Mb、BChE、cTnI及IL-6在心肌梗死中的表達水平及診斷價值研究*

董京京,王德良△,張亞云,江 濤

1.保定市第二中心醫院心內一科，河北保定 072750;2.石家莊市第八醫院內科，河北石家莊 050051

心血管疾病是全球范圍內導致人類死亡的重要疾病之一。急性心肌梗死(AMI)是導致心血管疾病死亡的主要原因，病情發展迅速，嚴重危及患者生命[1]。及時準確診斷AMI，有利于及時實施冠狀動脈血運重建治療，縮短缺血再灌注時間，減少心肌細胞的損傷，改善患者的遠期預后[1]。臨床上常用的心肌損傷標志物包括心肌肌鈣蛋白(cTnI)、肌紅蛋白(Mb)、肌酸激酶同工酶等[3]，但這些標志物存在釋放時間延遲、持續時間長和缺乏組織特異性等局限性，特別在老年群體中更為顯著[4]，因此有必要尋找新的心肌損傷生物標志物。丁酰膽堿酯酶(BChE)主要在肝臟合成，存在于人類中樞神經系統等人體組織[5]。BChE作為一種非特異性的膽堿酯酶，廣泛參與人體脂代謝的調節，參與血管動脈粥樣硬化疾病的發生發展過程，有助于預測冠心病等心血管疾病預后[6]。白細胞介素-6(IL-6)是一種多效性的細胞因子，可由單核細胞、巨噬細胞等多種細胞產生，在宿主防御體系中發揮重要作用，廣泛作用于神經、內分泌和心血管等系統[7]。研究表明，IL-6水平升高與心絞痛、AMI、心力衰竭等心血管疾病不良預后有關，可能作為新的預后診斷及預測因子[8]。本研究通過檢測血清Mb、BChE、cTnI、IL-6表達，分析四者對AMI患者早期診斷價值。現報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2020年10月至2021年10月期間保定市第二中心醫院診治的58例AMI患者作為AMI組，42例不穩定性心絞痛(UAP)患者作為UAP組，40例同期健康查體的健康人群作為對照組。AMI組納入標準：(1)AMI診斷符合2018 年 ESC/ACCF/AHA/WHF 第 4 版《心肌梗死全球統一定義》[9]；(2)AMI均為初次診治；(3)患者均接受冠狀動脈造影檢查及經皮冠狀動脈介入治療。排除標準：(1)既往有心臟病病史；(2)合并惡性腫瘤、急慢性感染等疾病；(3)近期有手術史或肝腎功能不全。UAP 組患者的UAP診斷結合患者心絞痛發作時的癥狀特點、硝酸酯類藥物治療效果、心肌標志物的改變以及心電圖一過性改變做出臨床診斷，同時符合DECKERS 推薦的標準[10]。

1.2血清Mb、BChE、cTnI、IL-6檢測 取AMI組和UAP組患者入院12 h內空腹靜脈血5 mL，對照組健康查體時清晨空腹靜脈血5 mL，3 000 r/min離心10 min，離心半徑10 cm，取上層血清。采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測血清BChE、IL-6表達水平，檢測步驟嚴格按照說明書進行(試劑盒購自上海心語生物科技公司)。簡要步驟：微量反應板每孔加入標本50 μL。每孔加入酶結合物50 μL，充分混勻，封板，37 ℃ 30 min。洗滌液注滿各孔洗滌5次。每孔加顯色劑A液、B液各50 μL，充分混勻，封板，置37 ℃ 15 min。加終止液50 μL，充分混勻。用酶標儀讀數，取波長450 nm，讀取各孔吸光度(A)值。應用美國雅培全自動生化分析儀，采用免疫熒光分析法檢測血清cTnI、Mb水平。

2 結 果

2.13組血清Mb、BChE、cTnI、IL-6表達水平比較 3組各組在性別、年齡、高血壓、糖尿病、吸煙史、飲酒史及高脂血癥史之間，差異無統計學意義(均P>0.05)。3組血清Mb、BChE、cTnI、IL-6表達水平比較，差異均有統計學意義(P<0.05)。相比于UAP組和對照組，AMI組血清Mb、cTnI及IL-6表達明顯升高，BChE明顯降低，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 3組一般資料及血清Mb、BChE、cTnI、IL-6表達水平比較[n/n或或n(%)]

分組n高脂血癥Mb(μg/L)BChE(kU/L)cTnI(μg/L)IL-6(pg/mL)AMI組5814(24.1)121.72±9.01*#6.35±1.51*#1.32±0.22*#55.72±4.21*#UAP組4210(23.8)54.42±7.16*12.60±1.62*0.43±0.11*25.14±3.43*對照組408(20.0)28.30±4.1220.14±1.81#0.26±0.0514.28±3.15F/χ20.261 2 146.600 846.220 669.160 1 681.670P0.878 <0.001 <0.001 <0.001 <0.001

2.2單因素Logistic回歸分析影響AMI發生的獨立預測因素 為明確影響AMI發生的因素，本文以是否發生AMI為因變量(是=1，否=0)，將性別(男=1，女=0)、年齡(≥60歲=1，<60歲=0)、高血壓(有=1，無=0)、糖尿病(有=1，無=0)、高脂血癥(有=1，無=0)、血清Mb(≥119.25 μg/L=1，<119.25 μg/L=0)、BChE(<6.17 kU/L=1，≥6.17 kU/L=0)、cTnI(≥1.26 μg/L=1，<1.26 μg/L=0)、IL-6(≥54.12 pg/mL=1，<54.12 pg/mL=0)水平為協變量，進行單因素Logistic回歸分析，結果男性、高脂血癥、血清Mb≥119.25 μg/L、BChE<6.17 kU/L、cTnI≥1.26 μg/L和IL-6≥54.12 pg/mL是AMI發生的危險因素。見表2。

表2 單因素Logistic回歸分析影響AMI的獨立預測因素

2.3多因素Logistic回歸分析影響AMI發生的獨立預測因素 在單因素分析的基礎上，進行多因素Logistic回歸模型。結果顯示，血清Mb≥119.25 μg/L、BChE<6.17 kU/L、cTnI≥1.26 μg/L和IL-6≥54.12 pg/mL是AMI發生的獨立危險因素(P<0.05)。見表3。

表3 多因素Logistic回歸分析影響AMI的獨立預測因素

2.4血清Mb、BChE、cTnI、IL-6對AMI診斷的預測價值 以UAP組作為對照，應用ROC曲線分析血清Mb、BChE、cTnI、IL-6及聯合檢測對AMI的診斷的預測價值。結果血清Mb、BChE、cTnI、IL-6及聯合檢測的AUC分別為0.645、0.793、0.807、0.712及0.860。與單一指標相比，血清Mb、BChE、cTnI、IL-6聯合檢測對AMI診斷具有較高的預測價值(Z=5.730、4.212、3.473、4.875，P<0.05)。見表4、圖1。

表4 血清Mb、BChE、cTnI、IL-6對AMI診斷的預測價值

圖1 血清Mb、BChE、cTnI、IL-6對AMI診斷價值的ROC曲線分析

3 討 論

心肌梗死是全世界死亡的主要原因，梗死后的心肌細胞存在不可逆轉的損害以及瘢痕組織喪失修復功能，降低心室收縮性，繼而進展為心力衰竭。由于在 AMI 的早期心電圖多表現正常，心肌酶缺乏靈敏度和肌鈣蛋白假陰性結果[11]。此外，AMI 的臨床治療上主要包括 PCI 和溶栓治療等血運重建治療。但有效的再灌注治療需要早期準確地診斷AMI。因此，需尋找一種早期、特異、快速、無創的生物標志物，提高 AMI 的救治療效，減少患者死亡風險。

cTnI是存在于心房與心室肌中發揮調節心肌收縮作用的蛋白。當心肌受損，cTnI釋放至血，是一種具有較高特異性的心肌損傷指標。Mb是一種結合蛋白，廣泛存在于心肌和骨骼肌中，心肌受損，Mb 可迅速釋放入血，但Mb的變化較快，當Mb達峰值時，患者已再次發生AMI[12]。本研究結果顯示，AMI組血清cTnI、Mb水平明顯高于對照組和UAP組，并且AMI組血清cTnI水平與Mb呈正相關，表明cTnI、Mb可作為診斷AMI的敏感指標。既往研究表明，聯合檢測 cTnI和 Mb對AMI診斷的靈敏度超過90%[13]。

膽堿酯酶有多種同工酶形式，分為乙酰膽堿酯酶和BChE兩種。BChE主要由肝臟合成，分布于肝、腦白質和血清中。人血清中BChE較乙酰膽堿酯酶多，能夠水解許多酯類、肽類和酰胺類化合物，不僅參與某些肝臟疾病的疾病進展，而且還參與一些非肝臟疾病[5]。但目前有關血清BChE在動脈粥樣硬化性心血管疾病中作用的研究較少，尤其在AMI中的作用尤其罕見。本研究發現，AMI組患者血清BChE水平明顯低于UAP組和對照組，提示BChE可能參與AMI疾病的發生發展。分析其機制，可能與BChE參與脂質代謝的調節過程有關。研究發現，BChE參與調節機體外周血三酰甘油、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白膽固醇及脂蛋白的代謝調節過程，并且血清BChE的活性與多種心血管疾病的危險因素呈負相關，低血清BChE活性是中老年人遠期全因死亡及心血管疾病的預測因素，可預測急性冠脈綜合征患者遠期死亡[14]。目前AMI中血清BChE活性降低的機制尚不清楚。有學者認為，血清低BChE可能是嚴重的急性心肌梗死患者肝損傷的血清標志物，或者是既往已存在肝臟疾病，在急性心肌梗死或心源性死亡中由于肝臟損傷的過程中顯現出來[15]。此外，心肌梗死過程中常伴有局部和全身的炎癥反應，BChE作為乙酰膽堿重要的調控因子，參與膽堿能抗炎通路的激活，其表達水平降低加重心肌梗死過程中的炎癥反應，并能夠導致AMI患者的不良預后[16]。

IL-6是白細胞介素家族成員，該蛋白質主要在急性和慢性炎癥部位產生，被分泌到血清中并通過結合其受體誘導組織局部及全身性炎癥反應，與糖尿病、冠心病等多種炎癥相關疾病有關。本研究結果顯示，AMI組患者血清IL-6水平明顯升高，表明IL-6參與AMI疾病發生過程。AMI疾病發生早期由于心肌缺血缺氧，心肌細胞代謝障礙，增加心肌細胞的細胞膜通透性，局部炎癥反應促成了單核/巨噬細胞分泌IL-6[17]。此外，本研究發現，血清IL-6水平是影響AMI發生的獨立因素，提示血清IL-6可能有助于AMI的早期診斷。有研究發現，IL-6能夠促進細胞間黏附分子1的表達，并通過結合中性粒細胞表面細胞間黏附分子1的配體，促進中性粒細胞活化、黏附、聚集及釋放超氧陰離子、穿孔素等，進一步加重心肌細胞損傷[18]。

本研究中，多因素Logistic回歸分析結果顯示，血清Mb、BChE、cTnI、IL-6水平4個因素是影響AMI發生的獨立因素。有學者研究發現，聯合檢測血清Mb、cTnI等指標水平能夠早期診斷AMI[19]，本研究結果與其一致。本研究發現，BChE診斷終點事件的靈敏度較低，而特異度較高，可通過聯合cTnI等其他指標提高其診斷的靈敏度。因此，血清Mb、BChE、cTnI、IL-6是AMI診斷的重要血清標志物。本研究進一步研究血清Mb、BChE、cTnI、IL-6及聯合檢測對AMI的診斷價值，ROC曲線結果顯示血清Mb、BChE、cTnI、IL-6聯合檢測對AMI患者的診斷價值最高，并且具有較高的靈敏度，提示血清Mb、BChE、cTnI、IL-6聯合檢測明顯提高在AMI早期診斷方面的應用價值。

綜上所述，AMI患者血清Mb、cTnI、IL-6表達升高，BChE表達降低，四者是AMI診斷的獨立預測因素。聯合檢測預測血清Mb、BChE、cTnI、IL-6對AMI患者具有較高的診斷價值。但本研究仍存在一定的局限，一是由于納入病例數有限，結果可能存在一定的偏倚，有待后續擴大樣本量進行深入研究。二是AMI 病情發展變化迅速，不同疾病的特定階段各指標存在相應的差異表達模式，有必要進行多時間段的探究，動態續監測以反映疾病發展變化規律。