珠勒根-其木格化學成分與藥理作用研究進展

寶 鋼， 圖諾木拉， 希古日干， 哈力嘎， 其日格爾， 敖敦格日樂， 拉喜那木吉拉

[內蒙古民族大學蒙醫藥學院，國家藥監局中藥(蒙藥)質量控制重點實驗室，內蒙古 通遼 028000]

龍膽科植物約有80屬700種，廣泛分布于世界各洲，但主要分布在北半球溫帶和寒溫帶。我國龍膽科植物有22屬427種左右，大多數的屬和種分布于西南山岳地區，其中以龍膽屬、肋柱花屬、獐牙菜屬種類為最多[1]。蒙醫常用的大多屬于珠勒根-其木格類、地格達類和吉勒澤類。本文只對珠勒根-其木格類中白花龍膽、達烏里龍膽、藍玉簪龍膽的化學成分與藥理作用進行綜述，以期為龍膽屬植物的深入研究提供依據。白花龍膽GentianaalgidaPall.為多年生草本，高15～25 cm，葉條狀披針形或矩圓狀披針形，莖生葉對生，花2～5朵著生枝頂端，黃白色，帶斑點，蒴果長圓錐形；達烏里龍膽GentianadahuricaFisch.為多年生草本，高15～25 cm，基部為殘葉纖維所包圍，根長圓錐形，黃褐色，莖常斜升，葉對生，披針形，聚傘花序，頂生或腋生，花1～3朵，蒴果矩圓形，種子橢圓形；藍玉簪龍膽GentianaveitchiorumHemsl.為多年生草本，高10～15 cm，莖生葉對生，花單生枝端，無花梗，蒴果長圓錐形，種子多數[1]。這3種藥材均為龍膽科龍膽屬植物，在蒙藥中藥用部位相同均采用干燥花，且功效相同,但白花龍膽的療效在蒙醫中為最佳。

1 本草考證

《蒙藥正典》[2]記載“珠勒根-其木格分三種，其中白色(查干)者為上品，生于高原地區草甸，秋末大地封凍之時，葉似秦艽小而綠，無莖，從地面開出四到五朵白花，有紅色光澤，簇生；藍色(呼和)者初秋生長于潮濕的沼澤草甸，形狀如上所述，葉小，花淡藍色，很明顯；黑色(哈日)者生于仲秋，狀如上述藍色者，略大，顏色鮮艷，且藍。”《認藥白晶鑒》[3]《認藥學》[4]等蒙藥本草著作所描述內容基本一致。目前，蒙醫所認用的龍膽科植物白花龍膽即查干-珠勒根-其木格，亦稱查干-邦占；達烏里龍膽即呼和-珠勒根-其木格，亦稱呼和-邦占；藍玉簪龍膽即哈日-珠勒根-其木格，亦稱哈日-邦占。這3種藥材的形態特征基本符合上述本草描述，故認定其為正品，藥用其干燥花[5]。白花龍膽分布于吉林、甘肅、新疆、四川、西藏等地[6]；達烏里龍膽分布于內蒙古、青海、甘肅、四川、河北、山西、陜西、寧夏等地；藍玉簪龍膽分布于西藏、青海、云南西北部、四川及甘肅等地。臨床上主要用白花龍膽(查干-珠勒根-其木格)，這與文獻記載“白色者為上品”[3-4,7]相符。查干-珠勒根-其木格味澀、苦，性寒，效柔、軟、稀，具有清熱、解毒、止咳、利喉咽的功效，主治咽喉腫痛、喑啞、肺熱、毒熱，臨床上查干-珠勒根-其木格與三涼藥、訶子、黃連等配伍制成的白花龍膽十味散，用于因巴達干熱而咽塞喑啞[8]；與丁香、木香、竹黃、甘草、訶子配伍制成的丁香六味散，用于咽喉腫痛；與三子、肉豆蔻、廣棗、苦參、北沙參等配伍制成的白花龍膽花十六味散，用于黏熱浸喉，肺熱引起的咳嗽[9]。

2 化學成分

2.1 萜類 萜類成分是龍膽屬植物的主要有效成分之一，是該屬植物的特征性成分。該類成分多數以糖苷形式存在，極少數以苷元形式存在，其中龍膽苦苷、獐牙菜苦苷、β-谷甾醇等在植物中分布比較廣泛。藥理研究表明，龍膽類植物的抗炎作用與其中的環烯醚萜苷類成分有關[10]。楊倩等[11]以龍膽苦苷為對照品，采用紫外分光光度法測定10批小秦艽花樣品中總環烯醚萜的含量，測得其含量范圍為67.95～155.16 mg/g。熊子增等[12]以齊墩果酸為對照品，采用紫外分光光度法測定10批小秦艽花樣品中總三萜含量，測得其含量范圍為24.98～92.77 mg/g。劉圓等[13]采用RP-HPLC法測定白花龍膽和藍玉簪龍膽中的龍膽苦苷含量，測得龍膽苦苷在藍玉簪龍膽中的含量為183.783 mg/g，在白花龍膽中的含量為109.382 mg/g。白雪等[14]首次建立區帶毛細管電泳測定白花龍膽中龍膽苦苷、齊墩果酸、熊果酸含量的方法，與高效液相色譜法相比，此方法具有操作方便、進樣量少、分析時間較短等優點。白雪等[15]還通過膠束毛細管電泳法同時測定白花龍膽和達烏里龍膽中的獐牙菜苦苷、獐牙菜苷、龍膽苦苷、馬錢苷酸含量。雷瓊等[16]采用膠束毛細管電泳法同時測定白花龍膽、達烏里龍膽和藍玉簪龍膽中的龍膽苦苷、獐牙菜苷、獐牙菜苦苷、落干酸這4種環烯醚萜類成分的含量，發現此方法穩定可行。王文驪[17]采用高效液相色譜法對藍玉簪龍膽中龍膽苦苷的含量進行測定，結果發現龍膽苦苷與其他組分分離效果良好。盧永昌等[18]采用反相高效液相色譜法同時測定藍玉簪龍膽花中落干酸、獐牙菜苦苷、龍膽苦苷、獐牙菜苷的含量，發現該方法簡便，結果準確且可靠。李姍等[19]采用HPLC測定方法比較高原地區多基源藏藥蒂達的4種龍膽科植物藍玉簪龍膽、肋柱花、鋪散肋柱花和橢圓葉花錨中的3種環烯醚萜苷類化合物獐牙菜苦苷、獐牙菜苷和龍膽苦苷的含量，結果發現龍膽苦苷只存在于藍玉簪龍膽中，而獐牙菜苦苷、獐牙菜苷在藍玉簪龍膽中的含量小于肋柱花和鋪散肋柱花中的含量，由此可知，環烯醚萜苷類成分可以作為區分龍膽科不同屬植物的標志性成分。珠勒根-其木格中萜類化合物見圖1、表1。

圖1 珠勒根-其木格中萜類化合物結構

表1 珠勒根-其木格中萜類化合物

2.2 黃酮類 龍膽中含有多種黃酮類成分,主要有異葒草苷、異牡荊苷、獐牙菜素等。張秀艷等[26]從小秦艽Gentianadahurica干燥花中分離得到12種黃酮類成分，其中8種成分是從該植物中首次分離得到，包括山柰酚(49)、柚皮素(50)、木犀草素(52)、(2S)-5,4′-二羥基-7-O-β-D-葡萄糖-2,3-二氫黃酮(53)、芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(54)、木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(55)、芹菜素-6-C-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-葡萄糖苷(56)、木犀草素-6-C-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-葡萄糖苷(57)。白雪等[14]首次建立區帶毛細管電泳測定白花龍膽中異葒草苷含量的方法，同時也建立了膠束毛細管電泳法測定龍膽科藥材白花龍膽和達烏里龍膽中異葒草苷含量的方法。丁艷霞等[30]采用HPLC法同時測定達烏里龍膽花中異葒草苷、異牡荊苷的含量，測得其含量范圍分別為1.11～7.46、0.59～1.70 mg/g。珠勒根-其木格中黃酮類化合物見圖2、表2。

圖2 珠勒根-其木格中黃酮類化合物結構

表2 珠勒根-其木格中黃酮類化合物

圖3 珠勒根-其木格中山酮類化合物結構

2.4 有機酸類 Yang等[25]從白花龍膽中首次分離得到5個有機酸類化合物，分別為油酸(71)、亞油酸(72)、二十九烷酸(73)、2,3-二羥基苯甲酸乙酯(74)、鄰苯二甲酸正丁異丁酯(75)，見圖4、表4。

圖4 珠勒根-其木格中有機酸類化合物結構

表3 珠勒根-其木格中山酮類化合物

表4 珠勒根-其木格中有機酸類化合物

2.5 生物堿類 秦艽本身不含生物堿，但在提取分離過程中使用氨液，使得化學很不穩定的龍膽苦苷(裂環烯醚萜類)與氨水產生反應，形成矯作物，得到秦艽堿甲素(76)、秦艽堿丙素(77)等。目前，生物堿仍然是秦艽主要質量標準控制成分之一。珠勒根-其木格中生物堿類化合物見圖5、表5。

2.6 甾體類 甾體類化合物在自然界中廣泛存在，是一種以環戊烷駢多氫菲的甾體母核的成分。目前，從達烏里龍膽的根部分離得到3個甾體類化合物，分別為ajugasterone C(79)、20-hydroxyecdysone(80)、20-hydroxyecdysone 3-acetate(81)[10]，見圖6、表6。

圖5 珠勒根-其木格中生物堿類化合物結構

表5 珠勒根-其木格中生物堿類化合物

圖6 珠勒根-其木格中甾體類化合物結構

表6 珠勒根-其木格中甾體類化合物

2.7 木脂素類 木脂素類化合物屬于植物雌激素，具有清除體內自由基、抗氧化、抗衰老、抗癌等作用。目前，從達烏里龍膽的根部分離得到1個新的木脂素類化合物，為7S,8R,8R-(-)-lariciresinol-4,4′-bis-O-β-D-glucopyranoside(87)[10]，見圖7、表7。

2.8 香豆素類 Wang等[10]從達烏里龍膽的根部分離得到coniferin(88)，白花龍膽中分離得到5,8-二羥基呋喃香豆素(89)[19]，見圖8，表8。

圖7 珠勒根-其木格中木脂素類化合物結構

表7 珠勒根-其木格中木脂素類化合物

圖8 珠勒根-其木格中香豆素類化合物結構

表8 珠勒根-其木格中香豆素類化合物

2.9 微量元素 田靜等[36]采用電感耦合等離子體質譜法測定達烏里龍膽中的Fe、Ni、Cu、Zn、As、Ag、Cd、Pb、Cr、Mn等10種金屬元素的含量，結果發現，Fe、Zn、Mn等元素在達烏里龍膽中的含量較高，As、Ag、Cd等元素的含量較低。

3 藥理作用

3.1 抗炎 楊芳等[37]研究發現，白花龍膽花水提取物和乙醇提取物中、高劑量組對于二甲苯所致的小鼠急性耳腫脹和小鼠腹部毛細管通透性都有抑制作用，提示白花龍膽花具有抗炎活性。劉紅等[38]通過實驗證實，白花龍膽提取物對氨水導致的大鼠急性咽炎模型有改善作用，其作用機制可能與降低腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)水平有關。嘎魯等[39]通過小鼠耳腫脹實驗和肉芽腫實驗發現，白花龍膽醇提物在一定濃度下具有抗炎作用。

3.2 抗氧化 鄔衛東等[40]研究發現，小秦艽花總黃酮有較強的清除DPPH自由基的能力，且具有較好的抗氧化活性；隨后，鄔衛東等[41]對小秦艽花乙醇提取物依次進行石油醚、乙酸乙酯、水飽和正丁醇萃取，結果不同極性部位均具有一定的抗氧化活性，其中乙酸乙酯部位和正丁醇部位具有清除DPPH自由基和羥基自由基的能力。Dou等[42]研究發現，從藍玉簪龍膽花中提取分離出來的芹菜素是黃酮類化合物，它具有抗氧化活性，不僅能減少活性氧的產生，而且能調節膽固醇新陳代謝。

3.3 抗病毒 衛飛鵬等[43]研究發現，藍玉簪龍膽水煎液相比正丁醇、氯仿、乙酸乙酯提取液，在抑制病毒進入細胞方面效果顯著，同時用藍玉簪龍膽水煎液灌胃治療感染呼吸道合胞病毒(RSV)的小鼠，病理切片顯示，與對照組比較，藥物組小鼠炎性滲出明顯減輕；免疫熒光實驗顯示，經藥物處理的切片熒光亮度及顆粒數均減少，提示藍玉簪龍膽在抗RSV增殖和抗RSV引起的炎癥2個方面都表現出一定效果。

3.4 抗菌 劉菁菁等[44]將藍玉簪龍膽分別以乙醇、氯仿、正丁醇、蒸餾水提取，得到不同極性部分的產物，且各極性組分對耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)和甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌(MSSA)菌株均有不同程度的抑菌作用，其中正丁醇組分的抑菌作用最強，其次為乙醇、水層組分。耿曉玲等[45]研究發現，藍花龍膽提取物對金黃色葡萄球菌和大腸桿菌具有抑制作用。耿曉玲等[46]還采用固液浸提法來提取藍玉簪龍膽花中的有效成分，并通過體外抑菌試驗評價其抑菌作用，結果表明，藍玉簪龍膽花提取液對金黃色葡萄球菌的抑菌作用最為明顯，MIC值為99.3 mg/L，對大腸桿菌(MIC值為225.5 mg/L)和白色念珠菌(MIC值為126.8 mg/L)的抑制作用其次，對沙門氏菌和志賀氏痢疾桿菌的抑菌作用不明顯(MIC值均大于250 mg/L)。

3.5 保肝 Cao等[47]研究發現，達烏里龍膽乙醇提取物可以減輕小鼠的肝臟損傷及脂肪變性，其作用可能與調節甘油三酯和膽固醇的過程有關。Zhang等[48]研究發現，藍玉簪龍膽甲醇提取物對四氯化碳誘導的小鼠肝臟損傷有保護作用，其部分作用是由于它通過清除四氯化碳相關的自由基的能力。李鵬等[49]將大鼠隨機分為正常組、模型組和藍玉簪龍膽組，除正常組外均注射二甲基亞硝胺來建立大鼠肝纖維化模型，同時給予相應藥物治療，檢測各組大鼠血清中谷丙轉氨酶和透明質酸，肝組織中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、單胺氧化酶(MAO)等指標，結果發現，與模型組比較，藍玉簪龍膽組大鼠肝組織中的MAO、MDA水平降低，SOD、GSH水平升高，HE和Masson染色觀察到肝纖維化程度改善。

3.6 抗腫瘤 樊慧等[50]研究表明，從小秦艽提取分離得到的2個三萜類化合物具有一定的抗MCF-7乳腺癌細胞增殖作用。

3.7 其他 耿錚等[51]將藍玉簪龍膽乙醇提取液濃縮并經正丁醇、乙酸乙酯、氯仿、石油醚萃取，得到不同極性部分產物，除正常組外將其余各組小鼠誘導成慢性支氣管炎模型，造模成功后給藥治療，檢測各組小鼠肺組織總抗氧化能力(T-AOC)、SOD活性，血清中TNF-α、IL-10水平變化，HE染色觀察各組小鼠肺組織病理學變化，結果顯示，與模型組比較，正丁醇組、水層組小鼠肺組織T-AOC活性升高，乙酸乙酯組、正丁醇組小鼠肺組織SOD活性升高，乙酸乙酯組、正丁醇組小鼠血清中TNF-α、IL-10水平降低(P<0.05，P<0.01)，HE染色病理切片表明，經藍玉簪龍膽乙醇提取液各極性組分治療后，乙酸乙酯組、正丁醇提取物組小鼠慢性支氣管炎氣道損傷顯著改善。

4 小結及展望