FAM3C介導(dǎo)TGF-β1誘導(dǎo)的人血管平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)換、活力增強(qiáng)及遷移*

訾亞飛，王正力，訾亞婉，李雅馨，劉楊東，趙 渝△

（1重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院血管外科，重慶 400016；2重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院呼吸及重癥醫(yī)學(xué)科，重慶 400016；3深圳大學(xué)附屬華南醫(yī)院血管外科，廣東深圳 518100）

內(nèi)膜增生（intimal hyperplasia）是一種特別的血管重塑狀態(tài)，發(fā)生于動(dòng)靜脈內(nèi)瘺、動(dòng)脈粥樣硬化及血管再狹窄病變［1-2］。而引起內(nèi)膜增生的主要原因是由于血管平滑肌細(xì)胞（vascular smooth muscle cells，VSMCs）在多種信號分子［如轉(zhuǎn)化生長因子β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）］刺激下，由收縮表型［標(biāo)志物為α-平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）］轉(zhuǎn)化為合成表型［標(biāo)志物為骨橋蛋白（osteopontin，OPN）及波形蛋白（vimentin）等］，且自身發(fā)生肥大及活力增強(qiáng)，并由中膜遷移至內(nèi)膜引起血管內(nèi)膜增生［1-3］。雖然目前對VSMCs表型轉(zhuǎn)換有較多研究，但其有效治療靶點(diǎn)仍不清楚。

序列相似家族3成員C（family with sequence similarity 3 member C，F(xiàn)AM3C）又稱白細(xì)胞介素樣上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）誘導(dǎo)因子（interleukin-like EMT inducer，ILEI）［4］，是FAM3家族的成員，也是重要的細(xì)胞因子樣蛋白。研究表明，F(xiàn)AM3C在組織中普遍表達(dá)［5］，由細(xì)胞內(nèi)分泌至細(xì)胞外，并且在多種癌細(xì)胞中高表達(dá)，促進(jìn)癌癥進(jìn)展和轉(zhuǎn)移，而循環(huán)中的FAM3C是自噬和癌癥的生物標(biāo)志物［6-8］。另外，F(xiàn)AM3C作為TGF-β1的靶基因，其蛋白參與TGF-β1在腎小管上皮細(xì)胞及癌癥中誘導(dǎo)的EMT，其下調(diào)可抑制TGF-β1誘導(dǎo)的改變［9-10］。還有研究提示，F(xiàn)AM3C通過降低糖異生和脂肪相關(guān)基因的mRNA和蛋白水平而抑制糖異生，從而減輕肥胖小鼠的胰島素抵抗、高血糖及脂肪變性［11］。不僅如此，F(xiàn)AM3C還參與成骨細(xì)胞的分化［12］。然而，F(xiàn)AM3C是否參與TGF-β1誘導(dǎo)的VSMCs表型轉(zhuǎn)換尚未見報(bào)道。

蛋白激酶B（protein kinase B，PKB/Akt）是一種絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，可被許多生長因子和細(xì)胞因子以磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K）依賴的方式激活［13］。Akt是一種重要的細(xì)胞內(nèi)分子，其激活對細(xì)胞存活和凋亡有重要影響，并在心血管疾病中調(diào)節(jié)多種細(xì)胞功能［14］。有研究報(bào)道Akt活化在TGF-β1促進(jìn)VSMCs表型轉(zhuǎn)換及增殖的過程中起著重要作用［15-16］，而抑制Akt的激活可減輕血管重構(gòu)［17］。

本研究旨在探討FAM3C在TGF-β1誘導(dǎo)VSMCs表型轉(zhuǎn)換、活力增強(qiáng)及遷移中的作用及其潛在機(jī)制，以期獲得干預(yù)內(nèi)膜增生的相關(guān)靶點(diǎn)。

材料和方法

1 材料與試劑

原代人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞（HTX3138）購自深圳豪地華拓生物科技有限公司；DMEM/F12培養(yǎng)液購自Gibco；胎牛血清購自Biosharp；青霉素和鏈霉素（C0222）購自碧云天；TGF-β1（100-21-2）購自杭州聯(lián)科生物技術(shù)股份有限公司；CCK-8（AR1160）購自武漢博士德生物工程有限公司；Akt inhibitor VIII（Akti-VIII；T3346）購自TargetMol；FAM3C小干擾RNA（si-FAM3C）和陰性對照小干擾RNA（si-NC）均由廣州銳博生物技術(shù)有限公司合成；jetPRIME transfection reagent（101000046）購自Polyplus；FAM3C過表達(dá)慢病毒（LV-FAM3C）及空載病毒（LV-GFP）由賽業(yè)（蘇州）生物科技有限公司合成；Transwell小室購自Corning；增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光（enhanced chemiluminescence，ECL）顯影試劑盒（4AW011-500）購自北京四正柏生物科技有限公司；OPN兔抗（22952-1-AP）和辣根過氧化物酶標(biāo)記的山羊抗鼠IgG（SA00001-1）購自Proteintech；vimentin鼠抗（BF8006）、FAM3C兔抗（DF12605）、α-SMA兔抗（AF1032）、Akt兔抗（AF0836）、磷酸化Akt（phosphorylated Akt，p-Akt）兔抗（AF0016）及β-actin兔抗（AF7018）購自Affinity；增殖細(xì)胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）抗體（D3H8P）購自Cell Signaling Technology；辣根過氧化物酶標(biāo)記的山羊抗兔IgG（A21020）、熒光標(biāo)記的山羊抗兔IgG（A23420）及熒光標(biāo)記的山羊抗鼠IgG（A23210）購自Abbkine。

2 主要方法

2.1 細(xì)胞培養(yǎng)及處理原代人VSMCs用DMEM/F12培養(yǎng)液加10%胎牛血清和1%青霉素-鏈霉素在37℃及5%CO2環(huán)境下培養(yǎng)。首先用不同濃度（0、1、2、5及10 μg/L）的TGF-β1作用24 h和10 μg/L的TGF-β1作用不同時(shí)間（0、6、12、24及48 h），以確定最佳作用濃度和時(shí)間，并以10 μg/L的TGF-β1作用不同時(shí)間（0、6、12及24 h）來誘導(dǎo)VSMCs表型轉(zhuǎn)換。在驗(yàn)證敲減FAM3C效率的實(shí)驗(yàn)中，將細(xì)胞分為control（CTL）組、si-NC組和si-FAM3C組，之后再分為si-NC組、si-NC+TGF-β1組、si-FAM3C組和si-FAM3C+TGF-β1組；在熒光顯微鏡下驗(yàn)證過表達(dá)慢病毒是否轉(zhuǎn)染成功的實(shí)驗(yàn)中，將細(xì)胞分為空白（blank）組、LVGFP組和LV-FAM3C組，之后再分為LV-GFP組、LVGFP+TGF-β1組、LV-FAM3C組和LV-FAM3C+TGF-β1組；在Akt抑制劑處理的實(shí)驗(yàn)中，將細(xì)胞分為LV-GFP組、LV-GFP+TGF-β1組、LV-FAM3C組、LV-FAM3C+TGF-β1組、LV-FAM3C+Akti-VIII組 和LV-FAM3C+TGF-β1+Akti-VIII組，Akti-VIII（5 μmol/L）提前2 h加入處理組。各組處理前均饑餓細(xì)胞24 h。

2.2 細(xì)胞活力的測定以每孔1×104細(xì)胞在96孔板種板孵育。細(xì)胞貼壁后根據(jù)分組進(jìn)行處理，同時(shí)設(shè)置空白對照組及5個(gè)復(fù)孔。次日按照CCK-8試劑盒說明書，在各孔加入10 μL CCK-8溶液，37℃避光孵育2 h，酶標(biāo)儀在450 nm處測量各孔吸光度。

2.3 細(xì)胞轉(zhuǎn)染細(xì)胞傳代至6孔板中，融合70%～80%時(shí)，按照轉(zhuǎn)染說明書將2 μL si-FAM3C（20 μmol/L）或2 μL si-NC（20 μmol/L）與2 μL jetPRIME transfection reagent加 入 到200 μL jetPRIME buffer中，充分混合15 min后，加入到各孔中，加入2 mL有血清培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，轉(zhuǎn)染48 h后，Western blot檢測轉(zhuǎn)染效率，收集細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。si-FAM3C的序列 為5′-CTACAAAGCCTCCCAGATA-3′，si-NC的 序列為5′-GGCUCUAGAAAAGCCUAUGC-3′。

2.4 慢病毒轉(zhuǎn)染將狀態(tài)良好的對數(shù)期VSMCs種于6孔板中，次日將LV-GFP組和LV-FAM3C組細(xì)胞根據(jù)賽業(yè)公司提供的說明書按感染復(fù)數(shù)（multiplicity of infection，MOI）=50進(jìn)行慢病毒感染實(shí)驗(yàn)。轉(zhuǎn)染10 h后，更換新鮮培養(yǎng)液，培養(yǎng)48 h后在熒光顯微鏡下拍照驗(yàn)證，收集細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

2.5 Transwell實(shí)驗(yàn)將3×105細(xì)胞用無血清培養(yǎng)液懸浮，取200 μL加入到上室，700 μL含20%胎牛血清的培養(yǎng)液加入下室，并在37℃培養(yǎng)箱中孵育24 h，次日用甲醛固定15 min，結(jié)晶紫染色，棉簽擦拭上室殘留細(xì)胞，顯微鏡下拍照并計(jì)數(shù)。

2.6 免疫熒光染色將細(xì)胞種于24孔板中蓋玻片上。經(jīng)處理后，4%多聚甲醛固定細(xì)胞15 min，PBS洗滌3次，0.3%Triton X-100破膜10 min，正常山羊血清封閉1 h，加入vimentin和α-SMA抗體（1∶150稀釋），4℃過夜孵育。次日用熒光標(biāo)記的山羊抗兔及抗鼠IgG（1∶200稀釋）孵育1 h，經(jīng)4′，6-二脒基-2-苯基吲哚（4′，6-diamidino-2-phenylindole，DAPI）染核后，抗熒光淬滅劑封片，避光條件下熒光顯微鏡獲取圖像。

2.7 Western blot實(shí)驗(yàn)細(xì)胞處理后，用含磷酸酶及蛋白酶抑制劑的RIPA裂解液在冰上提取蛋白，BCA蛋白檢測試劑測定蛋白濃度。加入上樣緩沖液并加熱變性，SDS-PAGE分離蛋白，轉(zhuǎn)移到聚二氟乙烯膜。5%脫脂奶粉室溫下封閉2 h，OPN、vimentin、β-actin、PCNA、α-SMA、FAM3C、Akt及p-Akt抗體（1∶1 000稀釋）4℃孵育過夜。次日用TBST洗滌3次，辣根過氧化物酶標(biāo)記的山羊抗兔IgG（1∶10 000稀釋）和山羊抗鼠IgG（1∶5 000稀釋）室溫孵育2 h，TBST洗滌3次。ECL發(fā)光液顯影，ImageJ軟件分析圖像。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

所有統(tǒng)計(jì)分析及制圖均使用GraphPad Prism 8進(jìn)行。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（mean±SD）表示。采用單因素方差分析檢驗(yàn)多組間差異，后用Turkey法進(jìn)行兩兩比較。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 TGF-β1對VSMCs中FAM3C表達(dá)的影響

TGF-β1在作用24 h時(shí)隨著濃度（0、1、2、5和10 μg/L）增加上調(diào)VSMCs中FAM3C的表達(dá)，TGF-β1（10 μg/L）隨作用時(shí)間（0、6、12、24及48 h）增加上調(diào)FAM3C表達(dá)，以10 μg/L及24 h時(shí)最為顯著（P＜0.05），故作為后續(xù)實(shí)驗(yàn)條件，見圖1。此結(jié)果亦提示FAM3C是TGF-β1的靶基因。

2 TGF-β1誘導(dǎo)VSMCs表型轉(zhuǎn)換

10 μg/L TGF-β1呈時(shí)間依賴性（0、6、12和24 h）上調(diào)OPN及vimentin表達(dá)，下調(diào)α-SMA表達(dá)，0、6、12及24 h組間均有顯著差異（P＜0.05），vimentin免疫熒光與Western blot結(jié)果趨勢類似，見圖2。

3 敲減FAM3C抑制TGF-β1誘導(dǎo)的VSMCs表型轉(zhuǎn)換、活力增強(qiáng)及遷移

Figure 1.Effects of TGF-β1 on the expression of FAM3C in VSMCs.Primary human VSMCs were treated with 0，1，2，5 and 10 μg/L of TGF-β1 for 24 h（A）or 10 μg/L TGF-β1 for 0，6，12，24 and 48 h（B）.Mean±SD.n=3.*P＜0.05 vs 0 μg/L or 0 h；#P＜0.05 vs 2 μg/L；&P＜0.05 vs 5 μg/L；△P＜0.05 vs 12 h.圖1 TGF-β1對VSMCs中FAM3C表達(dá)的影響

Figure 2.TGF-β1 induced phenotypic switch of VSMCs.A：the protein expression of OPN，vimentin and α-SMA detected by Western blot；B：immunofluorescence staining for vimentin（scale bar=50 μm）.Mean±SD.n=3.*P＜0.05 vs 0 h；#P＜0.05 vs 6 h；&P＜0.05 vs 12 h.圖2 TGF-β1誘導(dǎo)VSMCs表型轉(zhuǎn)換

與si-NC和CTL組相比，si-FAM3C組中FAM3C表達(dá)降低（P＜0.05），提示已敲減FAM3C（圖3A）。與si-NC組相比，si-NC+TGF-β1組細(xì)胞活力增強(qiáng)（P＜0.05），OPN、vimentin和PCNA表達(dá)增加（P＜0.05），α-SMA表達(dá)降低（P＜0.05），細(xì)胞遷移數(shù)量增加（P＜0.05）；與si-NC+TGF-β1組相比，si-FAM3C+TGF-β1組中TGF-β1對VSMCs的上述作用被削弱；此外，與si-NC組相比，si-FAM3C組細(xì)胞活力減弱（P＜0.05），OPN、vimentin和PCNA表達(dá)減少（P＜0.05），α-SMA表達(dá)增加（P＜0.05），細(xì)胞遷移數(shù)量減少（P＜0.05），見圖3B～D。上述結(jié)果提示敲減FAM3C抑制VSMCs表型轉(zhuǎn)換、活力及遷移。

4 過表達(dá)FAM3C促進(jìn)TGF-β1誘導(dǎo)的VSMCs表型轉(zhuǎn)換、活力增強(qiáng)及遷移

與blank組 相比，LV-GFP和LV-FAM3C組熒 光強(qiáng)度增加，提示慢病毒轉(zhuǎn)染成功（圖4A）。與LVGFP組相比，LV-FAM3C組細(xì)胞活力增強(qiáng)（P＜0.05），OPN、vimentin和PCNA表達(dá)增加（P＜0.05），α-SMA表達(dá)減少（P＜0.05），細(xì)胞遷移數(shù)量增多（P＜0.05），vimentin和α-SMA免疫熒光結(jié)果與Western blot結(jié)果趨勢類似；與LV-GFP+TGF-β1組相比，LV-FAM3C+TGF-β1組趨勢與LV-FAM3C組類似，提示過表達(dá)FAM3C增強(qiáng)TGF-β1對VSMCs表型轉(zhuǎn)換、活力及遷移的作用，見圖4B～D及圖5。

5 FAM3C通過Akt介導(dǎo)TGF-β1誘導(dǎo)的VSMCs改變

與si-NC組和LV-GFP組相比，TGF-β1提高p-Akt蛋白水平（P＜0.05）；敲減FAM3C可降低p-Akt蛋白水平及減弱TGF-β1的誘導(dǎo)作用（P＜0.05）；過表達(dá)FAM3C對p-Akt蛋白水平的作用與敲減FAM3C相反；而加入Akti-VIII后，p-Akt蛋白水平降低（P＜0.05），OPN和vimentin表達(dá)減少（P＜0.05），α-SMA表達(dá)增加（P＜0.05），見圖6。

討 論

正常VSMCs以收縮表型存在，有利于對抗血管張力，維持血管壁穩(wěn)態(tài)。然而，在多種病理狀態(tài)下，VSMCs的合成表型轉(zhuǎn)化增加，導(dǎo)致增殖、遷移和細(xì)胞外基質(zhì)合成，從而引起內(nèi)膜增生，是引起動(dòng)脈粥樣硬化、血管再狹窄和高血壓的重要原因之一［14，18-19］，許多細(xì)胞因子參與VSMCs表型轉(zhuǎn)換的調(diào)節(jié)，其中TGFβ1通過激活其下游Smad2/3和PI3K/Akt等通路來發(fā)揮作用［2，16］。此外，TGF-β1還可通過促進(jìn)縫隙連接蛋白（connexin）43表達(dá)而導(dǎo)致VSMCs的增殖活力增加［20］。在本研究中，TGF-β1呈時(shí)間依賴性調(diào)節(jié)VSMCs表型轉(zhuǎn)換，并可增強(qiáng)細(xì)胞活力及遷移能力，與既往研究結(jié)果一致［2］，因此對TGF-β1下游靶基因的調(diào)節(jié)是干預(yù)內(nèi)膜增生的關(guān)鍵。

FAM3C作為FAM3家族重要成員之一，較多研究涉及細(xì)胞EMT及遷移。FAM3C通過Akt及細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶通路參與TGF-β1誘導(dǎo)的腎小管上皮EMT，促進(jìn)腎纖維化［10］，還可通過PI3K/Akt途徑參與胃癌的EMT及細(xì)胞遷移過程［8］，但是否參與血管內(nèi)膜增生還未見報(bào)道。本研究結(jié)果表明，在VSMCs中，TGF-β1可使FAM3C蛋白表達(dá)增加，驗(yàn)證了FAM3C是TGF-β1的靶基因。為進(jìn)一步研究FAM3C在VSMCs表型轉(zhuǎn)換中的作用，我們分別對FAM3C行敲減及過表達(dá)處理。敲減FAM3C可提高收縮表型標(biāo)志物α-SMA表達(dá)，降低TGF-β1誘導(dǎo)的合成表型標(biāo)志物OPN和vimentin表達(dá)，同時(shí)降低VSMCs活力及遷移能力，而過表達(dá)FAM3C可促進(jìn)TGF-β1對VSMCs表型轉(zhuǎn)換、活力及遷移的調(diào)節(jié)，因此我們證實(shí)FAM3C介導(dǎo)TGFβ1誘導(dǎo)的VSMCs表型轉(zhuǎn)換、活力增強(qiáng)及遷移。FAM3C的作用可能與其形態(tài)變化有關(guān)，研究表明二聚體FAM3C較單聚體可使癌細(xì)胞侵襲增加［21］，但在VSMCs中是否發(fā)生形態(tài)改變還需進(jìn)一步研究。此外，有研究指出FAM3C上調(diào)陰陽1（yin yang 1，YY1）表達(dá)，最終激活A(yù)kt-cyclin D1通路促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞增殖和遷移［7］；而在頸動(dòng)脈血管損傷后上調(diào)YY1，可抑制VSMCs收縮型標(biāo)志物的表達(dá)，從而導(dǎo)致內(nèi)膜增生［22］。在本實(shí)驗(yàn)中，過表達(dá)及敲減FAM3C均可獨(dú)立于TGFβ1調(diào)節(jié)VSMCs表型轉(zhuǎn)換、活力及遷移，因此FAM3C可能通過調(diào)節(jié)YY1或Akt參與對VSMCs的調(diào)節(jié)。

Akt作為重要的細(xì)胞內(nèi)因子，參與調(diào)控細(xì)胞增殖、分化及凋亡等細(xì)胞功能。研究表明Akt通過抑制VSMCs凋亡而導(dǎo)致內(nèi)膜增厚［16，23］，此外，Akt通過激活哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）而介導(dǎo)攝食抑制因子（nesfatin-1）誘導(dǎo)的VSMCs表型轉(zhuǎn)換、周期轉(zhuǎn)換及增殖［24］。另有研究表明，芙蓉葉通過抑制Akt/激活蛋白1（activator protein-1，AP-1）通路，抑制腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）誘導(dǎo)的VSMCs遷移［25］。因此，Akt在內(nèi)膜增生發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用。在本研究中，TGF-β1使Akt活化，且Akt活化在FAM3C敲減后被阻斷，提示Akt是FAM3C的下游蛋白。有研究提示，過表達(dá)FAM3C可激活熱休克因子1（heat shock factor 1，HSF1）-鈣調(diào)素（calmodulin，CaM）-Akt通路，并增加Akt磷酸化，從而抑制糖異生［26］，另外，血管緊張素II（angiotensin II，Ang II）通過增加Ca2+的攝入而誘導(dǎo)早期生長反應(yīng)因子1（early growth response protein-1，Egr-1）表達(dá)，而導(dǎo)致內(nèi)膜增生，敲減CaM抑制Ang II對VSMCs表型的改變［27］。更重要的是，作為CaM的下游激酶，鈣/CaM依賴性蛋白激酶II（Ca2+/CaM-dependent protein kinase II，CaMKII）通過調(diào)控線粒體對Ca2+的攝取及VSMCs遷移，導(dǎo)致血管損傷后的新生內(nèi)膜形成［28］。在本研究中，過表達(dá)FAM3C激活A(yù)kt，促進(jìn)TGF-β1對Akt的活化，其機(jī)制可能與CaM的表達(dá)有關(guān)，而Akt抑制劑作用后阻斷了FAM3C對VSMCs表型轉(zhuǎn)換的作用，因此FAM3C可能通過調(diào)節(jié)Akt參與TGF-β1誘導(dǎo)的VSMCs表型轉(zhuǎn)換。這也可解釋敲減及過表達(dá)FAM3C獨(dú)立調(diào)節(jié)VSMCs表型轉(zhuǎn)換的作用與Akt的激活有關(guān)，所以抑制Akt對VSMCs表型轉(zhuǎn)換調(diào)節(jié)起到重要作用。

Figure 3.Knockdown of FAM3C inhibited TGF-β1-induced phenotypic switch and attenuated viability and migration of VSMCs.A：verification of FAM3C knockdown by Western blot；B：the cell viability detected by CCK-8 assay；C：the expression of phenotypic markers，PCNA and FAM3C detected by Western blot；D：the cell migration detected by Transwell assay（×200）.Mean±SD.n=3.*P＜0.05 vs CTL or si-NC group；#P＜0.05 vs si-NC+TGF-β1 group.圖3敲減FAM3C抑制TGF-β1誘導(dǎo)的VSMCs表型轉(zhuǎn)換并減弱細(xì)胞活力和遷移能力

Figure 4.Overexpression of FAM3C promoted TGF-β1-induced phenotypic switch and enhanced viability of VSMCs.A：verification of lentivirus（LV）infection（scale bar=100 μm）；B：the cell viability detected by CCK-8 assay；C：the expression of phenotypic markers，PCNA and FAM3C detected by Western blot；D：immunofluorescence staining for α-SMA and vimentin（scale bar=50 μm）.Mean±SD.n=3.*P＜0.05 vs LV-GFP group；#P＜0.05 vs LV-GFP+TGF-β1 group.圖4過表達(dá)FAM3C促進(jìn)TGF-β1誘導(dǎo)的VSMCs表型轉(zhuǎn)換并增強(qiáng)細(xì)胞活力

Figure 5.Overexpression of FAM3C promoted TGF-β1-induced migation of VSMCs.The cell migration was detected by Transwell assay（×200）.Mean±SD.n=3.*P＜0.05 vs LV-GFP group；#P＜0.05 vs LV-GFP+TGF-β1 group.圖5過表達(dá)FAM3C促進(jìn)TGF-β1誘導(dǎo)的VSMCs遷移

Figure 6.FAM3C mediated TGF-β1-induced phenotypic changes in VSMCs through Akt.A：effects of TGF-β1 and/or FAM3C knockdown on Akt phosphorylation；B：effects of TGF-β1 and/or FAM3C overexpression combined with Akt inhibitor VIII（Akti-VIII）on Akt phosphorylation and phenotypic marker expression.Mean±SD.n=3.*P＜0.05 vs LV-GFP group；#P＜0.05 vs LV-GFP+TGF-β1 group；&P＜0.05 vs LV-FAM3C group；△P＜0.05 vs LV-FAM3C+TGF-β1 group.圖6 FAM3C通過Akt介導(dǎo)TGF-β1誘導(dǎo)的VSMCs表型改變

總之，本研究發(fā)現(xiàn)FAM3C通過激活A(yù)kt參與并介導(dǎo)TGF-β1誘導(dǎo)的VSMCs表型轉(zhuǎn)換、活力增強(qiáng)及遷移，因此FAM3C可能是干預(yù)內(nèi)膜增生的潛在靶點(diǎn)。