蘇州地區827例身材矮小兒童細胞遺傳學分析

楊 斌，洪禮儀，陳元元

（蘇州大學附屬兒童醫院檢驗科，江蘇 蘇州 215000）

身材矮小是指在相似生活環境下，同種族、同性別、同年齡的個體身高低于正常人群平均身高2個標準差者，或者低于正常兒童生長曲線第3百分位者，其與遺傳因素、代謝性疾病、營養因素及精神心理因素等密切相關[1]。遺傳因素是除特發性矮小癥和生長激素缺乏癥外的第三大病因，其中染色體異常是遺傳因素的重要組成部分。染色體異?？蓪е律L發育遲緩、智力低下、先天性畸形及生育異常等遺傳效應，身材矮小是部分染色體異常的重要表現之一，如特納綜合征、唐氏綜合征等[2]。在身材矮小兒童中，染色體核型異常是導致兒童身材矮小的重要原因之一[3]。因此本研究回顧性分析827例身材矮小患兒的細胞遺傳學臨床資料，旨在探討外周血染色體核型異常與身材矮小的關系，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料回顧性分析蘇州大學附屬兒童醫院2015年1月至2020年12月期間收治的827例身材矮小患兒的臨床資料。其中男患兒234例，女患兒593例；年齡1～15歲，平均（8.10±2.71）歲。納入標準：符合《矮身材兒童診治指南》[4]中的診斷標準，并進行外周血染色體核型分析者；身體健全者；屬于江蘇省蘇州地區常住人口者；尚未注射生長激素治療者等。排除標準：神經發育遲緩者；存在有明顯的組織器官畸形者；臨床資料不全者等。本研究經院內醫學倫理委員會批準。

1.2 研究方法無菌采集患兒外周靜脈血2～5 mL，取0.5 mL接種滴于淋巴細胞培養基（杭州杰毅麥特醫療器械有限公司）中，在37 ℃和5.0%二氧化碳培養箱[賽默飛世爾科技（阿什威爾）有限公司Thermo Fisher Scientific （Asheville） LLC，型號：3111]中培養68～72 h，加入秋水仙素繼續培養2 h后收獲細胞，經過低滲、預固定、固定等程序制備成細胞懸液，然后滴加于預冷的玻片上，常規制片染色后進行G顯帶核型分析，必要時進行C顯帶輔助分析；使用自動掃描顯微鏡和圖像分析系統（Leica Biosystems Richmond, Inc.，型號：GSL-120）進行掃片，每例患者掃描100個中期分裂相細胞，人工計數20個核型，選擇5個分散良好、長短適中的分裂相進行核型分析，若出現嵌合體則計數至50個核型（必要時100個）。統計分析所有納入研究患兒的染色體結果，染色體核型按照人類細胞遺傳學的國際命名體制（ISCN）[5]進行 描述。

1.3 觀察指標①統計827例身材矮小患兒染色體異常核型檢出情況。②對染色體異常核型中的性染色體異常核型分布情況進行分析。③對染色體異常核型中的常染色體異常核型分布情況進行分析。

2 結果

2.1 827例身材矮小患兒染色體異常核型檢出情況在827例身材矮小患兒中，共檢出染色體異常核型57例，檢出率為6.89%（57/827）；在異常核型中，性染色體異常者占比80.70%（46/57），常染色體核型異常者占比19.30%（11/57）；男性5例，占比8.77%（5/57），女性52例，占比91.23%（52/57），見表1。

表1 827例身材矮小患兒染色體異常核型檢出情況

2.2 827例身材矮小患兒性染色體異常核型分布情況性染色體異常核型中，男患兒異常核型4例，占比8.70%（4/46）；女患兒異常核型42例，占比91.30%（42/46），其中主要異常核型為X染色體數量異常和數量伴結構異常，占比52.17%（24/46）；標記染色體占比10.87%（5/46），其中男患兒1例，占比2.17%，女患兒4例，占比8.69%，見表2。

表2 827例身材矮小患兒性染色體異常核型分布情況

2.3 827例身材矮小患兒常染色體異常核型分布情況常染色體異常核型分析可見，男患兒異常核型1例，占比9.09%（1/11），女患兒異常核型10例，占比90.91%（10/11），其中主要異常核型為易位，占比45.45%（5/11），見表3。

表3 827例身材矮小患兒常染色體異常核型分布情況

3 討論

根據身材矮小發病與內分泌系統的關系，可將其分為內分泌異常所致的身材矮小和非內分泌異常所致的身材矮小，內分泌異常所致的身材矮小包括Laron型侏儒、甲狀腺功能減低癥及生長激素缺乏癥等，非內分泌異常所致的身材矮小包括骨病、遺傳性矮小、中樞神經系統疾病、宮內生長遲緩及染色體異常等。

本研究中發現，在827例身材矮小患兒中染色體異常核型57例，檢出率為6.89%，在異常核型中，社會性別為女性的患兒占比91.23%（52/57），身材矮小患兒多為性染色體核型異常，且以女患兒居多。相關研究發現，染色體異常與兒童的生長發育密切相關，可直接導致兒童的發育遲緩和身材矮小 ；而特納綜合征是主要造成身材矮小的染色體疾病，也被稱為先天性卵巢發育不全綜合征，多發于女性，是由于性染色體數量或結構異常導致的卵巢發育不全[6-7]。

何軼群等[8]對605例身材矮小癥患兒的染色體核型分析發現，在染色體異常核型中有88.24%（60/68）為性染色體數目與結構異常。本研究中，在57例染色體核型異常者中，性染色體異常者占比80.70%（46/57），其中以X染色體數量和數量伴結構異常為主，占比52.17%（24/46）。X染色體短臂上的Xp22.3區域的矮小同源盒（SHOX）基因能夠調控骨骼的發育，主要在四肢管狀骨中的軟骨組織發揮作用，缺失SHOX基因可導致SHOX蛋白合成不足，使軟骨細胞增殖分化紊亂，影響骨發育，出現骨齡延遲，最終導致身高受到影響，是特納綜合征患者身材矮小的重要原因[9-10]。對于身材矮小女患兒，X染色體結構或數量的異常通常會導致特納綜合征，特納綜合征以X染色體的缺失和結構異常為細胞遺傳學特征，臨床表現為卵巢發育不全、身材矮小、肘外翻等[11]。依據《特納綜合征診治專家共識》[12]，本研究中，性染色體異常的42例女患兒中，排除1例X染色體長臂部分缺失的女患兒，其余41例女患兒均符合特納綜合征的核型診斷。研究發現，特納綜合征染色體核型眾多，主要包括單體型（45, X）與嵌合體型（正常核型與單體型嵌合，單體型與X染色體結構異常核型的嵌合，正常核型與X染色體結構異常核型的嵌合等），同時其臨床體征也因染色體核型的不同而不同，如單體型患者普遍存在身材矮小、原發性閉經、肘外翻及面容異常等；而嵌合型患者由于存在正常細胞，會根據嵌合比例呈現不同嚴重程度的臨床癥狀，且嚴重程度較單體型者輕[13-14]。盡管特納綜合征患兒染色體核型與患兒的臨床表現有一定的聯系，但無法依據其核型準確預測出其臨床表現，為此，在兒童期應對所有可疑為特納綜合征的患兒盡早進行染色體核型分析，以便在生命早期予以相應的治療和管理。

本研究中發現5例患兒帶有標記染色體，標記染色體是一種罕見的染色體異常，可出現于正常染色體核型或者染色體數目和結構異常核型中。因sSMC可來源于不同的染色體，所以個體表型也差異較大，可以表現為嚴重的多結構畸形、智力障礙以及嚴重生殖障礙等[15]。為此，此類患兒應進一步對標記染色體進行來源檢測，確定染色體的成分，以便盡早干預。

本研究發現常染色體核型異常11例，男患兒異常核型1例，占比9.09%，女患兒異常核型10例，占比90.91%，其中主要異常核型為易位，占比45.45%（5/11），其他還包括倒位、重復和缺失等異常。對于易位和倒位，傳統研究認為染色體發生易位或倒位后遺傳物質沒有缺失或增加，進而不會引起相應的臨床效應，但會引起男性生精障礙、女性不孕不育、反復流產及不良孕育等生育問題[16]。但也有相關研究表明，當相互易位或倒位的斷裂處涉及矮小相關基因或發生基因融合，也會導致身材矮小或生長發育遲緩等表型[17]。因此對染色體易位的患兒應提供詳細的遺傳咨詢服務并提供生育方面建議，避免患兒成長到生育期發生多次流產及娩出畸形胎兒。

綜上，染色體核型異常是導致兒童身材矮小的重要原因之一，其中X染色體的結構和數量的異常是身材矮小患兒最常見的染色體變異類型。對于身材矮小的患兒，尤其是女患兒，應該盡早進行染色體分析檢測，以便協助臨床醫師盡早查明病因，使患兒得到及時有效的治療，進而避免患兒錯過最佳生長期，造成身材矮小、子宮及第二性征發育不良等情況。同時，還要加強對患兒進行心理輔導和婚前及生育前指導，防止下一代身材矮小患兒的出生，這對提高我國人口素質具有積極的實際意義。