冷凝集素在交叉配血過程中的影響

張薇薇

（沈陽市骨科醫(yī)院承基醫(yī)院，遼寧 沈陽 110000）

在對(duì)患者實(shí)施輸血前合理展開交叉配血試驗(yàn)的意義顯著，其對(duì)于輸血安全性可做出充分保證。但是對(duì)于此類患者而言，如果血清中表現(xiàn)出較高冷凝集素抗體滴度，則會(huì)使得交叉配血困難度顯著增加[1-2]。對(duì)于冷凝集而言，其主要因?yàn)樽陨砜贵w導(dǎo)致，于低溫條件下紅細(xì)胞會(huì)呈現(xiàn)出凝集成團(tuán)的情況。通常在＜ 31 ℃的條件下表現(xiàn)出冷凝集反應(yīng)現(xiàn)象，其最強(qiáng)溫度條件主要集中于0～4 ℃，并呈現(xiàn)出最顯著的紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象。在溫度呈現(xiàn)出一定程度升高后，會(huì)逐漸表現(xiàn)出凝塊消失以及抗原抗體復(fù)合物解離的現(xiàn)象，對(duì)此就冷凝集素的影響因素展開針對(duì)性分析的意義顯 著[3-4]。本次研究將我院2017年3月至2020年2月收治的50例疑難交叉配血凝集患者（因?yàn)槔淠貙?dǎo)致）作為試驗(yàn)對(duì)象，合理采用改良凝聚胺法、鹽水法、經(jīng)典抗人球蛋白試驗(yàn)以及微柱凝膠免疫法對(duì)特異性抗體實(shí)施鑒定，合理展開血清學(xué)分析操作，主要探析在實(shí)施交叉配血試驗(yàn)期間冷凝集素產(chǎn)生的影響，以對(duì)患者輸血的安全性做出保證。

1 資料與方法

1.1 一般資料 將我院2017年3月至2020年2月收治的50例疑難交叉配血凝集患者（因?yàn)槔淠貙?dǎo)致）作為試驗(yàn)對(duì)象。其中女29例，男21例；年齡區(qū)間為46～71歲，平均為（59.25±2.59）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者疾病類型主要集中于腫瘤、血透以及發(fā)熱等方面。②對(duì)于臨床輸血指征均滿足。排除標(biāo)準(zhǔn)：①非冷凝集素原因?qū)е鲁尸F(xiàn)出交叉配血凝集現(xiàn)象。②不具備輸血指征。

1.2 方法

1.2.1 合理對(duì)患者展開交叉配血試驗(yàn)操作 選擇2支干燥潔凈試管分別完成次管以及主管的標(biāo)注，準(zhǔn)備獻(xiàn)血者1滴紅細(xì)胞懸液（3%～5%）以及受血者2滴血漿于主管中加入；準(zhǔn)備受血者1滴紅細(xì)胞（3%～5%）以及獻(xiàn)血者2滴血漿于次管中加入，此外各準(zhǔn)備0.6 mL低離子介質(zhì)溶液于每管中分別加入，將其混勻后，保持1 min室溫孵育，且各準(zhǔn)備凝聚氨溶液（1滴）于每管中加入，混勻后保持15 s靜置。于3 500 r/min轉(zhuǎn)速下離心15 s，去除上清液，靜置待表現(xiàn)出瀝干現(xiàn)象后，將試管輕輕搖動(dòng)。觀察紅細(xì)胞是否表現(xiàn)出凝集現(xiàn)象，如呈現(xiàn)出凝集現(xiàn)象，準(zhǔn)備1滴重懸液于各管中加入，確保輕輕混合后，對(duì)凝集有無散開進(jìn)行觀察，通過顯微鏡對(duì)結(jié)果進(jìn)行判定。

1.2.2 合理對(duì)患者展開冷凝集素試驗(yàn)操作 對(duì)患者2 mL 靜脈血進(jìn)行采集，于37 ℃條件下進(jìn)行放置，觀察凝固后將血清實(shí)施分離。針對(duì)患者1 mL抗凝血進(jìn)行采集，針對(duì)紅細(xì)胞利用溫生理鹽水實(shí)施3次洗滌，最后確保紅細(xì)胞懸液（2%）成功完成配置。之后選擇小試管10支，分別準(zhǔn)備0.2 mL生理鹽水于各管中加入，準(zhǔn)備0.2 mL血清中于第一管中加入，之后保持逐管稀釋。在確保混勻后，將0.2 mL去除，對(duì)于對(duì)照主要采用第10管展開。此外，準(zhǔn)備紅細(xì)胞懸液（0.2 mL，2%）于各管中加入，保持搖勻后，于冰箱（4 ℃）中進(jìn)行2～4 h放置，之后就具體結(jié)果進(jìn)行觀察，針對(duì)表現(xiàn)出顯著凝集現(xiàn)象的滴度進(jìn)行認(rèn)真記錄。

2 結(jié)果

針對(duì)所有患者于臨床合理采用凝聚胺法完成交叉配血試驗(yàn)操作，就主管以及次管反應(yīng)進(jìn)行觀察發(fā)現(xiàn)，均表現(xiàn)出程度不同的凝集顆粒現(xiàn)象，呈現(xiàn)出部分顯著特點(diǎn)。于37 ℃條件下保持5～10 min水浴，通過輕緩搖動(dòng)確保顆粒能夠緩慢散開，之后于玻片中導(dǎo)入，通過顯微鏡實(shí)施觀察發(fā)現(xiàn)，紅細(xì)胞表現(xiàn)出彌漫以及散在排列的現(xiàn)象，針對(duì)其他亞型抗體造成免疫反應(yīng)影響結(jié)果可以順利排除，成功完成交叉配血。準(zhǔn)備O型正常人紅細(xì)胞于患者血清中加入，最終發(fā)現(xiàn)在＜32 ℃表現(xiàn)出凝集現(xiàn)象；在4 ℃時(shí)表現(xiàn)出的凝集現(xiàn)象明顯，之后逐漸升高溫度，直至37 ℃進(jìn)行觀察，發(fā)現(xiàn)凝集均全部消失。對(duì)凝集素抗體滴度實(shí)施認(rèn)真測定，就最終結(jié)果進(jìn)行分析，范圍為1/64～1/512。

3 討論

對(duì)于交叉配血試驗(yàn)而言，主要包括副試驗(yàn)以及主試驗(yàn)兩種。對(duì)于主試驗(yàn)而言，主要利用受血者血清以及供血者紅細(xì)胞血液完成試驗(yàn)，對(duì)二者之間是否表現(xiàn)出反應(yīng)抗體進(jìn)行檢測；對(duì)于副試驗(yàn)，主要利用供血者血清以及受血者紅細(xì)胞懸液完成臨床試驗(yàn)，對(duì)二者之間是否表現(xiàn)出不合抗體加以檢測。臨床開展交叉配血試驗(yàn)?zāi)康脑谟趯?duì)供血者以及受血者之間ABO血型匹配正確與否加以鑒定，對(duì)于受血者溶血性輸血反應(yīng)的出現(xiàn)給予充分避免。

冷凝集素作為自身IgM完全抗體之一，于低溫條件下，受此種抗體的影響，會(huì)使得同型紅細(xì)胞或者自身表現(xiàn)出可逆性凝集的現(xiàn)象。通常于0～4 ℃會(huì)表現(xiàn)出凝集反應(yīng)高峰的現(xiàn)象，當(dāng)溫度逐漸上升，保持37 ℃后對(duì)凝集現(xiàn)象進(jìn)行觀察，最終發(fā)現(xiàn)全部消失[5]。對(duì)于一定濃度冷凝集素抗體而言，于部分人群中均會(huì)發(fā)現(xiàn)。在通常情況下，對(duì)血清中冷凝集素效價(jià)進(jìn)行分析，正常人均＜1/16，從而不會(huì)導(dǎo)致表現(xiàn)出系列癥狀現(xiàn)象。但是因?yàn)橄盗胁±硪蛩氐挠绊懀瑫?huì)使得冷凝集素效價(jià)呈現(xiàn)出一定程度增高現(xiàn)象，從而對(duì)應(yīng)表現(xiàn)出冷凝集素綜合征現(xiàn)象[6-12]。因?yàn)槔淠氐挠绊懀瑫?huì)使得系列檢驗(yàn)項(xiàng)目呈現(xiàn)出失真現(xiàn)象，尤其以血常規(guī)受到的影響較為顯著，對(duì)于血型結(jié)果的測定均會(huì)產(chǎn)生對(duì)應(yīng)影響，尤其針對(duì)交叉配血試驗(yàn)會(huì)產(chǎn)生顯著 影響[13-20]。

本次研究發(fā)現(xiàn)，針對(duì)所有患者于臨床合理采用凝聚胺法完成交叉配血試驗(yàn)操作，就主管以及次管反應(yīng)進(jìn)行觀察發(fā)現(xiàn)，均表現(xiàn)出程度不同凝集顆粒現(xiàn)象，呈現(xiàn)出部分顯著特點(diǎn)，之后于37 ℃條件下保持 5～10 min水浴，通過輕緩搖動(dòng)確保顆粒能夠緩慢散開，之后于玻片中導(dǎo)入，通過顯微鏡實(shí)施觀察發(fā)現(xiàn)，紅細(xì)胞表現(xiàn)出彌漫以及散在排列的現(xiàn)象，針對(duì)其他亞型抗體造成免疫反應(yīng)影響結(jié)果可以順利排除，成功完成交叉配血。準(zhǔn)備O型正常人紅細(xì)胞于患者血清中加入，最終發(fā)現(xiàn)在＜32 ℃表現(xiàn)出凝集現(xiàn)象。在4 ℃時(shí)表現(xiàn)出的凝集現(xiàn)象明顯，之后逐漸升高溫度，直至37 ℃進(jìn)行觀察，發(fā)現(xiàn)凝集均全部消失。對(duì)凝集素抗體滴度實(shí)施認(rèn)真測定，就最終結(jié)果進(jìn)行分析，范圍為1/64～1/512，對(duì)此未避免呈現(xiàn)出血液凝集情況，要求在開展輸血工作前積極做好37 ℃水浴工作，以充分實(shí)現(xiàn)用血安全性。

綜上所述，對(duì)于輸血科工作人員在日常配血期間，較易因?yàn)槔淠憩F(xiàn)出交叉配血不合的情況，此時(shí)需要針對(duì)血清合理完成系列冷凝集素檢測工作。針對(duì)冷凝集素具體檢測期間，需要同其他抗體以及RBC自身凝聚進(jìn)行有效鑒別。如患者表現(xiàn)出冷凝集現(xiàn)象，則針對(duì)其在給予交叉配血期間，對(duì)于加溫輸注工作需要認(rèn)真完成，以將血清中表現(xiàn)出的冷凝集素影響充分消除，且在輸血期間需要對(duì)緩慢滴入做出充分保證，以對(duì)患者用血的安全性做出保證，促進(jìn)患者病情康復(fù)。