孕康口服液聯合不同淋巴細胞主動免疫療法治療次數對不明原因習慣性流產患者影響對比

葛莉萍 葛春梅 楊 麗 王俊平

周口婦產醫院婦產科，河南省周口市 466000

習慣性流產(RSA)是一種臨床常見婦產科疾病，是指女性在同一伴侶情況下連續3次胎兒丟失。RSA發病原因極為復雜，近50%的患者發病原因不明確，臨床稱其為不明原因習慣性流產(URSA)[1]。目前尚無治療URSA的明確方案。孕康口服液具有調節機體免疫力、緩解子宮收縮等作用，是一種臨床常用安胎藥物[2]。淋巴細胞主動免疫療法(LIT)是將女性健康配偶或第三方新鮮淋巴細胞注入URSA患者皮內或皮下以達到調節機體免疫功能的新型免疫療法，其在URSA患者治療中發揮了重要作用[3]。但目前關于不同LIT治療次數對URSA患者預后的影響臨床仍缺乏大量循證依據。基于此，本文以我院68例URSA患者為觀察對象，探討孕康口服液聯合不同LIT治療次數對患者預后的影響，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 將2018年1月—2020年1月在我院行孕康口服液聯合LIT治療的68例URSA患者納入本次研究，根據患者LIT治療次數不同將其分為對照組和觀察組。對照組35例，年齡24～33歲，平均年齡(28.25±4.06)歲；流產次數3～5次，平均流產次數(3.98±0.42)次；體質量42～68kg，平均體質量(53.05±5.75)kg；月經周期27～33d，平均月經周期(29.37±3.14)d。觀察組33例，年齡23～34歲，平均年齡(28.31±4.10)歲；流產次數3～5次，平均流產次數(3.88±0.37)次；體質量41～70kg，平均體質量(53.12±5.68)kg；月經周期26～33d，平均月經周期(29.29±3.22)d。兩組基本資料無顯著差異(P>0.05)。本研究已獲得院倫理委員會批準。

1.2 選擇標準 (1)納入標準：①符合《復發性流產診治的專家共識》[4]中的相關診斷標準，流產次數≥3次；②年齡20～35歲；③治療前封閉抗體(BA)檢測陰性，且LIT治療2次后BA檢測仍為陰性；④支原體、衣原體、TORCH病毒檢查陰性；⑤無自身免疫性疾病；⑥配偶精液常規檢查正常；⑦簽署知情同意書。(2)排除標準：①其他明確原因導致的流產；②染色體異常；③夫妻任一人伴有傳染性、感染性疾病；④RH陰性；⑤凝血功能、內分泌功能異常；⑥伴有生殖系統異常；⑦惡性腫瘤；⑧精神障礙。

1.3 方法 兩組均接受孕康口服液聯合LIT治療。LIT治療：抽取配偶靜脈血30ml，離心獲取淋巴細胞后使用生理鹽水稀釋成濃度為(20～50)×106/ml的懸液1ml，于孕婦前臂外側行皮內注射，注射后觀察局部反應，若出現紅腫、水泡給予針對性處理。每3周治療1次，治療2次后復查BA。接受2次LIT治療后BA仍為陰性且拒絕繼續LIT治療，并備孕者為對照組，其余繼續治療的為觀察組，觀察組再接受LIT治療2次，無論BA是否轉陽均備孕。受孕后給予兩組孕康口服液(江西九華藥業有限公司，國藥準字Z10920062)保胎，20ml/次，3次/d，早、中、晚空腹口服，共用藥2周。

1.4 觀察指標 (1)妊娠成功率：記錄兩組未妊娠、流產、早產和足月產情況，統計兩組妊娠成功率(足月產和早產胎兒存活)。(2)免疫功能：取兩組患者治療前后空腹靜脈血，使用免疫熒光法檢測 CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平。(3)細胞因子：取兩組治療前后空腹靜脈血，使用酶聯免疫法檢查轉化生長因子-β1(TGF-β1)、孕激素誘導阻斷因子(PIBF)水平。(4)統計兩組不良反應發生率。

2 結果

2.1 兩組妊娠成功率比較 觀察組妊娠成功率為84.85%，顯著高于對照組的51.43%(χ2=8.668，P=0.003<0.05)，見表1。

表1 兩組妊娠成功率比較[n(%)]

2.2 兩組治療前后免疫功能比較 治療后，兩組CD4+、CD4+/CD8+水平均較治療前上升，而CD8+水平較治療前下降，且觀察組優于對照組(P<0.05)，見表2。

表2 兩組治療前后免疫功能比較

2.3 兩組治療前后細胞因子水平比較 治療后，兩組TGF-β1、PIBF水平均較治療前上升，且觀察組高于對照組(P<0.05)，見表3。

表3 兩組治療前后細胞因子水平比較

2.4 兩組不良反應發生情況比較 對照組1例患者出現注射部位紅腫，發生率為2.86%(1/35)；觀察組2例患者出現注射部位紅腫，發生率為6.06%(2/33)；兩組不良反應發生率無統計學差異(χ2=0.413，P=0.520>0.05)。

3 討論

隨著外界環境、生活飲食習慣以及生育規律的改變，近年來我國女性URSA發病率在不斷提高，URSA不僅會給女性和家庭帶來極大的心理壓力，且流產反復發作還會損傷子宮內膜、破壞宮腔環境，從而進一步增大胚胎著床難度，最終導致女性不孕發生。既往臨床治療URSA主要以孕后保胎治療為主。孕康口服液是一種保胎中成藥物，常用于腎虛型及氣血虛弱證型的先兆流產及RSA患者，其具有健脾固本、養血安胎之功效，含有黃芪、山藥、續斷、當歸等藥物是傳統中醫安胎的常用藥物，而現代藥理學研究顯示孕康口服液可降低子宮收縮能力，還可調節性腺軸內分泌，改善子宮內環境，進而促進胚胎著床和胎兒發育[5]。

目前，臨床對于URSA的研究和認識不斷加深，越來越多臨床證據顯示免疫失調與URSA的發生存在密切聯系，懷孕后，孕婦免疫系統會對胚胎內存在的抗原進行識別，并通過BA分泌起到抑制淋巴細胞作用，進而避免孕婦免疫系統攻擊胎兒，而URSA患者多存在不同程度的BA缺乏和T淋巴細胞比例失衡，紊亂的免疫功能會對胚胎進行攻擊，最終導致反復流產發生[6]。LIT治療現已成為臨床治療URSA的重要手段，其通過將配偶或健康志愿者的淋巴細胞注入女性體內以激活其免疫系統，“預演”胚胎半異體移植過程，增加BA陽性率，建立母—胎免疫平衡，從而避免妊娠后孕婦免疫系統異常攻擊胚胎，保證妊娠持續進行[7]。梁仲珍等[8]的一項Meta研究亦證實LIT治療可有效提高URSA患者BA陽性率、妊娠率及活產率，但目前尚不完全明確LIT治療次數對URSA患者的影響。

在既往研究中，BA轉陽是臨床中止LIT治療、患者進行備孕的常用標準，但亦有研究顯示BA是否轉陽與URSA患者妊娠情況并無顯著相關性，且LIT治療次數較多會進一步加重患者免疫功能紊亂情況，從而影響受孕和妊娠[9]。本文以接受2次LIT治療后BA仍未轉陽患者為觀察對象，探討是否繼續接受LIT治療對URSA患者的影響。結果顯示繼續接受LIT治療的觀察組妊娠成功率及CD4+、CD4+/CD8+水平較對照組高，而CD8+水平較對照組低(P<0.05)，這表明在一定次數范圍內，增加LIT治療可進一步改善URSA患者免疫功能，對改善妊娠結局有積極作用。分析原因：這可能是因為在一定時間內多次免疫刺激才可有效調節患者T淋巴細胞平衡，并產生足夠的BA，最終達到改善妊娠結局的目的。本文結果顯示增加LIT治療次數還可調節機體TGF-β1、PIBF合成及分泌，TGF-β1是一種免疫抑制因子，其可通過抑制淋巴細胞增殖減輕免疫排斥反應，從而發揮抗流產作用；而PIBF是一種孕激素調節劑，其不僅能反映女性孕酮水平，還可調節母體免疫微環境，保證胎兒免疫系統形成和妊娠持續[10]。而觀察組治療后TGF-β1、PIBF水平上升，則表明增加LIT治療次數能有效改善URSA患者母胎免疫環境，從而提高臨床治療效果。本文中兩組患者不良反應均以注射部位紅腫為主，紅腫未經治療自行緩解，且兩組不良反應發生率無顯著差異，表明增加治療次數并不會增大治療風險。

綜上所述，增加LIT治療次數聯合口服孕康口服液可有效調節URSA患者免疫功能和TGF-β1、PIBF表達，能有效改善患者妊娠結局，可資臨床借鑒。