血清α1-MG和NGAL在狼瘡腎炎早期診斷中的臨床價值

馬 珍，楊朝美

重慶市第四人民醫院/重慶市急救醫療中心：1.感染與疾病預防控制科；2.檢驗科，重慶 400014

系統性紅斑狼瘡(SLE)是一種自身免疫介導的多器官、系統損害的結締組織病，腎臟是其損傷的主要靶器官之一，部分SLE患者早期或病程中可出現狼瘡腎炎(LN)。SLE患者LN的發病率為50%～70%，LN是SLE患者死亡的常見原因[1]。LN是最常見的繼發性腎小球腎炎，如能早期發現并采取積極的治療措施，將有助于LN患者腎功能的恢復[2]。中性粒細胞明膠酶相關載脂蛋白(NGAL)是脂質運載蛋白家族成員之一，主要表達于中性粒細胞、巨噬細胞、脂肪細胞，由腎臟代謝。有研究表明，在腎損傷的早期，血、尿NGAL水平開始升高，因此NGAL在預測腎損傷方面具有較高的特異度和靈敏度[3]。血清α1-微球蛋白(α1-MG)是肝細胞和淋巴細胞產生的一種糖蛋白，其水平可反映腎小球濾過功能，并可早期診斷腎損傷[4]。本研究通過分析LN患者血清α1-MG、NGAL水平變化，探討其對LN的早期診斷價值，以助于臨床早期發現LN并積極采取治療措施改善SLE患者的預后。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年3月至2021年4月本院收治的LN患者102例作為LN組，其中男11例，女91例；年齡20～52歲，平均(32.27±7.11)歲。另選擇同期本院健康體檢者114例作為對照組，其中男13例，女101例；年齡22～54歲，平均(31.71±7.26)歲。LN組與對照組性別、年齡比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2納入及排除標準 納入標準：(1)SLE診斷符合2019年歐洲抗風濕病聯盟更新的《系統性紅斑狼瘡管理指南》標準[5]；(2)LN診斷符合《中國狼瘡腎炎診斷和治療指南》標準[6]，在SLE基礎上出現以下1項及以上臨床和實驗室檢查異常時，即可診斷為LN，①尿蛋白持續>0.5 g/24 h，或隨機尿蛋白+++，或尿蛋白肌酐比值>50 mg/mmol；②活動性尿沉渣(除尿路感染外，尿白細胞>5個/高倍鏡視野，尿紅細胞>5個/高倍鏡視野)，或紅細胞管型，或白細胞管型；③細胞管型包括紅細胞管型、顆粒管型、血紅蛋白管型、管狀管型或混合管型；④腎穿刺活檢病理結果為免疫復合物介導的腎小球腎炎；(3)臨床資料完整。排除標準：(1)合并其他自身免疫性疾??；(2)合并原發性腎小球疾病或其他繼發性腎臟??；(3)合并高血壓、糖尿病、腫瘤；(4)合并血液系統疾?。?5)合并泌尿系統感染等其他影響腎功能的炎癥性疾病；(6)哺乳期或妊娠期女性。

1.3儀器與試劑 貝克曼AU5821全自動生化分析儀購自美國貝克曼庫爾特公司；血清尿素(Urea)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)、胱抑素C(Cys C)檢測試劑由寧波瑞源生物科技有限公司提供；α1-MG、NGAL檢測試劑由四川新健康成生物股份有限公司提供。

1.4方法 對所有研究對象抽取清晨空腹靜脈血3～4 mL，采血管為促凝管，3 000 r/min離心5 min，取血清檢測Urea、Cr、UA、Cys C、α1-MG、NGAL水平。

2 結 果

2.1兩組血清α1-MG、NGAL、Urea、Cr、UA、Cys C水平比較 LN組血清α1-MG、NGAL、Urea、Cr、Cys C水平與對照組比較，差異有統計學意義(P<0.05)；兩組血清UA水平比較，差異無統計學意義(P>0.05)，見表1。

表1 兩組血清α1-MG、NGAL、Urea、Cr、UA、β2-MG、Cys C水平比較[M(P25,P75)]

組別nCysC(μmol/L)α1-MG(mg/L)NGAL(ng/mL)LN組1021.31(0.88,3.56)38.90(32.70,59.15)269.70(218.00,421.25)對照組1140.79(0.69,0.87)17.10(14.90,18.70)135.20(111.50,185.60)Z-4.492-4.343-4.590P<0.001<0.001<0.001

2.2LN發生的影響因素分析 將表1中兩組比較差異有統計學意義的指標納入多因素Logistic回歸分析模型，結果顯示，血清α1-MG、NGAL水平升高是LN發生的獨立危險因素(P<0.05)，見表2。

表2 LN發生的多因素Logistic回歸分析結果

2.3LN患者血清α1-MG和NGAL水平的相關性分析 Pearson相關分析結果顯示，LN患者血清α1-MG、NGAL水平呈正相關(r=0.749，P<0.05)。

2.4血清α1-MG、NGAL對LN的診斷效能 ROC曲線分析結果顯示，α1-MG診斷LN的曲線下面積(AUC)為0.723，靈敏度為64.7%，特異度為93.0%。NGAL診斷LN的AUC為0.814，靈敏度為73.5%，特異度為86.0%。兩項聯合檢測的AUC為0.842，靈敏度為73.5%，特異度為86.3%。見表3、圖1。

表3 血清α1-MG、NGAL診斷LN的效能

圖1 血清α1-MG、NGAL診斷LN的ROC曲線

3 討 論

LN主要由循環或原位免疫復合物沉積導致腎小球固有細胞增生、基底膜破壞和炎癥細胞浸潤所致，是最常見的繼發性免疫性腎小球疾病[7]。相關文獻顯示，有75%～90%的SLE患者伴有不同程度的腎損傷，其中有21%左右可進展為尿毒癥[8]。腎穿刺活檢是明確LN病理類型的“金標準”，但侵入性操作難度大、風險高，患者難以接受，不利于密切跟蹤LN進展情況。探討引起LN的危險因素，尋找靈敏度高、特異性強、非侵入性、便于監測的新型生物標志物，對LN早期診斷、臨床治療效果評估等具有重要意義。

近年來，實驗室早期診斷腎損傷的新型生物標志物越來越多[9]。NGAL是一種相對分子質量為25×103的小分子分泌蛋白，其mRNA可在人體中的很多組織和器官中表達，當肝臟、腎臟的上皮細胞受到損傷時會釋放核轉錄因子(NF)-κB誘導NGAL產生并進入血液。有研究發現，在正常生理狀態下，在腎組織中NGAL幾乎不表達，且腎臟的濾過清除作用可以使血液中的NGAL水平保持相對穩定[10-11]，但是腎臟在發生缺血性損傷或腎毒性藥物損傷后，血清及尿液中NGAL水平可明顯升高，在腎損傷發生2 h達高峰，其水平變化早于Urea、Cr等生物標志物，能更早地預測腎損傷[12]。NGAL在血液和尿液中的水平變化可早期反映腎小球濾過功能有無損傷，其臨床價值已在多種類型腎損傷的臨床研究中得到證實，被認為是研究最廣泛的腎損傷早期診斷生物標志物之一[13-14]。相關研究表明，血清及尿NGAL水平與LN腎損傷指數有關，在活動性LN中其水平顯著升高，提示NGAL在早期診斷LN、預測LN的發生方面具有潛在價值[15]。α1-MG主要是由淋巴細胞和肝臟恒定產生的一種糖蛋白，能自由通過腎小球濾過膜，絕大部分在腎近曲小管被重吸收并代謝，當腎臟重吸收功能障礙或腎近曲小管受損時，血清α1-MG水平快速升高，可作為早期腎損傷的一個特異性標志物，同時α1-MG既有不易受實驗檢測因素干擾的優勢，又可反映腎臟基底膜通透性及腎小球濾過膜損傷程度[16]。

本研究結果顯示，LN組血清Urea、Cr、Cys C、α1-MG、NGAL水平與對照組比較，差異有統計學意義(P<0.05)，提示上述指標在LN患者中表達水平異常，可能可作為LN的診斷標志物，但其中部分指標受食物、藥物等外源性因素影響較大，用于LN早期診斷的價值有限。如早期腎損傷時，血清Cr、Urea水平往往要在24～72 h后才緩慢升高；血清Cys C 水平盡管與性別、種族、肌肉質量和水合狀態無關，但可能受甲狀腺功能障礙、吸煙、炎癥、某些癌癥和糖皮質激素的影響，在腎小球病變早期其診斷靈敏度低于NGAL[17]。UA是嘌呤代謝的終末產物，其由受損細胞產生，可促進免疫炎癥反應，受內外源性因素干擾較大，有關研究報道，不同程度腎損傷的SLE患者血清UA水平差異明顯，較高的血清UA水平會增加SLE患者發生腎損傷的風險，合并高尿酸血癥的SLE患者常伴有嚴重的腎損傷[18]。本研究中，LN組血清UA水平與對照組比較，差異無統計學意義(P>0.05)，提示血清UA作為LN診斷指標的效果可能并不理想。

本研究中，多因素Logistic回歸分析結果顯示，血清α1-MG、NGAL水平升高是LN發生的獨立危險因素(P<0.05)，此外，LN患者血清α1-MG與NGAL水平呈正相關(P<0.05)。有研究證實，在糖尿病腎病中血清NGAL和α1-MG水平也存在高度相關性，二者對輔助診斷早期腎損傷有重要價值[11,16,19]。ROC曲線分析結果顯示，血清α1-MG、NGAL聯合檢測對LN有較高的診斷效能，優于各指標單獨檢測。

綜上所述，血清NGAL和α1-MG水平升高是LN發生的獨立危險因素，且二者對LN的診斷價值較高，可作為早期診斷LN的有效生物標志物。但由于本研究為單中心研究，結果可能存在一定偏倚，結果有待后續多中心、大樣本量的臨床研究進一步證實。