缺鐵性貧血患兒Flt-3L、TF、25（OH）D檢測的臨床意義

趙曉敏， 江曉宇， 單凱莉， 單鐵英， 劉秀珍

（邯鄲市中心醫院兒科，河北 邯鄲 056000）

缺鐵性貧血是由鐵攝入不足、需求量增加、吸收障礙、丟失過多等多種因素引起體內鐵元素缺乏，血紅素合成減少而引起的[1]，是嬰幼兒常見的慢性疾病之一。嬰幼兒期是人快速生長發育的黃金階段，如這個時期外源性鐵攝入不足，極易發生鐵元素缺乏，從而引起缺鐵性貧血，嚴重危害嬰幼兒健康[2]。缺鐵性貧血不僅可造成嬰幼兒免疫、神經、肌肉等各系統、器官的功能損傷，還會對智力發育造成不可逆的影響[3]。因此，早期發現和診斷是降低嬰幼兒缺鐵性貧血發生率的關鍵。FMS樣酪氨酸激酶3配體（FMS-like tyrosine kinase 3 ligand，Flt-3L）是早期造血生長因子，可以單獨或與其他細胞因子協同增強原始造血干細胞的增殖和分化，進而增強機體的造血功能，是與造血和免疫功能密切相關的調控因子[4-5]。Flt-3L還能促進樹突狀細胞的增殖和成熟，激活機體的天然免疫反應[6]。轉鐵蛋白（transferrin，TF）屬于急性時相反應蛋白，能準確反映機體內鐵的利用水平及貯存量，其主要的生理功能是與鐵結合后將其運送到細胞內[7]。另外，TF與炎癥反應和免疫應答也存在一定的聯系[8]。25-羥基維生素D[25-hydroxyvitamin D，25（OH）D]在嬰幼兒的生長發育中起著重要作用[9]。目前，臨床針對缺鐵性貧血的篩查多以傳統血常規、體內鐵代謝指標等檢測為主，存在一定的漏診風險。為此，本研究擬探討Flt-3L、TF、25（OH）D對嬰幼兒缺鐵性貧血的輔助診斷價值。

1 材料和方法

1.1 研究對象

選取2019年3月—2021年3月邯鄲市中心醫院兒科確診的缺鐵性貧血患兒128例（缺鐵性貧血組），其中男66例、女62例，年齡5～36個月；按貧血的嚴重程度分為輕度貧血[血紅蛋白（hemoglobin，Hb）為90～110 g/L]61例、中度貧血（Hb為60～89 g/L）55例、重度貧血（Hb<60 g/L）12例。選取同期邯鄲市中心醫院確診的非缺鐵性貧血患兒68例（非缺鐵性貧血組），其中男31例、女37例，年齡6～49個月；包括巨幼細胞性貧血29例、再生障礙性貧血15例、溶血性貧血24例。另選取同期邯鄲市中心醫院體檢健康嬰幼兒100名作為正常對照組，其中男51名，女49名，年齡5～45個月。各組間年齡、性別差異均無統計學意義（P>0.05）。本研究經過邯鄲市中心醫院倫理委員會批準（審批號：2019003）。

納入標準：（1） 符合《鐵缺乏癥和缺鐵性貧血診治和預防多學科專家共識》[10]和《兒童缺鐵和缺鐵性貧血防治建議》[11]中關于缺鐵性貧血的診斷標準；（2）血清鐵蛋白（serum ferritin，SF）<15 μg/L，血清鐵（serum iron，SI）<10.7 μmol/L；（3）無慢性出血，且3個月內未服用過鐵劑；（4）近期無消化道、呼吸道等感染；（5）患兒家屬同意并簽署知情同意書。

排除標準：（1）患心、肺、肝、腎等重要臟器的嚴重疾病；（2）患嚴重的免疫系統疾病或血液系統疾病；（3）近期服用過治療缺鐵性貧血的相關藥物；（4）由不明原因出血導致的貧血；（5）患兒依從性差。

1.2 方法

1.2.1 紅細胞相關指標測定 采用抗凝管采集所有對象清晨空腹靜脈血3 mL，采用ADVIA 2120i全自動血液分析儀（德國西門子公司）及配套試劑檢測Hb、紅細胞平均體積（mean corpuscular volume，MCV）、紅細胞平均血紅蛋白含量（mean corpuscular hemoglobin，MCH）、紅細胞平均血紅蛋白濃度（mean corpuscular hemoglobin concentration，MCHC）。

1.2.2 血清Flt-3L、TF、25（OH）D、SI水平測定 采用促凝管采集所有對象清晨空腹靜脈血4 mL，分裝于2管，1 000×g離心20 min，分離血清，-80 ℃保存待檢。采用酶聯免疫吸附試驗檢測血清Flt-3L、TF、25（OH）D、SI水平。Flt-3L試劑盒購自美國Abcam公司[批號ab4598753，最低檢出限為4.7 pg/mL，線性范圍為4.7～300.0 pg/mL，批間、批內變異系數（coefficient of variation，CV）分別為4.19%、4.29%，標準曲線r2=0.998]。TF、25（OH）D和SI試劑盒均購自上海晶抗生物工程有限公司[批號分別為JLC7702-3245、JLC480-431、JLC7453-31；TF試劑盒的最低檢出限為0.25 g/L，線性范圍為0.25～8.00 g/L，批間、批內CV分別為10.0%、11.5%，標準曲線r2=0.997；25（OH）D試劑盒最低檢出限為1.5 ng/mL，線性范圍為1.5～48.0 ng/mL，批間、批內CV分別為10%、11%，標準曲線r2=0.999；SI試劑盒最低檢出限為1.25 μmol/L，線性范圍為1.25～40.00 μmol/L，批間、批內CV分別為10%、12%，標準曲線r2=0.999]。

1.3 統計學方法

采用SPSS 13.0軟件進行統計分析。呈正態分布的計量資料以±s表示，多組間比較采用方差分析，兩兩比較采用獨立樣本t檢驗。計數資料以例或率表示，組間比較采用χ2檢驗。采用Logistic回歸分析評估嬰幼兒發生缺鐵性貧血的危險因素。采用受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線評價各項指標診斷缺鐵性貧血的效能。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 缺鐵性貧血組、非缺鐵性貧血組和正常對照組各項指標比較

缺鐵性貧血組和非缺鐵性貧血組Hb、MCV、MCH、MCHC均低于正常對照組（P<0.05）。缺鐵性貧血組Flt-3L、TF水平均高于正常對照組和非缺鐵性貧血組（P<0.05），SI、25（OH）D水平均低于正常對照組和非缺鐵性貧血組（P<0.05）。見表1。

表1 缺鐵性貧血組、非缺鐵性貧血組和正常對照組各項指標比較

2.2 不同程度貧血患兒各項指標比較

重度貧血組Flt-3L、TF水平高于中度貧血組和輕度貧血組（P<0.05），25（OH）D、Hb、MCV、MCH、MCHC、SI水平均低于中度貧血組和輕度貧血組（P<0.05）。中度貧血組Flt-3L、TF水平高于輕度貧血組（P<0.05），25（OH）D、Hb、MCV、MCH、MCHC、SI水平低于輕度貧血組（P<0.05）。見表2。

表2 不同程度貧血患兒各項指標比較

2.3 缺鐵性貧血的危險因素分析

Logistic回歸分析結果顯示，血清Flt-3L、TF、25（OH）D均是嬰幼兒發生缺鐵性貧血的危險因素[比值比（odds ratio，OR）分別為4.319、4.513、5.094，95%可信區間（confidence interval，CI）分別為1.537～12.133、1.932～10.545、1.414～18.354]。見表3。

表3 缺鐵性貧血的危險因素分析

2.4 Flt-3L、TF、25（OH）D單項與聯合檢測診斷和鑒別診斷缺鐵性貧血的效能

采用Logistic回歸分析建立Flt-3L、TF、25（OH）D的聯合檢測方程：Logit（P）=1.463×Flt-3L+1.507×TF+1.628×25（OH）D +0.186。ROC曲線分析結果顯示，Flt-3L、TF、25（OH）D單項檢測和聯合檢測診斷缺鐵性貧血的曲線下面積（area under curve，AUC）分別為0.860、0.854、0.897、0.983，鑒別診斷缺鐵性貧血和非缺鐵性貧血的AUC分別為0.797、0.821、0.862、0.981。見表4、表5、圖1。

表4 Flt-3L、TF、25（OH）D單項與聯合檢測診斷缺鐵性貧血的效能

表5 Flt-3L、TF、25（OH）D單項與聯合檢測鑒別診斷缺鐵性貧血與非缺鐵性貧血的效能

圖1 Flt-3L、TF、25（OH）D單項與聯合檢測診斷缺鐵性貧血和鑒別診斷缺鐵性貧血與非缺鐵性貧血的ROC曲線

3 討論

目前，隨著物質生活水平的提高，各種營養素缺乏癥已明顯減少，但缺鐵性貧血仍是威脅嬰幼兒健康最常見的營養缺乏性疾病，其起病緩慢且隱匿，嚴重影響嬰幼兒身體健康[12]。嬰兒期鐵元素主要來自于母體及輔食喂養，約4月齡后，嬰兒從母體獲得的鐵逐漸耗盡[13]。由于4月齡的嬰兒生長發育迅速、造血活躍，但嬰兒主食或乳類食品中鐵含量均不高，不能滿足嬰兒生長發育的需求，導致其體內的鐵元素被大量消耗，進而發生缺鐵癥狀[14]。早診斷、早治療可有效緩解嬰幼兒的缺鐵狀態，保障嬰幼兒健康成長。

本研究結果顯示，缺鐵性貧血組MCV、MCH、MCHC、SI、25（OH）D均低于正常對照組（P<0.05），Flt-3L、TF水平均高于正常對照組（P<0.05）。提示缺鐵性貧血患兒體內鐵元素含量不足，直接導致紅細胞中Hb含量減少，從而引發貧血[15]。另外，Flt-3L水平升高可促進T細胞增殖，T細胞會介導骨髓造血細胞的過度凋亡，抑制骨髓造血，增加了嬰幼兒的造血負擔[16]，尤其是Flt-3L能促進樹突狀細胞的增殖和成熟，并增強機體的免疫反應[17]。SI直接反映了機體用于造血的鐵的含量。TF是血漿中主要的含鐵蛋白，負責輸送消化道吸收的鐵和紅細胞降解后釋放出的鐵，在調節機體內環境穩定性方面發揮重要作用[18]。血清中可溶性TF受體水平升高程度與生成紅細胞所需的鐵的缺乏量有關，能夠準確反映紅細胞內鐵水平[19]。維生素D（vitamin D，Vit D）屬于脂溶性維生素，其主要功能包括促進小腸黏膜細胞對鈣和磷的吸收、促進皮膚組織細胞的增殖、對細胞分化的調節和對免疫功能的調節[20]。25（OH）D可以反映體內Vit D水平，Vit D水平不足會降低鈣、磷、鐵的合成與吸收，進而引發相關疾病[21]。有研究結果顯示，慢性疾病引發的炎癥和感染與缺鐵性貧血的發病密切相關，會導致紅細胞破壞增多，使鐵利用發生障礙，幼紅細胞對紅細胞生成素的反應性減弱，機體鐵吸收減少，細胞免疫功能受到抑制，從而引發鐵代謝紊亂[22]。另外，本研究ROC曲線分析結果顯示，Flt-3L、TF、25（OH）D聯合檢測診斷和鑒別診斷缺鐵性貧血的效能均優于3項指標單項檢測。

綜上所述，Flt-3L、TF、25（OH）D對嬰幼兒缺鐵性貧血有較高的輔助診斷價值，其水平高低與貧血的嚴重程度有關。