不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)孕婦易栓癥標(biāo)志物凝血酶原-III、蛋白C、蛋白S的表達(dá)及預(yù)后研究

翁碧芬 伍剛 鄭和文

519000廣東省珠海市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院產(chǎn)科1，廣東珠海

519000廣東省珠海市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院新生兒科2，廣東珠海

臨床認(rèn)為，女性與同一配偶連續(xù)≥2 次出現(xiàn)自然流產(chǎn)的現(xiàn)象稱(chēng)為復(fù)發(fā)性流產(chǎn)，＜12 周的復(fù)發(fā)性流產(chǎn)稱(chēng)為早期復(fù)發(fā)性流產(chǎn)。作為臨床常見(jiàn)的妊娠并發(fā)癥，早期復(fù)發(fā)性流產(chǎn)在妊娠女性中的發(fā)生率為1%～5%，全面排查病因后，仍有50%的患者找不到再次流產(chǎn)的發(fā)生原因，此類(lèi)患者稱(chēng)為不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)[1]。臨床研究發(fā)現(xiàn)，免疫異常、夫妻染色體異常、內(nèi)分泌異常、子宮解剖異常、感染、環(huán)境及遺傳均可導(dǎo)致早期復(fù)發(fā)性流產(chǎn)，部分患者存在多因素致病的情況，且有不少患者致病原因不明[2-3]。研究發(fā)現(xiàn)，不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)有形成血栓的傾向，進(jìn)而發(fā)展成易栓癥，影響患者的凝血及纖溶系統(tǒng)，使患者的凝血、抗凝及纖溶系統(tǒng)等相關(guān)指標(biāo)發(fā)生改變[4]。抗凝蛋白缺陷是最常見(jiàn)的遺傳性易栓癥，臨床常通過(guò)檢測(cè)抗凝血酶-Ⅲ、蛋白C 及蛋白S 等指標(biāo)，了解其與不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的關(guān)系。本研究選取廣東省珠海市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院收治的160例復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者的臨床資料進(jìn)行回顧性分析，對(duì)早期復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的病因進(jìn)行分析，通過(guò)檢測(cè)不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者與健康檢查婦女的易栓癥標(biāo)志物，了解其與不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)告如下。

資料與方法

回顧性分析2020 年10 月-2022 年10 月廣東省珠海市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院收治的160例復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者的臨床資料，了解其年齡、流產(chǎn)孕周、流產(chǎn)次數(shù)及家族遺傳史等。嚴(yán)格按照診斷標(biāo)準(zhǔn)，將篩查出的60例不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者作為觀察組，另選取60例健康體檢婦女作為對(duì)照組。觀察組年齡22～42 歲，平均(30.27±4.58)歲。對(duì)照組年齡24～44 歲，平均(30.67±4.24)歲。兩組臨床資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①觀察組均無(wú)口服避孕藥史、就診時(shí)為非妊娠期；與同一配偶自然流產(chǎn)≥2 次；流產(chǎn)孕周＜12 周。②對(duì)照組正常妊娠≥1 次，無(wú)血栓疾病史及家族遺傳史，無(wú)自然流產(chǎn)史，無(wú)妊娠期合并癥病史。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①存在認(rèn)知障礙或嚴(yán)重精神類(lèi)疾病者；②合并嚴(yán)重心腦血管疾病者；③不配合本次調(diào)查研究者。

方法：兩組均進(jìn)行如下檢查。①夫妻雙方染色體檢測(cè)：分別抽取夫妻雙方靜脈血2 mL，進(jìn)行培養(yǎng)及制片后，采用G 顯帶技術(shù)檢測(cè)，針對(duì)小片段的遺傳物質(zhì)丟失或增加而無(wú)法測(cè)定的情況，采用高分辨率的全基因組分析技術(shù)。②生殖系統(tǒng)形態(tài)檢查：對(duì)患者實(shí)施婦科檢查及陰道超聲檢查，了解其生殖道情況，有無(wú)婦科腫瘤、子宮形態(tài)異常及先天生殖道畸形等情況，如超聲檢查無(wú)法確診，可行宮腔鏡檢查。③內(nèi)分泌指標(biāo)檢測(cè)：抽取靜脈血2 mL，檢查其性激素、甲狀腺功能、口服葡萄糖耐量試驗(yàn)及空腹血糖等。④免疫指標(biāo)檢測(cè)：抽取靜脈血2 mL，檢查其抗心磷脂抗體、β2-GP1 抗體、抗雙鏈DNA 抗體及抗核抗體。⑤男性精液檢查：檢查研究對(duì)象配偶的精液常規(guī)、精子形態(tài)學(xué)檢查及精子DNA 完整性。⑥抗凝血酶-Ⅲ、蛋白C 及蛋白S 檢測(cè)：采集靜脈血2 mL，1 500 r/min 離心15 min 后，取上層血漿0.4 mL 至離心管內(nèi)，置于-80℃冰箱內(nèi)保存，待測(cè)。應(yīng)用法國(guó)思塔高診斷技術(shù)有限公司生產(chǎn)的STA-R EVOLUTION 全自動(dòng)凝血分析儀，采用發(fā)色底物法檢測(cè)抗凝血酶-Ⅲ及蛋白C，凝固法檢測(cè)蛋白S，試劑盒由STAGO 公司提供。生物參考區(qū)間：抗凝血酶-Ⅲ80%～120%；蛋白C 70%～130%；蛋白S 70%～130%。

觀察指標(biāo)：觀察早期復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的病因，比較兩組抗凝血酶-Ⅲ、蛋白C及蛋白S水平。

統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析；計(jì)數(shù)資料以[n(%)]表示，采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以()表示，采用t檢驗(yàn)；P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

早期復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的病因分析：160例復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者中，單病因患者92例，占比57.50%，自身免疫異常41例(25.62%)，夫妻染色體異常31例(19.37%)；多病因患者8例(5.00%)，不明原因患者60例(37.50%)。見(jiàn)表1。

表1 早期復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的病因分析

兩組抗凝血酶-Ⅲ、蛋白C 及蛋白S 水平比較：兩組抗凝血酶-Ⅲ水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；觀察組蛋白C、蛋白S 水平低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見(jiàn)表2。

表2 兩組抗凝血酶-Ⅲ、蛋白C及蛋白S水平比較(，%)

表2 兩組抗凝血酶-Ⅲ、蛋白C及蛋白S水平比較(，%)

兩組抗凝血酶-Ⅲ、蛋白C及蛋白S缺陷發(fā)生率比較：觀察組抗凝血酶-Ⅲ、蛋白C缺陷及蛋白S缺陷發(fā)生率均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見(jiàn)表3。

表3 兩組抗凝血酶-Ⅲ、蛋白C及蛋白S缺陷發(fā)生率比較[n(%)]

討論

胚胎染色體異常、內(nèi)分泌異常、子宮解剖結(jié)構(gòu)異常、自身免疫功能異常、感染及遺傳等均可引發(fā)復(fù)發(fā)性流產(chǎn)。復(fù)發(fā)性流產(chǎn)可引發(fā)一系列社會(huì)問(wèn)題，影響個(gè)人社會(huì)交往能力及家庭和諧，甚至導(dǎo)致夫妻感情破裂[5]。了解早期復(fù)發(fā)性流產(chǎn)發(fā)生的原因，對(duì)預(yù)防此類(lèi)疾病意義重大，但其病因在不同報(bào)告中存在差異。本研究結(jié)果顯示，單病因患者92例(57.50%)，其中自身免疫異常人數(shù)最多，共41例(25.63%)。可見(jiàn)自身免疫異常是早期復(fù)發(fā)性流產(chǎn)發(fā)生的主要原因，以往未受到重視。隨著檢測(cè)技術(shù)的不斷發(fā)展，顯示出自身免疫異常在復(fù)發(fā)性流產(chǎn)病因中的重要性。研究發(fā)現(xiàn)，不明原因流產(chǎn)患者60例，占比37.50%，可見(jiàn)不少患者病因不明，需加強(qiáng)對(duì)疾病的認(rèn)識(shí)，進(jìn)一步尋找可能影響復(fù)發(fā)性流產(chǎn)發(fā)生的因素，發(fā)現(xiàn)更多相關(guān)病因，制定更規(guī)范的篩查方式。

臨床有較多易栓癥引起復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的病例報(bào)告，但引起復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的易栓癥類(lèi)型及發(fā)病率存在一定爭(zhēng)議。由于易栓癥種類(lèi)繁雜，其類(lèi)型在不同民族及地區(qū)間的分布不均，要明確易栓癥與復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的關(guān)系，需加強(qiáng)研究[6]。抗凝血酶-Ⅲ、蛋白S 及蛋白C 缺陷是引起易栓癥的重要因素[7]，2012 年版《易栓癥診斷中國(guó)專(zhuān)家共識(shí)》指出[8]，我國(guó)人群常見(jiàn)的遺傳性易栓癥類(lèi)型為抗凝蛋白缺陷，篩查抗凝血酶-Ⅲ、蛋白S 及蛋白C 等抗凝蛋白活性，對(duì)研究不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的病因有重要意義[9]。本研究結(jié)果顯示，兩組抗凝血酶-Ⅲ水平無(wú)顯著差異，但觀察組抗凝血酶-Ⅲ缺陷發(fā)生率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，可見(jiàn)抗凝血酶缺陷與復(fù)發(fā)性流產(chǎn)相關(guān)。研究結(jié)果顯示，觀察組蛋白C 及蛋白S 活性顯著低于對(duì)照組；觀察組蛋白S 及蛋白C 缺陷發(fā)生率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，可見(jiàn)蛋白S 及蛋白C 缺陷與復(fù)發(fā)性流產(chǎn)相關(guān)，不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者的蛋白S及蛋白C活性下降。

綜上所述，早期復(fù)發(fā)性流產(chǎn)發(fā)生的原因較多，部分患者存在多因素致病的情況，不少患者致病因素不明。不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的發(fā)生與凝血酶-Ⅲ、蛋白S及蛋白C缺陷存在密切關(guān)聯(lián)。