黑色素瘤特異性抗原在胃癌組織中的表達及對胃癌肝轉(zhuǎn)移和預后的影響

陳良新，孫 鵬，胡中舟

(河南省信陽市中心醫(yī)院，河南 信陽 464000)

胃癌是常見的消化道惡性腫瘤，也是癌癥死亡的第二大原因，每年全球約超過70萬人死亡[1]。肝臟是胃癌血行轉(zhuǎn)移最常見的部位，5%～34%的胃癌患者在根治性胃切除術后發(fā)生肝轉(zhuǎn)移[2]。盡管當前的多模式治療仍無法克服肝轉(zhuǎn)移，但早發(fā)現(xiàn)和識別有肝轉(zhuǎn)移風險的患者有利于改善臨床結(jié)局。研究表明，胃癌中存在復發(fā)模式特異性分子，識別與肝轉(zhuǎn)移相關的胃癌侵襲性表型的分子譜至關重要。黑色素瘤特異性抗原(preferentially expressed antigen of melanoma，PRAME)蛋白最初在黑色素瘤分離的細胞中被檢測到，目前研究顯示PRAME參與乳腺癌的增殖和轉(zhuǎn)移、葡萄膜黑色素瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及胃癌的肝轉(zhuǎn)移[3～5]。但PRAME是否具有評估胃癌肝轉(zhuǎn)移的潛能還不明確，本研究通過檢測PRAME在胃癌組織中的表達，分析其對肝轉(zhuǎn)移的預測價值及預后的影響，綜合評估PRAME在胃癌中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料收集2016年1月至2018年10月在我院接受手術治療的胃癌無肝轉(zhuǎn)移患者142例，納入標準：①經(jīng)組織病理確診為胃癌；②術前未接受任何抗腫瘤治療；③臨床資料完整。排除標準：①合并其他惡性腫瘤；②合并免疫性疾病；③合并嚴重肝腎功能障礙。根據(jù)術后3年是否發(fā)生肝轉(zhuǎn)移將患者分為無肝轉(zhuǎn)移組108例和肝轉(zhuǎn)移組34例。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(批準文號：20181121)，患者均知情同意。

1.2 方法

1.2.1臨床資料收集 納入研究者的一般臨床資料，包括患者的年齡、性別、腫瘤直徑、是否合并淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、血管侵犯、胃癌組織的分化程度、腫瘤標記物及胃癌組織中PRAME的表達情況。

1.2.2免疫組織化學檢測胃癌組織中PRAME表達 兩位病理科醫(yī)生在雙盲的情況下獨立閱片，每張切片隨機選取5個高倍鏡視野(200×)，染色強度評分標準：無著色、淺黃色、棕黃色和棕褐色分別為0、1、2和3分。陽性細胞比例評分標準：陽性細胞比例0%、<25%、25%～50%和≥50%分別為0、1、2和3分。PRAME低表達為染色強度評分×陽性細胞比例評分≤6分，PRAME高表達為染色強度評分×陽性細胞比例評分>6分。

1.3 統(tǒng)計學方法采用SPSS 21.0軟件行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以例數(shù)(%)表示，組間比較采用χ2檢驗，多因素Logistic回歸分析影響胃癌肝轉(zhuǎn)移的因素，ROC檢測PRAME高表達預測胃癌肝轉(zhuǎn)移的臨床價值，采用Kaplan-Meier法繪制生存曲線，Log-rank檢驗比較組間生存率。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 PRAME在胃癌組織中的表達PRAME在胃癌組織中低表達65例，高表達77例。見圖1。

圖1 PRAME在胃癌組織中的表達情況a：低表達；b：高表達(SP，×200)

2.2 是否合并肝轉(zhuǎn)移胃癌患者組織中臨床病理特征比較是否合并肝轉(zhuǎn)移胃癌患者組間年齡、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、血管侵犯、分化程度、PRAME高表達和CA72-4水平比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 是否合并肝轉(zhuǎn)移胃癌患者組織中臨床病理特征比較 [n(%)]

2.3 胃癌肝轉(zhuǎn)移的影響因素分析經(jīng)Logistic回歸分析顯示淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、血管侵犯、CA72-4>6.7 μg/L和PRAME高表達為影響肝轉(zhuǎn)移的獨立危險因素(P<0.05)。見表2。

表2 胃癌肝轉(zhuǎn)移的影響因素分析

2.4 PRAME高表達預測肝轉(zhuǎn)移的臨床價值分析

ROC曲線顯示，PRAME高表達預測肝轉(zhuǎn)移的曲線下面積為0.896，敏感度0.836，特異度0.735，對肝轉(zhuǎn)移具有一定臨床預測價值(P<0.05)。見圖2。

圖2 PRAME高表達預測胃癌肝轉(zhuǎn)移的ROC曲線

2.5 PRAME高表達對肝轉(zhuǎn)移預后的影響34例胃癌肝轉(zhuǎn)移患者中PRAME高表達27例，低表達7例。隨訪時間4～36個月，中位隨訪時間19個月，隨訪率100%。生存分析結(jié)果顯示，PRAME高表達組生存率為18.5%，低于PRAME低表達組50.0%(χ2=5.326、P=0.014)。見圖3。

圖3 PRAME高表達對胃癌肝轉(zhuǎn)移患者預后的影響

3 討論

胃癌是侵襲性和腫瘤負荷均較高的癌癥之一，發(fā)生遠處轉(zhuǎn)移較為普遍[6]。血液轉(zhuǎn)移是胃癌轉(zhuǎn)移的主要方式，由于肝臟血供豐富，門靜脈接受了胃腸道的大部分靜脈回流，導致胃癌細胞很容易通過血液轉(zhuǎn)移到肝臟，肝轉(zhuǎn)移占血液轉(zhuǎn)移的77.8%，使得胃癌肝轉(zhuǎn)移患者的生存時間和長期生存率一直很低[7]。探索一些經(jīng)濟實用可預測胃癌肝轉(zhuǎn)移的標志物，對臨床指導治療和預測生存率具有一定價值。PRAME位于染色體22q11.22，編碼一個509個氨基酸的蛋白質(zhì)。PRAME在多種腫瘤中過表達，如乳腺癌、肺癌、淋巴瘤等，其作為生物標志物的意義已被報道[8～10]。然而，PRAME在胃癌組織中的表達及對肝轉(zhuǎn)移的影響目前還不明確。

PRAME是視黃酸受體信號傳導的主要抑制因子，可防止配體誘導的受體激活，拮抗視黃酸受體信號傳導[11]。這種信號傳導對于發(fā)育、細胞命運決定和組織穩(wěn)態(tài)至關重要，因為視黃酸通過與視黃酸受體結(jié)合和激活來誘導一組靶基因的轉(zhuǎn)錄，導致細胞的分化和細胞周期停滯[12]。因此，PRAME過表達誘導的視黃酸反應性喪失可能對癌細胞有益。最近的數(shù)據(jù)還表明，PRAME可以促進上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化，導致惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移增加[8]。本研究結(jié)果顯示，肝轉(zhuǎn)移組中PRAME高表達率為79.4%，明顯高于無肝轉(zhuǎn)移組40.7%，提示PRAME高表達可能促進肝轉(zhuǎn)移的進展。另外本研究中還顯示，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、血管侵犯和CA72-4>6.7 μg/L均為肝轉(zhuǎn)移的獨立危險因素，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和血管侵犯均為腫瘤侵襲的標志，與以往肝轉(zhuǎn)移的危險因素一致[13]。CEA和CA-199在胃癌中的特異性均較低，在多種腫瘤中或非腫瘤疾病中均有升高。CA72-4在胃癌腫瘤標志物的特異性更高，手術后CA72-4水平很快降低，在70%的復發(fā)病例中，CA72-4濃度上升均早于其他指標[14,15]。

PRAME高表達預測肝轉(zhuǎn)移的曲線下面積為0.896，具有一定的臨床價值。胃癌肝轉(zhuǎn)移預示著預后不良，但最近的一項研究表明，單發(fā)肝轉(zhuǎn)移的患者可以通過手術切除獲得長期生存[2,16]。使用這種生物標志物主動監(jiān)測肝轉(zhuǎn)移的發(fā)生，提高早期手術治療的可能性。 PRAME在活檢樣本或手術標本中的表達也可作為圍手術期治療決策的有益參考。目前的證據(jù)表明，與主要防止腹膜播散的S-1相比，卡培他濱和奧沙利鉑的組合更適合用于血源性復發(fā)的患者包括肝轉(zhuǎn)移[17,18]。對于PRAME高表達的患者，治療應以抑制血源性復發(fā)為重點的輔助化療或新輔助化療，預防胃癌肝轉(zhuǎn)移，提高生存率。

本研究存在一些局限性：首先，本研究是通過檢測胃癌組織中PRAME的表達以預測肝轉(zhuǎn)移，無法對PRAME的表達進行監(jiān)測，可以考慮外周血PRAME的表達是否可以預測肝轉(zhuǎn)移的發(fā)生。其次，本研究為回顧性分析，納入的患者樣本量低，需要在包含足夠數(shù)量的肝轉(zhuǎn)移病例的前瞻性隊列中重新評估本研究結(jié)果。最后還需進一步研究PRAME過表達在胃癌肝轉(zhuǎn)移中的潛在機制。綜上所述，胃癌組織中PRAME高表達為胃癌肝轉(zhuǎn)移的獨立危險因素，對胃癌肝轉(zhuǎn)移有一定預測價值并影響其預后。