舍曲林對輕度認(rèn)知障礙伴抑郁的療效及對神經(jīng)炎癥影響的研究

胡耀華 陳明森 陳建 林秀潔 王志堅(jiān)

自1999年以來，輕度認(rèn)知功能障礙（mild cognitive impairment，MCI）[1]日漸為人們重視。一項(xiàng)調(diào)查顯示我國輕度認(rèn)知障礙的患病率為14.7%[2]。中國北方社區(qū)老年人輕度認(rèn)知障礙發(fā)生率甚至達(dá)到驚人的24%[3]。我國老年人癡呆的患病率在不斷上升，預(yù)防和治療輕度認(rèn)知障礙（MCI）對降低癡呆的發(fā)生率具有重要意義[4]。越來越多的研究[5-6]認(rèn)為輕度認(rèn)知障礙的病理機(jī)制和早期的病理特征就是神經(jīng)炎癥。抑郁癥是一種老年人的常見病，經(jīng)常與癡呆共病，也是一種高致殘的精神疾病，許多老年抑郁癥患者受損的認(rèn)知功能及日常生活能力經(jīng)過治療仍然很難改善[7]。如果有必要有效預(yù)防一種疾病，了解其病因至關(guān)重要，免疫-炎癥假說是抑郁癥病理生理醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)[8]。目前研究者普遍認(rèn)為抑郁癥的發(fā)生和發(fā)展與生物、心理和社會(huì)因素均有關(guān)，而在生物因素中起主導(dǎo)作用的是免疫系統(tǒng)[9]。目前為止，針對藥物治療對神經(jīng)炎癥影響的研究較少，本研究旨在探討舍曲林對輕度認(rèn)知障礙伴抑郁患者輔助性T細(xì)胞17（T helper cell 17，Th17）及相關(guān)炎癥因子的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2020年6月—2021年12月福州神經(jīng)精神病防治院老年科、神經(jīng)內(nèi)科和精神科門診及住院部明確診斷輕度認(rèn)知障礙患者70例入組。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合 “中國癡呆與認(rèn)知障礙診治指南寫作組” 發(fā)布的《2018中國癡呆與認(rèn)知障礙診治指南》的MCI診斷標(biāo)準(zhǔn)[10]；（2）年齡≥60歲；（3）經(jīng)過簡易智力狀態(tài)檢查量表（mini-mental state examination，MMSE）[11]、蒙特利爾認(rèn)知評估量表（Montreal cognitive assessment，MoCA）（北京版）[12-13]、日常生活活動(dòng)能力評定量表（activities of daily living，ADL）、張明園等根據(jù)Lawtont和Brody編制的日常生活活動(dòng)量表漢化修訂20項(xiàng)版[14]、漢密爾頓抑郁量表（17項(xiàng)）（Hamilton depression scale，HAMD 17）[15]評估；（4）入組前獲得患者或其監(jiān)護(hù)人對本研究知情同意并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）有嚴(yán)重影響自殺行為傾向者；（2）繼發(fā)于器質(zhì)性精神心理疾病、物質(zhì)依賴和其他精神病性障礙；（3）依從性差、系流動(dòng)人口等；（4）患有嚴(yán)重肝臟疾患、腎功能衰竭、惡性腫瘤、感染性疾病、風(fēng)濕性疾病、自身進(jìn)行免疫治療疾病、營養(yǎng)狀況不良性疾病、近期有手術(shù)史者。根據(jù)漢密爾頓抑郁量表（HAMD）17項(xiàng)評分≥7分為輕度認(rèn)知障礙伴抑郁組（文章中以下簡稱A組），共入組35例，同時(shí)將HAMD 17項(xiàng)評分＜7分為輕度認(rèn)知障礙無抑郁組（文章中以下簡稱B組），共入組35例；另選年齡和性別匹配的35例健康受試者為健康對照組（文章中以下簡稱C組）。入組時(shí)抽取患者血常規(guī)、生化全套血樣標(biāo)本和采集HAMD 17、ADL、MMSE、MoCA量表等相關(guān)材料進(jìn)行評估。本研究開展前經(jīng)福州神經(jīng)精神病防治院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。共入組105例受試者，完成研究104例受試者。其中A組脫落1例，完成34例；B組完成35例；C組35例。三組一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），兩兩比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1 三組一般資料比較

1.2 方法

1.2.1 外周血中Th17細(xì)胞檢測 無菌采集符合研究入選標(biāo)準(zhǔn)的A組、B組、C組研究者1 mL晨8：00—11：00空腹時(shí)外周抗凝血，置于含10%胎牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)基（ 美國Thermo公司）中，加入莫能霉素、離子霉素及佛波酯（Phorbol myristate acetate，PMA）等工作液并混勻，37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4 h。而后加入流式抗體CD4-PE、CD3-FITC 4℃避光孵育30 min，再加入紅細(xì)胞裂解液，經(jīng)過15 min冰浴后加入流式染色緩沖液重懸收集細(xì)胞，邊渦旋邊加入固定破膜劑避光孵育20 min，最后直接加入0.625 μL的IL-17A-APC流式抗體進(jìn)行染色。使用流式細(xì)胞檢測儀測定Th17細(xì)胞的百分率，采用FlowJo分析處理流式實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

1.2.2 血清中IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-17表達(dá)水平檢測 無菌采取符合研究入選標(biāo)準(zhǔn)的A組、B組患者及C組對照者晨起空腹?fàn)顟B(tài)前臂外周抗凝血3 mL，自然狀態(tài)下靜置30 min，3 000 r/min，高速離心5 min，收集上層血清，將其置于-80℃低溫冰箱保存。標(biāo)本收集完畢后以ELISA法檢測患者及健康對照者血清中白細(xì)胞介素17（interleukin 17，IL-17）的表達(dá)水平，實(shí)驗(yàn)過程均按ELISA檢測試劑盒說明書步驟進(jìn)行，檢測人細(xì)胞因子白細(xì)胞介素6（interleukin 6，IL-6）、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白細(xì)胞介素1β（interleukin 1β，IL-1β）、IL-17，檢測結(jié)果由酶標(biāo)儀讀取生成標(biāo)準(zhǔn)曲線后計(jì)算最終結(jié)果。

1.3 藥物治療

A組患者在入組后給予舍曲林（浙江京新藥業(yè)股份有限公司，國藥準(zhǔn)字：H20051076，規(guī)格：50 mg×14片×2板）口服至觀察結(jié)束，1次/d，50～100 mg/次，治療6周，治療期間不可使用丙戊酸鹽、鋰鹽、其他各種抗抑郁藥物、抗精神病藥和電抽搐等物理治療，治療期間可根據(jù)睡眠情況酌情使用苯二氮卓類藥物。

1.4 觀察指標(biāo)

采集三組受試者基本資料，包括性別、年齡、受教育程度、月平均收入、體質(zhì)量指數(shù)。檢測三組受試者外周血Th17細(xì)胞百分比，IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-17水平。另外A組受試者還要檢測經(jīng)舍曲林治療后外周血Th17細(xì)胞百分比、IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-17水平。評估A組受試者治療前后MMSE評分、MoCA評分、ADL評分、HAMD評分及各因子分。

MMSE量表總分30分，得分越高說明認(rèn)知功能越好，結(jié)合受試者受教育程度設(shè)立不同的癡呆界定值：文盲≤17分，小學(xué)≤20分，中學(xué)及以上≤24分，分界值以下為有認(rèn)知功能缺陷，以上為正常[11]。MoCA總分30分，≥26分者為正常，教育年限≤12年則總分加1分[13]。ADL 20項(xiàng)版本總分范圍20～80分，＞20分為功能損害[14]。HAMD 17項(xiàng)總分≥24分可能為嚴(yán)重抑郁，24分＞總分≥17分可能為中度抑郁，17分＞總分≥7分可能為輕度抑郁，總分＜7分沒有抑郁。HAMD 17項(xiàng)可歸納為5類因子結(jié)構(gòu)：（1）焦慮/軀體化，由精神性焦慮、軀體性焦慮、胃腸道癥狀、全身癥狀、疑病和自知力等6項(xiàng)組成。評分區(qū)間0～16分；（2）體質(zhì)量，由體質(zhì)量減輕一項(xiàng)組成。評分區(qū)間0～2分；（3）認(rèn)知障礙，由自罪感、自殺、激越3項(xiàng)組成。評分區(qū)間0～12分；（4）阻滯，由抑郁情緒、工作和興趣、阻滯和性癥狀4項(xiàng)組成。評分區(qū)間0～14分；（5）睡眠障礙，由入睡困難、睡眠不深和早醒3項(xiàng)組成。評分區(qū)間0～6分[15]。這樣更可以反映患者病情的實(shí)際特點(diǎn)，也可以反映靶癥狀群的治療效果。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

全部數(shù)據(jù)采用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，計(jì)量資料以（±s）表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以n（%）表示，比較采用χ2檢驗(yàn)，三組間比較采用單因素方差分析。以α=0.05作為檢驗(yàn)水準(zhǔn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 外周血Th17細(xì)胞百分比及相關(guān)炎癥因子水平比較

A組、B組、C組三組的外周血Th17細(xì)胞百分比、相關(guān)炎癥因子水平有差異，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=26.634、48.281、16.729、10.301、69.806，P＜0.05）。比較A組、B組的外周血Th17細(xì)胞百分比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。A組IL-1β、IL-6、IL-17、TNF-α水平高于C組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意 義（P＜0.05）。B組IL-1β、IL-6、IL-17、TNF-α水 平高于C組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。A組、B組之間的外周血Th17細(xì)胞百分比、相關(guān)炎癥因子水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 三組外周血Th17細(xì)胞百分比，IL-1β、IL-6、IL-17、TNF-α水平比較

2.2 A組患者治療前后外周血Th17細(xì)胞百分比、IL-1β、IL-6、IL-17、TNF-α水平比較

A組患者經(jīng)舍曲林治療后外周血Th17細(xì)胞百分比、IL-1β、IL-6、IL-17、TNF-α水平較治療前有所下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表3。

表3 A組患者治療前后外周血Th17細(xì)胞百分比、IL-1β、IL-6、IL-17、TNF-α水平比較（±s）

表3 A組患者治療前后外周血Th17細(xì)胞百分比、IL-1β、IL-6、IL-17、TNF-α水平比較（±s）

時(shí)間 Th17細(xì)胞百分比（%）IL-1β（pg/mL）IL-6（pg/mL）IL-17（pg/mL）TNF-α（pg/mL）治療前（n=34） 12.38±1.65 15.84±3.80 9.60±2.04 9.13±1.38 16.65±3.44治療后（n=34） 7.48±0.76 12.03±2.31 5.39±1.49 7.01±0.47 12.88±1.52 t值 18.529 9.251 6.874 6.322 8.165 P值 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000

2.3 A組治療前后MoCA評分、ADL評分、HAMD17總分和各因子分比較

A組經(jīng)舍曲林治療后MoCA評分、MMSE評分較治療前有所升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；ADL評分、HAMD17總分和各因子分較治療前有所下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表4。

表4 （續(xù)）

表4 A組患者治療前后MMSE評分、MoCA評分、ADL評分、HAMD17總分和各因子分比較（分，±s）

表4 A組患者治療前后MMSE評分、MoCA評分、ADL評分、HAMD17總分和各因子分比較（分，±s）

時(shí)間 MMSE評分 MoCA評分 ADL評分 HAMD17總分治療前（n=34） 25.24±1.05 23.38±1.65 22.44±1.52 18.41±4.48治療后（n=34） 27.88±0.77 26.47±0.99 20.35±0.65 5.50±1.44 t值 -14.061 -15.132 9.820 18.497 P值 0.000 0.000 0.000 0.000

3 討論

本研究通過比較輕度認(rèn)知障礙伴抑郁患者組、輕度認(rèn)知障礙無抑郁患者組及健康對照組的Th17細(xì)胞百分比及相關(guān)炎癥因子的水平；通過比較輕度認(rèn)知功能障礙伴抑郁患者組經(jīng)過舍曲林治療前后Th17細(xì)胞百分比及相關(guān)炎癥因子的水平發(fā)現(xiàn)輕度認(rèn)知功能障礙伴抑郁患者體內(nèi)存在免疫系統(tǒng)功能異常。

許多研究表明[16-18]，阿爾茨海默病（Alzheimer disease，AD）早期即出現(xiàn)廣泛的炎癥反應(yīng)，炎癥反應(yīng)主動(dòng)參與病程進(jìn)展，炎癥反應(yīng)所起到的作用的重要性等同于β-淀粉樣蛋白及過度磷酸化的tau蛋白。在患者血漿和腦脊液中的促炎細(xì)胞因子水平與t-tau和p-tau共同使患者大腦出現(xiàn)病理改變，并且高度相關(guān)；隨訪顯示容易發(fā)展為阿爾茨海默病的是那些腦脊液中有高水平腫瘤壞死因子α受體的MCI患者，AD患者和MCI患者的血漿血清和腦脊液炎癥因子水平較高，炎癥在β-淀粉樣蛋白（Aβ）和過度磷酸化的tau蛋白（tau）病理出現(xiàn)之前已經(jīng)存在，炎癥可能與AD患者認(rèn)知衰退有關(guān)。腫瘤壞死因子α（TNF-α）是一種多效性的、有效促炎的細(xì)胞因子，深度介入到炎癥反應(yīng)的引發(fā)和維持中。白細(xì)胞介素1β（IL-1β）是人體炎癥反應(yīng)的始動(dòng)環(huán)節(jié)，通過促進(jìn)小膠質(zhì)細(xì)胞增殖，利于白細(xì)胞介素6細(xì)胞因子（IL-6）的釋放，使黏附因子、細(xì)胞因子不斷增加，產(chǎn)生炎癥反應(yīng)，最終引起神經(jīng)細(xì)胞變性壞死，從而導(dǎo)致不同程度認(rèn)知障礙情況[5]。IL-6一般由膠質(zhì)細(xì)胞、神經(jīng)元合成，可以通過炎癥反應(yīng)導(dǎo)致Aβ-淀粉樣蛋白異常生成，從而導(dǎo)致癡呆[19]。T輔助（Th17）細(xì)胞產(chǎn)生IL-17，與許多炎癥和自身免疫疾病的發(fā)病機(jī)制有關(guān)[20]，在包括阿爾茲海默癥和多發(fā)性硬化在內(nèi)的炎性腦疾病中發(fā)揮重要作用。目前研究認(rèn)為，抑郁癥的病理機(jī)制在于抑郁癥患者體內(nèi)包括TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-17等免疫炎癥細(xì)胞因子發(fā)生了水平變化，免疫活化物增加，上述改變對抑郁癥的治療影響很大[21]。

本研究顯示，輕度認(rèn)知障礙伴抑郁組、輕度認(rèn)知障礙無抑郁組Th17細(xì)胞百分比高于健康對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），輕度認(rèn)知障礙伴抑郁組Th17細(xì)胞百分比大于輕度認(rèn)知障礙無抑郁組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；輕度認(rèn)知障礙伴抑郁組、輕度認(rèn)知障礙無抑郁組炎癥細(xì)胞因子（IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-17）均高于健康對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），輕度認(rèn)知障礙伴抑郁組炎癥細(xì)胞因子（IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-17）高于輕度認(rèn)知障礙無抑郁組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。輕度認(rèn)知障礙伴抑郁組使用舍曲林治療前后Th17細(xì)胞百分比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），炎癥細(xì)胞因子（IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-17）水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。上述結(jié)果表明，抑郁癥的發(fā)病機(jī)制與Th17細(xì)胞及炎癥細(xì)胞因子（IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-17）分泌紊亂為標(biāo)志的免疫紊亂導(dǎo)致的神經(jīng)炎癥有關(guān)，與一篇綜述結(jié)論一致[22]。輕度認(rèn)知障礙的發(fā)病也與炎癥細(xì)胞因子分泌紊亂為標(biāo)志的免疫紊亂導(dǎo)致的神經(jīng)炎癥有關(guān)，與PILLAI等[23]的研究一致。

經(jīng)過舍曲林治療，輕度認(rèn)知障礙伴抑郁組患者M(jìn)MSE評分、MoCA評分較治療前升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；治療后HAMD17評分（包括焦慮/軀體化、體質(zhì)量、認(rèn)知障礙、阻滯、睡眠障礙5項(xiàng)因子分）和ADL評分較治療前有所下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。本研究顯示，舍曲林通過改善抑郁癥狀也改善了認(rèn)知功能和日常生活活動(dòng)功能。這與最近一篇綜述的結(jié)論一致[24]。最近國外的一項(xiàng)動(dòng)物試驗(yàn)[25]證實(shí)了與舍曲林同類的藥物氟西汀在阿爾茨海默病非轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型中的防止神經(jīng)變性與抗氧化作用。

綜上所述，本研究認(rèn)為輕度認(rèn)知障礙伴抑郁患者體內(nèi)存在免疫紊亂導(dǎo)致的神經(jīng)炎癥，通過舍曲林治療能改善輕度認(rèn)知障礙伴抑郁患者的抑郁癥狀與認(rèn)知功能。但是因?yàn)闆]有進(jìn)行足夠的長期隨訪，對舍曲林針對輕度認(rèn)知障礙患者認(rèn)知功能的遠(yuǎn)期療效不明確，今后可以開展這方面的研究。