系統性硬化癥合并間質性肺疾病患者外周血C1q水平及T淋巴細胞亞群變化分析

劉 博

北京石景山醫院風濕科，北京市 100043

系統性硬化癥(SSc)是一種自身免疫性疾病，病變涉及機體多個系統，其主要病理特征為微血管損傷以及組織纖維化，臨床上主要表現為皮膚增厚、腫脹、變硬，甚至對肢體的正常功能產生影響，病情嚴重者可導致殘疾，同時患者心、肺、胃腸道等器官功能也可受到影響[1-2]。間質性肺疾病(ILD)是SSc的常見并發癥，同時也是SSc發生死亡的主要病因之一[3]。目前臨床對于系統性硬化癥合并間質性肺疾病(SSc-ILD)的具體發病機制尚未明確，但與SSc-ILD相關研究較多，使臨床對于SSc-ILD的認知進展得到推動。有研究認為補體系統異常激活是多種自身免疫性疾病的重要發病機制之一，因此機體補體水平與疾病的發展具有相關性；同時也有研究表示，隨著SSc患者的病情發展，其機體內的T淋巴細胞亞群也可隨之產生變化[4-5]。故本文分析SSc-ILD患者外周血C1q水平及T淋巴細胞亞群變化。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2016年12月—2021年11月于我院住院治療的100例SSc患者的病歷資料，根據患者是否合并ILD分為觀察Ⅰ組(SSc-ILD患者，共45例)和觀察Ⅱ組(未合并ILD的SSc患者，共55例)。同時收集同一時期于我院進行體檢的55例健康者的臨床資料作為對照組。納入標準：(1)觀察Ⅰ組和觀察Ⅱ組患者均符合臨床SSc相關診斷標準[6]，同時觀察Ⅰ組患者還符合ILD相關診斷標準[7]；(2)入組前半年內未服用過免疫抑制劑相關藥物；(3)臨床資料完整。排除標準：(1)同時存在惡性腫瘤或急性感染者；(2)由其他病因引發的間質性肺疾病，如藥物性、粉塵因素或特發性等；(3)合并其他肺部疾病者。觀察Ⅰ組男18例，女27例；年齡25～60歲，平均年齡(46.41±3.41)歲；病程5個月～10年，平均病程(5.63±1.36)年；41例出現雷諾現象，28例出現指端潰瘍；Medsger嚴重度評分為5～13分，平均評分(8.07±2.11)分。觀察Ⅱ組男15例，女40例；年齡23～61歲，平均年齡(47.03±4.52)歲；病程6～11年，平均病程(5.12±1.48)年；36例出現雷諾現象，20例出現指端潰瘍；Medsger嚴重度評分為6～11分，平均評分(7.43±1.85)分。對照組男20例，女35例；年齡22～60歲，平均年齡(46.59±3.67)歲。三組性別、年齡等一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)，均衡可比。

1.2 方法 收集三組研究對象的外周血C1q、T淋巴細胞亞群水平等數據資料。檢測方法主要為：采集患者清晨空腹靜脈血，分成2份。一份離心提取血清，使用C1q試劑盒和自動化學分析儀檢測血C1q水平。另一份使用一個流式專用管，向其中加入CD4 FITC/CD45 PC7/CD3 APC/CD8 PE四色試劑20μl，然后再加入全血樣本100μl，將二者充分混勻，并在室溫下遮光孵育15min，接著向其中加入FACELysing溶血液2ml，再次遮光孵育10min，然后以1 500r/min的轉速進行離心5min，并去掉上層清液。使用磷酸鹽緩沖液將去除上清液后的成分進行2次清洗，然后再次離心5min，并去除上層清液。最后向管內加入磷酸鹽緩沖液，通過流失細胞儀檢測CD4+、CD3+、CD8+等細胞比值。

1.3 觀察指標 (1)比較三組間外周血C1q水平；(2)比較三組間T淋巴細胞亞群水平，即CD4+、CD3+、CD8+和CD4+/CD8+水平；(3)分析SSc-ILD與C1q、T淋巴細胞亞群水平之間的關系。

2 結果

2.1 三組間外周血C1q水平比較 觀察Ⅰ組、觀察Ⅱ組、對照組外周血C1q水平分別為(210.51±10.82)mg/L、(200.49±6.54)mg/L、(190.65±5.63)mg/L，觀察Ⅰ組>觀察Ⅱ組>對照組(F=81.123，P=0.000<0.05)。

2.2 三組間T淋巴細胞亞群水平比較 三組間CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+水平差異存在統計學意義，其中觀察Ⅱ組CD3+、CD4+顯著低于對照組，觀察Ⅰ組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+顯著低于對照組，CD8+顯著高于對照組；同時觀察Ⅰ組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+顯著低于觀察Ⅱ組，CD8+顯著高于觀察Ⅱ組(P<0.05)。見表1。

表1 三組間T淋巴細胞亞群水平比較

2.3 SSc-ILD與C1q、T淋巴細胞亞群水平之間的關系分析 通過Spearman分析顯示，患者外周血C1q、CD8+水平與SSc患者發生ILD呈正相關，CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平與SSc患者發生ILD呈負相關(P<0.05)。見表2。

表2 SSc-ILD與C1q、T淋巴細胞亞群水平之間的關系分析

3 討論

SSc主要是以皮膚發生炎性反應，并逐漸發展至纖維化、硬化以及萎縮為特征，且常累及肺部組織，導致ILD的發生[8]。ILD主要表現為漸進性勞力性氣促、Velcro啰音等，病情發展嚴重時可導致雙肺組織纖維化，最終可導致呼吸衰竭甚至死亡，因此ILD是 SSc患者的主要死亡原因之一。SSc-ILD的發生發展可受到機體細胞因子、免疫細胞、趨化因子等多個因素影響，而本研究主要分析SSc-ILD患者外周血C1q水平及T淋巴細胞亞群變化。

本文結果顯示，三組間外周血C1q水平差異存在統計學意義，其中觀察I組>觀察Ⅱ組>對照組，三組間CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+水平差異存在統計學意義，其中觀察Ⅱ組CD3+、CD4+顯著低于對照組，觀察Ⅰ組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+顯著低于對照組，CD8+顯著高于對照組；同時觀察Ⅰ組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+顯著低于觀察Ⅱ組，CD8+顯著高于觀察Ⅱ組，結果表明外周血C1q、CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+水平在SSc-ILD患者的病情發展中發揮重要作用。分析其原因為，微血管病變是SSc的主要病變特征之一，同時也是導致SSc病情發展的重要因素之一。有研究[9]表明補體系統激活和免疫復合物沉積在微血管病變發生機制中發揮重要作用，而C1q作為免疫復合物中的一種重要亞單位，其可與免疫球蛋白G或免疫球蛋白M結合，然后對C1r與C1s均具有激活作用，因此C1q水平升高可在SSc-ILD的發生發展中發揮重要作用。而機體T淋巴細胞亞群在正常情況下處于平衡狀態，當機體發生病變時，平衡狀態被打破，T淋巴細胞亞群也隨之發生變化。免疫學認為CD3+水平變化可表示總T細胞水平的變化，CD4+/CD8+水平則是機體進行免疫調節的核心，當CD4+/CD8+水平失衡可表明機體細胞免疫功能受損。而SSc作為自身免疫相關性疾病，且有研究[10]表明CD8+等T細胞在抗原刺激下的細胞毒性或抑制作用與ILD的發生發展具有相關性，因此T細胞亞群變化在SSc-ILD的發生發展中發揮重要作用。通過Spearman分析顯示，患者外周血C1q、CD8+水平與SSc患者發生ILD呈正相關，CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平與SSc患者發生ILD呈負相關，研究結果進一步表明機體外周血C1q、CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平變化與SSc-ILD病情的發生發展密切相關，這與黃天磊與陳萬玲等[11-12]研究結果一致。該結論可為臨床對SSc-ILD的診治提供參考依據，可通過對SSc-ILD患者外周血C1q水平及T淋巴細胞亞群變化進行檢測而對患者實施具有針對性的免疫相關干預，可能有助于提高患者的治療效果。但本研究樣本量有限，后續可通過擴大樣本量進一步深入研究SSc-ILD患者外周血中C1q水平及T淋巴細胞亞群變化相關機制。

綜上所述，SSc患者病情的發生發展受多因素影響，其中補體系統、免疫功能均是重要因素，外周血C1q、CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+等T淋巴細胞水平變化均與SSc患者合并ILD相關，因此對其進行檢測可有利于臨床對SSc-ILD患者病情的了解、診斷和治療。