屬于誘導型熱休克蛋白，同時亦是機體重要的限速酶[9，10]。通過比較腫瘤組織和正常組織HO-1，以往的研究發現HO-1在腫瘤組織中高表達，與腫瘤細胞的生長、凋亡、血管生成等密切相關[11,12]。人體若HO-1缺失會導致其正常生長受到影響，且會出現貧血、白血病等疾病[13]。張金花等[14]指出，高表達HO-1可刺激癌細胞浸潤，誘發血管生成、加速腫瘤轉移。故降低HO-1表達可一定程度上減少癌細胞增殖與轉移。相關研究指出，HO-1可促進血管內皮生長因子合成，而血管內皮因子是誘發新生血管的活化因子之一[15]。VEGFR-3是高度糖基化的細胞表面Ⅲ類酪氨酸激酶受體，當與其配體結合后可促進淋巴結內皮增殖、分化與遷移，在淋巴管發育、維持中具有重要作用[16]。國內相關研究發現，VEGFR-3表達與食管鱗狀細胞癌的淋巴結轉移及淋巴管浸潤具有一定相關性[17,18]。

本研究中，食管癌組織中HO-1、VEGFR-3陽性表達率顯著高于癌旁正常組織。進一步分析HO-1、VEGFR-3表達與食管癌臨床病理特征發現，臨床分期增高、分化程度降低，HO-1、VEGFR-3陽性表達率增高，且HO-1陽性表達率：低分化>中高分化，VEGFR-3陽性率以伴淋巴結轉移者更高。推測其原因可能是由于隨著瘤體增大、腫瘤發生轉移，腫瘤已進入晚期，患者癌細胞喪失了對 HO-1、VEGFR-3的負性調控功能[19,20]。說明HO-1、VEGFR-3陽性表達率越高，食管癌患者病情越嚴重，可能發生淋巴結或遠處轉移，需進一步檢查分析，避免進行一次不必要的手術。另外，多因素結果顯示，上述因子均是影響患者預后死亡的因素。說明HO-1、VEGFR-3可能成為評估食管癌患者預后的指標。

綜上，食管癌根治術患者癌組織中HO-1、VEGFR-3呈異常表達，且在食管癌發生、發展及預后評估中具有重要作用。