標本溶血對生化檢驗中電解質等指標的影響

尋丹 胡嫻 楊沙沙

作者單位：湖南省職業病防治院檢驗科，湖南 長沙 410000

在臨床檢驗科室中標本溶血現象較為普遍，由于臨床檢查標本未及時送檢或者采集環節不規范等情況，均可能會造成出現標本溶血情況[1]。有相關臨床表明，標本溶血會導致最終檢測指標發生一定程度的變化，并且在標本溶血環節中相關因素（如繼發性理化）的影響，均會不同程度造成臨床檢測指標出現異常波動或者精確度較低[2-3]。現階段對于標本溶血對生化檢驗結果產生影響的相關研究資料較為豐富。但是其對于電解質、心肌酶等生化檢測指標的影響還未進一步明確，同時局部指標研究結果存在爭議性，為此還需開展研究進一步證實[4]。鑒于此，文章通過研究分析標本溶血對生化檢驗中相關指標（電解質、心肌酶）所帶來的臨床影響，旨在提供臨床檢測結果的準確性，現內容如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取湖南省職業病防治院2021 年4 月—2022 年4 月開展生化檢驗的外周血液樣本（研究數量為150 份），將其視為本研究觀察對象。納入指標：（1）外周血液樣本并未受到任何不良污染。（2）并未出現凝血塊等物質。（3）在送檢過程中未發生溶血情況。排除指標：（1）血液疾病者。（2）重要臟器功能障礙者。（3）患有器質性疾病。本研究經醫院倫理委員會批準后才實施

1.2 方法

對全部送檢樣本進行離心干預，轉速控制在1 000 r/min，離心時間為5 min，使用全自動生化分析儀（日本日立公司，型號：760-020）對電解質、肝功能以及血脂等相關生化指標進行檢測，采取免疫發光法對N 末端B 型腦鈉肽前體（N-terminal portion of pro-brain natriuretic peptide，NT-proBNP）和肌鈣蛋白Ⅰ（cardiac troponin Ⅰ，cTnⅠ）進行檢測。溶血操作如下：對血塊進行攪動，促使血液樣本出現溶血情況，進行離心干預（轉速控制在3 000 r/min，離心時間為10 min），當肉眼能夠觀察到血清顏色為淡紅色時，則可使用血球分析儀器（日本SYSMEX（希森美康）公司，型號：XN-20AI，血常規型號：XN-1000）對血紅蛋白（hemoglobin，HGB）濃度水平進行檢測，根據其溶血情況將其劃分為輕中度溶血組（即HGB 濃度水平小于4 g/L，n=116）以及重度溶血組（HGB 濃度水平大于4 g/L，n=34）。

1.3 觀察指標

研究分析溶血前后以及溶血情況不同的檢測樣本在電解質（K、Na、Cl、Ca）、心肌酶[肌酸激酶（creatine kinase，CK）、肌酸激酶同工酶（creatine kinase isoenzyme，CK-MB）、前體N末端前腦利鈉肽（NT-proBNP）和肌鈣蛋白Ⅰ（cTnⅠ）]、血脂水平相關指標[總膽固醇（serum total cholesterol，TC）、三酰甘油（triglyceride，TG）、高密度脂蛋白膽固醇（high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（lowdensity lipoprotein cholesterol，LDL-C）]、肝功能相關指標[丙氨酸氨基轉移酶（alanine aminotransferase，ALT）、天門冬氨酸氨基轉移酶（aspartate aminotransferase，AST）、總蛋白（total protein，TP）]的變化情況[5]。

1.4 統計學方法

數據均放置于SPSS 25.0 統計學軟件進行計算，計量資料以（±s）表示，采用t檢驗。以P＜0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 電解質相關指標的變化情況

較之溶血前，外周血樣檢測樣本中電解質（K、Cl 以及Ca）相關指標水平均明顯增加，并且較之輕中度溶血組而言，重度溶血組上述電解質指標水平均更高，差異有統計學意義（P＜0.05）；然而在溶血前、溶血后Na 指標水平差異無統計學意義（P＞0.05），見表1。

表1 電解質相關指標水平的變化情況（mmol/L， ±s）

表1 電解質相關指標水平的變化情況（mmol/L， ±s）

注：t1、P1 值為輕中度溶血與溶血前對比的統計值，t2、P2 值為重度溶血與溶血前對比的統計值，t3、P3 值為重度溶血與輕中度溶血對比的統計值。

組別 K Na Cl Ca溶血前（n=150） 4.22±0.23 129.76±2.26 95.56±3.79 2.39±0.27輕中度組（n=116） 5.09±0.39 129.89±3.51 105.94±4.13 2.57±0.42重度組（n=34） 6.32±0.41 129.95±3.76 112.23±5.24 3.12±0.45 t1 值 22.697 0.366 21.298 4.238 P1 值 0.000 0.715 0.000 0.000 t2 值 40.701 0.385 21.452 12.378 P2 值 0.000 0.701 0.000 0.000 t3 值 15.986 0.086 7.327 6.607 P3 值 0.000 0.931 0.000 0.000

2.2 心肌酶

較之溶血前，外周血樣檢測樣本中心肌酶（CK、CK-MB、NT-proBNP 以及cTnⅠ）相關指標水平均明顯增加，并且較之輕中度溶血組而言，重度溶血組上述電解質指標水平均更高，差異有統計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 心肌酶相關指標的變化情況（±s）

表2 心肌酶相關指標的變化情況（±s）

注：t1、P1 值為輕中度溶血與溶血前對比的統計值，t2、P2 值為重度溶血與溶血前對比的統計值，t3、P3 值為重度溶血與輕中度溶血對比的統計值。

組別 CK（U/L） CK-MB（U/L） NT-proBNP（μg/L） cTnⅠ（μg/L）溶血前（n=150） 86.76±8.16 8.46±1.13 80.34±6.96 0.011±0.002輕中度組（n=116） 136.75±14.59 13.45±2.14 120.65±9.98 0.028±0.005重度組（n=34） 157.22±15.08 20.92±3.12 143.26±11.34 0.039±0.009 t1 值 35.419 24.491 38.766 37.919 P1 值 0.000 0.000 0.000 0.000 t2 值 37.911 39.130 41.743 34.783 P2 值 0.000 0.000 0.000 0.000 t3 值 7.140 16.003 11.257 9.213 P3 值 0.000 0.000 0.000 0.000

2.3 血脂水平相關指標

較之溶血前，外周血樣檢測樣本中血脂（TC、LDL-C）相關指標濃度水平均明顯增加，并且較之輕中度溶血組而言，重度溶血組上述電解質指標水平均更高，差異有統計學意義（P＜0.05）；然而在溶血前、溶血后TG 指標水平與HDL-C 指標水平差異無統計學意義（P＞0.05），見表3。

表3 血脂水平相關指標（mmol/L，±s）

表3 血脂水平相關指標（mmol/L，±s）

注：t1、P1 值為輕中度溶血與溶血前對比的統計值，t2、P2 值為重度溶血與溶血前對比的統計值，t3、P3 值為重度溶血與輕中度溶血對比的統計值。

組別 TC TG HDL-C LDL-C溶血前（n=150） 7.96±1.13 1.44±0.43 2.38±0.22 0.89±0.23輕中度組（n=116） 8.99±1.13 1.45±0.49 2.37±0.24 1.13±0.32重度組（n=34） 9.83±1.22 1.47±0.55 2.42±0.29 1.31±0.43 t1 值 7.372 0.177 0.353 7.113 P1 值 0.000 0.860 0.724 0.000 t2 值 8.585 0.348 0.899 7.977 P2 值 0.000 0.728 0.370 0.000 t3 值 3.743 0.204 1.017 2.656 P3 值 0.000 0.839 0.311 0.001

2.4 肝功能相關指標

較之溶血前，外周血樣檢測樣本中肝功能（ALT、AST 以及TP）相關指標濃度水平均明顯增加，并且較之輕中度溶血組而言，重度溶血組上述肝功能相關指標水平均更高，差異有統計學意義（P＜0.05），見表4。

表4 肝功能相關指標（±s）

表4 肝功能相關指標（±s）

注：t1、P1 值為輕中度溶血與溶血前對比的統計值，t2、P2 值為重度溶血與溶血前對比的統計值，t3、P3 值為重度溶血與輕中度溶血對比的統計值。

組別 ALT（IU/L） AST（IU/L） TP（g/L）溶血前（n=150） 16.79±2.22 20.13±2.89 72.69±2.46輕中度組（n=116） 20.93±0.79 33.23±3.07 74.26±3.13重度組（n=34） 26.79±2.74 45.42±3.22 85.36±4.74 t1 值 19.162 35.677 4.581 P1 值 0.000 0.000 0.000 t2 值 22.664 45.095 22.200 P2 值 0.000 0.000 0.000 t3 值 20.450 20.137 16.021 P3 值 0.000 0.000 0.000

3 討論

標本存放的具體時長或者所使用的采血管的不同均可能會對標本采取環節中發生血細胞溶解等不良情況，從而造成血漿或者血清總血紅蛋白指標濃度水平呈明顯的上升趨勢[6-7]。就血細胞溶解環節而言，通常情況下會隨著顯著理化因素的改變，細胞內部不同離子物質會逐漸釋放，從而進入血液之中，病情細胞內部的相關大分子結合物質（例如肌鈣蛋白與線粒體代謝產物等）指標水平均呈限制的上升趨勢。有相關臨床研究表明，通過研究分析一定數量的血液檢測樣本（數量為1 136 份），其中有部分血液樣本（數量為139 份）出現溶血情況，并且一些血樣檢測樣本溶血率已經超過25%[8]。究其原因，其一，可能是因為血液樣本采集之后環境穩定具備不穩定性；其二，可能是由于轉運時長相對較久等因素的影響[9]。通過對出現溶血現象的血液樣本研究可知，溶血樣本檢測值波動性相對較為明顯，指標水平的精確度相對較低，以至于可靠性不高。

電解質（如K、Cl 以及Ca 等）作為臨床診治過程中能夠清楚反映出患者實際衰竭或者代謝或者電解質紊亂等情況中的主要評估指標之一，其會在血細胞溶解過程中大規模地釋放與產生，能夠一定對有關電解質波動情況起到中和作用，所以臨床上對于電解質相關臨床檢測指標有無限制變化情況依舊存在著一定程度的爭議[10-11]。本研究結果顯示，在溶血后的外周血血液檢測樣本中電解質相關指標水平均顯著高于溶血前的水平。由此可見，檢測標本中K、Ca 以及Cl 等電解質指標水平會一定程度上受到溶血影響，然而在本研究中沒有切實觀察到溶血后電解質Na 指標水平的變化情況，可能是因為細胞外部Na 指標水平相對較高，細胞內部一些Na 指標水平在發生外流后并不會受到Na 數量的變化。為此Na 水平具備一定程度穩定性，并且K、Cl 等相關電解質離子變化和細胞分解后細胞質內部或者內質網內部有關離子的產生存在密切關聯性[12]。心肌酶（如CK、CK-MB 等）相關指標水平是臨床表現心肌梗死或者其他心血管相關疾病的一項關鍵參考指標，并且其所獲得的臨床檢測值存在較為突出的臨床意義[13-14]。本研究結果可知，心肌酶的變化情況比較限制。有相關臨床研究表明，在對溶血標本進行檢測時，溶血后的CK 與CK-MB 等相關心肌酶指標水平均大約增加了25%、30%，并且伴隨著溶血時間不斷增加，溶血程度則會呈明顯的上升趨勢，并且上述心肌酶評估指標水平的變化程度也會更加明顯[15-16]。就機制角度出現，此種情況可能和溶血時間較久而造成血漿之中有關心肌酶譜的積聚情況存在密切關聯性，同時也可能是由于溶血后血漿中相互結合情況的心肌酶譜釋放有關。本研究結果顯示，溶血后血脂相關指標（TC、LDL-C）水平產生顯著的改變，然而并沒有切實觀察到TG、HDL-C 的改變，在臨床檢測過程中HDL-C 與LDL-C 均能夠將其視為評估心血管疾病的主要危險影響因素。通過對HDL-C 與LDL-C 進行檢測，其具備良好的穩定性，能夠將其視為臨床溶血中比較可靠、準確的評估參考依據[17-19]。本研究結果還表明，溶血后樣本肝功能相關指標水平（如ALT、AST 以及TP）均呈顯著上升趨勢，就機制方面而言，溶血后肝功能相關指標水平的明顯上升可能和下面因素存在密切關聯，具體如下：其一，肝功能相關指標水平在血細胞內部具備一定表達情況，溶血后因為線粒體膜組織的通透性提高，進而導致肝功能相關指標水平的產生與釋放[20]。其二，在實際溶血環節中，因為血漿（繼發性）中不同細胞成分的不斷積聚，能夠明顯推動內質網或者線粒體應激反應更加強烈，從而導致肝功能有關指標水平波動更加限制。

綜上，標本溶血對于生化檢測結果之中電解質（如K、Ca 等）、心肌酶（如CK、CK-MB 等）、肝功能相關指標水平（ALT、AST 以及TP）以及血脂相關指標水平（TC、LDL-C）均存在較為顯著的影響，然而在溶血后患者血清檢測樣本中HDL-C 與TG 等相關指標水平的變化卻不太限制，為此應該進一步擴大研究樣本數量，對上述相關指標水平的具體機制進一步深度研究與分析。此外，文章中體現了《溶血指數質量指標建立與標本管理專家共識》[21]的臨床參考或執行標準。