糞便微生物檢驗在兒童腹瀉診斷中的效果

魏 娜

（盤錦市盤山縣疾病預防控制中心，遼寧 盤錦 124107）

小兒腹瀉是臨床中常見的一種兒科疾病，主要是由于病毒、細菌等感染所導致，患兒以腹瀉為臨床癥狀表現的一種疾病，其中以細菌感染較為常見[1]。這是因為兒童自身氣管組織發育尚未完全，其抵抗力較弱，容易受到病原微生物的感染。臨床中患兒主要表現為大便次數增多、大便性狀改變等癥狀，同時還可能伴有發熱、腹痛及嘔吐等癥狀[2]。通常情況下，患兒起病較急，如未進行及時治療，長時間腹瀉可能會導致患兒的機體水分大量丟失，引起患兒出現水電解質紊亂、脫水等現象，嚴重時還可能導致患兒出現休克。這不僅會損害患兒的身體健康，影響患兒正常的生長發育，還可能危及患兒的生命安全[3]。由于不同病因治療方法也各不相同，因此及時采取針對性治療對改善患兒臨床癥狀、促進患兒疾病恢復具有重要意義。近年來，隨著現代醫學技術的不斷發展，微生物檢驗在臨床診斷中的應用范圍越來越廣泛，其中就包括腹瀉疾病的診斷[4-5]。為了研究糞便微生物檢驗在兒童腹瀉診斷中的應用效果，本研究對抽取的腹瀉兒童樣本均實施了糞便微生物檢驗，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析我疾控中心于2014年5月至2019年5月抽取的80例腹瀉兒童樣本作為本次研究對象，其中男性患兒49例，女性患兒31例，年齡4個月～8歲，平均年齡（5.37±1.37）歲，病程2～11 d，平均病程（6.83±1.63）d。所有患兒在入院時均表現為大便次數增多及性狀改變，有患兒出現發熱、嘔吐等癥狀。本次研究中所有患者家屬均同意并且簽署知情同意書，本中心也批準本次研究。納入標準：家長同意研究的患兒樣本；診斷為腹瀉疾病的患兒樣本；各項臨床資料齊全的患兒。排除標準：不合格的患兒樣本。

1.2 方法 對本次研究中所抽取的患兒糞便標本均實施糞便微生物檢驗，并按照《全國檢驗操作流程》進行微生物檢驗，具體方法為：在確定所有受試兒童后，收集患兒的基本數據，包括腹瀉開始時間、腹瀉頻次、大便特征、用藥情況等，與患兒家屬進行溝通，解釋糞便微生物檢測的原理和操作步驟，使患兒家屬及其患兒盡可能配合研究。具體測試步驟如下：①樣品采集。為每個患兒進行樣本采集，需要準備五個無菌棉簽。根據多點采集法，如果患兒標本有膿、血或黏液，需要單獨采集。如果糞便是液體，則盡可能多地選擇絮狀物，并盡可能多地將其包裹在棉簽表面。采集后將樣本放入皮氏培養皿中。然后將其送至實驗室進行檢查。收集約5 g糞便，將其置于無菌糞便取樣杯中。部分兒童需要采集病毒和寄生蟲樣本。②檢測的具體措施。采集樣品接種在SS板和McConkey板上。需要在35 ℃下保持18～24 h。培養后，根據結果對病原體進行分離和鑒定。通過自動微生物鑒定和分析進行分離，然后采用K-B法進行藥敏試驗，以確定患者的抗生素應用情況。培養條件為35 ℃，培養18～24 h。檢測后，觀察患者的細菌抑制情況，并對藥敏結果和病原菌類型進行分析。藥敏試驗后，選擇免疫層析膠體金進行輪狀病毒檢測。糞便樣品需冷凍，稀釋1∶9，靜置15 min后選擇合適的樣品進行解釋；用逆轉錄聚合酶鏈反應檢測小二分法病毒。檢測結果采用逆轉錄模板法進行PCR。對于寄生蟲檢測，需要將樣品制成固定膜，并在顯微鏡下觀察。

1.3 觀察指標 觀察本次研究中患兒的糞便微生物檢出情況，并且記錄病原菌的菌群數量以及占比情況。詳細分析檢驗的具體結果，記錄具體病原菌的檢出比例情況，觀察不同病原菌對不同藥物產生耐藥性的情況。

1.4 統計學方法 使用SPSS20.0軟件對數據進行統計學分析，使用χ2和%表示計數資料，P＜0.05表示數據差異有統計學意義。

2 結果

2.1 80例兒童腹瀉病原菌的分布情況 本次研究中共有80例患兒，通過對所有患兒均實施糞便微生物檢驗后，其中共檢測出63例菌株，檢出率為78.75%；對檢測出的菌落群進行觀察分析，志賀菌26例，占比41.27%，沙門菌11例，占比17.46%，致病性大腸埃希菌13例，占比20.63%，產毒性大腸桿菌10例，占比15.87%，其他3例，占比4.76%，其中志賀菌占比41.27%分別高于致病性大腸埃希菌的20.63%及沙門菌的17.46%，差異均有統計學意義（P＜0.05），其中志賀菌與致病性大腸埃希菌（χ2=6.276，P=0.012），志賀菌與沙門菌（χ2=8.609，P=0.003）。

2.2 80例兒童腹瀉病原菌耐藥性具體分布情況 志賀菌對藥物產生耐藥性共17例，其中對頭孢帕酮產生耐藥性8例，對頭孢噻肟產生耐藥性5例，對頭孢三嗪產生耐藥性4例，對環丙沙星產生耐藥性7例，對阿莫西林產生耐藥性4例；致病性大腸埃希菌對藥物產生耐藥性共13例，對頭孢帕酮產生耐藥性5例，對頭孢噻肟產生耐藥性3例，對頭孢三嗪產生耐藥性2例，對環丙沙星產生耐藥性6例，對阿莫西林產生耐藥性5例；沙門菌對藥物產生耐藥性共23例，對頭孢帕酮產生耐藥性8例，對頭孢噻肟產生耐藥性7例，對頭孢三嗪產生耐藥性7例，對環丙沙星產生耐藥性12例，對阿莫西林產生耐藥性13例；產毒性大腸肝菌對藥物產生耐藥性共10例，對頭孢帕酮產生耐藥性7例，對頭孢噻肟產生耐藥性2例，對頭孢三嗪產生耐藥性2例，對環丙沙星產生耐藥性5例，對阿莫西林產生耐藥性6例，幾類藥物中，病原菌對頭孢哌酮產生耐藥性概率最高，頭孢噻肟、頭孢三嗪及環丙沙星和阿莫西林產生耐藥性較低，所有病菌對藥物耐藥性概率對比無統計學意義（P＞0.05）。

2.3 80例腹瀉患兒病原菌季節分布情況 在80例患兒中出現63例感染病原菌，主要分布在夏季和秋季，夏季出現28例，秋季出現35例，可見患兒在夏秋季易受到病原菌的感染。

3 討論

腹瀉是消化內科的一種常見疾病，主要指排便次數明顯增加同時大便呈稀薄狀，水分增加，每日排便量超過200 g[6]。其中兒童腹瀉可以分為幾種不同類型，以細菌性腹瀉最為常見，包括真菌、細菌、病毒及原蟲等[7]。在患病以后，患兒主要表現為大便次數多，性狀改變，同時伴發熱、嘔吐、腹痛等癥狀，這不僅嚴重影響了患兒的日常生活，同時如果腹瀉癥狀未及時得到控制，患兒還可能會出現水電解質紊亂或脫水現象，嚴重時還可能導致其死亡。由于不同病原微生物引起，其治療方法也各不相同。因此及時了解導致患兒腹瀉的具體病原菌，并且及時采取相應的針對性治療對于腹瀉患兒來說具有重要意義[8]。

近年來，隨著我國社會經濟的不斷發展，現代醫療技術也隨之不斷發展，使得醫學檢驗的自動化水平也在不斷提高，微生物檢驗技術成為了臨床診斷中一項重要的檢查技術。根據相關研究顯示，將糞便微生物檢查技術運用于兒童腹瀉疾病的診斷中，能夠有效提高患兒的檢驗準確率，為患兒的針對性治療提供有效依據[9]。在實際檢驗的過程中，通過將采集的糞便標本進行細菌培養，可以有效分離出其中的致病菌株，在這個過程中如果發現了耐藥菌，則能夠從分子分型中明確患兒感染的具體原因，最終為治療工作的開展提供可靠依據。本次研究中，通過對80例腹瀉兒童樣本進行糞便微生物檢驗，之后再實施細菌培養并利用全自動微生物鑒定儀進行鑒別，以此來分析所有患兒的致病菌株種類及占比。發現80例患兒樣本中共檢測出63例致病菌株，檢出率為78.75%。再通過對致病菌株進行分離，發現志賀菌占比最高，占所有致病菌株的41.27%，其余占比大小依次為致病性大腸埃希菌、沙門菌及產毒性大腸桿菌等。將志賀菌占比與致病性大腸埃希菌占比、沙門菌占比進行對比后，發現志賀菌占比明顯更高，差異均存在統計學意義（P＜0.05）。

得到的具體指導依據，①6個月以下兒童體內IgA含量高，機體抵抗力強。隨著年齡的增長，IgA將減少，耐藥性將降低，感染病原微生物的風險將增加。1歲以上兒童的腸道功能會逐漸改善，對病原微生物的抵抗力也會增強。此時，感染率將下降。②病原微生物分布在80例患兒中，分離出60株病原微生物，其中細菌主要為大腸桿菌和沙門氏菌。根據醫院以往的治療經驗，在感染的病毒中，輪狀病毒感染最為常見。一旦被感染，將影響患兒身體對葡萄糖和水的吸收，導致其腹瀉。這提醒我們要重視嬰幼兒腹瀉輪狀病毒感染引起的急性腹瀉的診斷和治療，提高治療的針對性，改善患兒預后。③季節分布流行病學研究表明，嬰幼兒急性腹瀉的發病率在夏季和秋季最高。基于此，為進一步探討急性腹瀉患兒病原微生物感染的季節規律，本研究比較了夏季和秋季急性腹瀉患兒的數據。結果表明，夏季急性腹瀉患兒細菌感染較常見，秋季病毒感染較常見，提示急性腹瀉患兒夏季應重視細菌感染，秋季應重視病毒感染，從而達到針對性治療，提高治療效果，改善預后。④藥敏試驗結果本研究還分析了感染性病原體的耐藥性，以指導臨床合理應用抗生素。藥敏試驗結果表明，在這幾類藥物之中，病原菌對頭孢哌酮產生耐藥性的概率最高，頭孢噻肟、頭孢三嗪及環丙沙星和阿莫西林產生的耐藥性較低。⑤防治措施根據以上分析，建議嬰幼兒急性腹瀉的防治可采取以下措施，以提高臨床療效和預后，主要包括：母乳喂養，提高嬰幼兒抵抗力，發揮積極的預防作用；加強對急性腹瀉患兒的隔離治療，防止交叉感染；重視嬰幼兒飲食健康，并注意飲食和水源的消毒管理；根據病原微生物檢測結果和藥敏試驗結果，制訂治療方案，合理使用抗生素，提高治療效果和預后。

根據本次研究的試驗結果可以得知在腹瀉患兒中，志賀菌感染是細菌性腹瀉疾病中最為常見的菌種，而志賀菌感染引起腹瀉的患兒年齡大多在2周歲以上，這是由于2周歲以下的兒童通過從母體乳汁中可以獲得相應特異性抗體，能夠對兒童的身體起到一定保護作用。然而隨著兒童年齡的增長，其身體中的特異性抗體數量在不斷減少，因此兒童身體的抵抗力也在不斷降低，最終很容易發生細菌性腹瀉的現象。因此臨床中在為細菌性腹瀉患兒進行治療時，在為患兒進行糞便微生物檢驗的過程中，可以將檢驗重點放在志賀菌上，這樣不僅能夠有效提高檢查結果的準確性，同時還可以為臨床醫師的診斷提供有效依據，可以防止抗生素濫用的現象發生。除了需要及時為腹瀉患兒采取有效的治療對策以外，及時防止腹瀉疾病的發生也具有非常重要的意義。因此臨床中可以將志賀菌作為預防腹瀉疾病的重點內容，如需要叮囑兒童在日常生活中多洗手，食用瓜果蔬菜前需要將其徹底洗凈或煮熟，以此減少感染志賀菌的概率，最終能夠有效防止腹瀉疾病的發生。因糞便微生物檢驗在兒童腹瀉中具有較好的臨床應用價值，可以為醫師的后續治療提供有效依據，同時還可以將菌株占比較高的病原微生物作為腹瀉疾病預防的重點內容，有效減少兒童腹瀉發生的概率。

綜上所述，多種病原菌感染均可導致兒童患上腹瀉疾病，通過對患兒進行糞便微生物檢驗后，發現在所有致病菌中，以志賀菌感染最為常見，其余則是致病性大腸埃希菌、沙門菌以及產毒性大腸桿菌等，通過根據檢測的病原微生物進行針對性治療，能夠有效提高治療效果，從而更快的促進患兒疾病康復，因此糞便微生物檢驗值得大力推廣于臨床試驗中。同時對于患兒細菌性腹瀉的治療，應充分考慮病原微生物檢測結果和藥敏試驗結果，掌握病原微生物的分布規律，使得抗生素合理應用，避免濫用。本研究還存在著一些問題，如研究樣本量總量較小、樣本范圍過小、研究內容有限等不足，使得研究價值有限。在今后的研究中，我們需要進一步完善樣本量，增大樣本范圍，適度增加或調整研究的內容，從而能夠更加真實、科學地反映臨床研究的實際情況，為臨床治療患兒的細菌性腹瀉提供參考。