廣西山口紅樹內生真菌Alternaria sp.SK6YW3L中的蒽醌類化合物*

劉亞月，馮昀鎧，楊文聰，吳穎楠，佘志剛

1.廣東海洋大學食品科技學院，廣東湛江 524088

2.中山大學化學學院，廣東廣州 510006

醌（quinones）是以醋酸和丙二酸為前體，經縮合、還原等步驟形成的具有不飽和環二酮結構或容易轉變成這樣結構的一類化合物的總稱。醌類化合物是天然產物中一類重要的活性成分，廣泛分布于細菌、真菌、地衣、裸子植物和被子植物中，在棘皮動物中也有發現［1-2］。根據結構特點的不同，一般可分為苯醌、萘醌、菲醌和蒽醌4大類。其中蒽醌類是天然醌類化合物的一種重要類型，主要包括蒽醌衍生物及其不同程度的還原產物，如氧化蒽酚、蒽酚、蒽酮及蒽酮的二聚體等［3-6］。天然存在的蒽醌類成分在蒽醌母核上常有羥基、羥甲基、甲氧基和羧基取代，多以游離形式及與糖結合成苷等形式存在于生物體內。海洋微生物資源豐富，其次級代謝產物中的醌類化合物由于結構骨架新穎，種類多樣，并有多種雜原子取代，且由于此類物質多具有細胞毒、抗菌、抗癌、抗病毒、抑制中樞神經和cAMP磷酸二酯酶等生物活性而受到廣泛的關注［7-10］。

2021 年Zhang 等［8］從 菌 株Streptomycessp.PU-MM59 中分離獲得7 個新的蒽醌衍生物himalaquinones A～G。活性測試表明，himalaquinone G對PC3 細胞顯示強的細胞毒活性（IC50為0.32 μmol/L），對A549 細胞顯示中等強度的細胞毒活性（IC50為1.88 μmol/L）。同年，南卡羅來納大學課題組［11］在對1 株南圣地亞哥灣海洋沉積泥來源菌株Streptomycessp. CNZ-748 的研究中，分離獲得了5個新的具有末端脫氧糖部分和蒽醌苷元的化合物grincamycins P～T。活性測試發現，grincamycins S 和T 對4 株PMP 細 胞 系（PMP501-1，PMP457-2，ABX023-1 以及C09-1）均顯示好的抑制活性（IC50值范圍為2.5～61 μmol/L）。化合物grincamycin Q 則對PMP501-1 和PMP457-2 細胞顯示一定的細胞毒活性（IC50值分別為3.9 和7.8 μmol/L）。He等［12］從海洋紅海綿來源內生真菌Talaromyces islandicus中分離獲得5個新的羥化蒽醌衍生物。生物活性測試發現，5 個化合物對Staphylococcus aureus顯示較好的抑菌活性（MIC 值范圍為2～8 μg/mL），同時表現出比陽性對照2，6-二叔丁基對甲酚更強的DPPH 自由基清除活性（IC50值范圍為12～52 μmol/L），并顯示中等強度的ABTS 自由基清除活性（IC50值范圍為8.3～34 μmol/L）。2017 年，Li等［13］從紅樹尖瓣海蓮來源內生真菌Penicillium citrinumHL-5126的乙酸乙酯提取物中獲得1 個新的氯代蒽醌化合物2′-acetoxy-7-chlorocitreorosein，該化合物對Vibrio parahaemolyticus顯示較好的抑菌活性（MIC 值為10.0 μmol/L）。因此，開展海洋蒽醌類次級代謝產物的研究在藥物研究領域具有廣泛的研究前景，能夠為今后尋找新型、強效的藥物先導化合物提供理論支撐。

本文對分離自廣西山口紅樹林自然保護區紅樹植物無瓣海桑Sonneratia apetala的內生真菌Alternariasp.（SK6YW3L）進行了發酵培養，并對其次級代謝產物進行了分離純化和結構鑒定工作，從中獲得了13個蒽醌類化合物（圖1）。經核磁解析和與文獻數據比對，確定化合物的結構依次為：7-acetyl-1，3，6-trihydroxyanthracene-9，10-dione（1）、（11S）-1，3，6-trihydroxy-7-（1-hydroxyethyl）anthracene-9，10-dione（2）、7-O-demethyl-6-deoxybostrycoidin（3）、altersolanol A（4）、dactylariol（5）、altersolanol B（6）、emodin（7）、emodin-3-methyl ether（8）、6-hydroxy-aloeemodin（9）、anthraquinone A（10）、1，5-dihydroxy-7-methoxy-2-methylanthracene-9，10-dione（11）、alterporriol N（12）和alterporriol A（13）。采用銅靶單晶X-Ray 衍射技術分析了化合物1和4的單晶結構，其中1 為新單晶，并確定了化合物4的絕對構型為（5R，6S，7R，8S）；化合物2 的絕對構型通過與文獻數據對比，確定為11S；化合物5和6 的絕對構型則通過對比化合物4 的旋光和CD數據分別確定5R，6S，7R和6S，7R；化合物12 和13的軸手性則通過CD數據確定為S。

圖1 化合物1～13的結構Fig.1 The structure of compounds 1-13

1 儀器與材料

AVANCE Ⅲ500 MHz 核磁共振波譜儀（Bruker BioSpin，瑞士）；Chirascan ?CD 光譜儀（Applied Photophysics，英國）；DSQ EI-MS 質譜儀（Thermo Fisher，美國）；Agilent X射線單晶衍射儀（Agilent，美國），銅靶；HPLC：Agilent HP 1100高效液相色譜儀（Agilent，美國），Ultimate?XB-C18（5 μm，10 mm×250 mm）色譜柱；薄層層析GF254硅膠板（青島邦凱高新技術材料有限公司，中國）；200-300目柱層析硅膠（青島海洋化工廠，中國）；Sephadex LH-20（GE Healthcare，英國）；ODS 色譜填料（YMC，日本）；常規試劑均為分析純。

菌株SK6YW3L采集于廣西山口紅樹林自然保護區，由紅樹植物無瓣海桑的新鮮果實中分離得到。通過用真菌ITS間隔序列所得到的堿基序列在GenBank 中用BLAST 進行相似性分析［14］，與菌株Alternaria longipes（KJ722535）有99.0% 的 相 似。因此，鑒定菌株SK6YW3L 為鏈格孢屬真菌Alternariasp.。該菌種的DNA 序列已提交至GenBank（序號KP059101），該菌株目前保藏在中山大學化學學院天然藥物研究室。

2 提取與分離

菌株SK6YW3L 在25 ℃下用w=3%大米培養基發酵，培養基配方為：大米50 g/瓶，海鹽水60 mL/瓶［ρ（海鹽水）=30 g/L］，121 ℃滅菌30 min，冷卻后接入種子液5 mL，靜置培養28 d，共接種33瓶。

發酵物用等體積的甲醇提取3 次，獲得有機相，有機相經減壓濃縮后，再用乙酸乙酯萃取3次，濃縮得到11.5 g粗浸膏。所得粗浸膏經柱層析（硅膠：200～300 目）進行初步分離，以V（石油醚）∶V（乙酸乙酯）為100∶0，90∶10，80∶20，70∶30，50∶50，25∶75，100∶0 為流動體系進行梯度洗脫，收集得到7 個組分（Fr.1～Fr.7）。Fr.4（1.1 g）部分經進一步硅膠柱層析，以V（石油醚）∶V（二氯甲烷）為100∶0，70∶30，50∶50，25∶75，0∶100 梯度洗脫，得5 個組分（Fr.4-1～Fr.4-5）。組分Fr.4-4常溫下靜置揮發獲得黃色結晶，依次用石油醚和甲醇洗滌3次，得化合物1（12.5 mg）。組分Fr. 4-5 經半制備HPLC 分離，流動相為甲醇-水，體積比為85∶15等度洗脫，流速為2 mL/min，得化合物2（tR= 17.4 min，7.5 mg）和3（tR= 21.0 min，6.8 mg）；Fr. 4-3 多次采用葡聚糖凝膠Sephadex LH-20 層析分離［V（石油醚）∶V（氯仿）∶V（甲醇）為2∶1∶1 體系洗脫］，得化合物12（5.5 mg）。Fr.3（528 mg）經正相硅膠柱層析，V（石油醚）∶V（乙酸乙酯）為100∶0，95∶5，90∶10，80∶20，70∶30 梯度洗脫，收集得到5 個次級組分（Fr.3-1～Fr.3-5），組分Fr.3-5 經多次使用葡聚糖凝膠Sephadex LH-20［V（氯仿）∶V（甲醇）為1∶1，V（石油醚）∶V（氯仿）∶V（甲醇）為2∶1∶1 體系］相應獲得化合物4（20.8 mg），5（19.6 mg）和6（7.5 mg）。將Fr. 5（546 mg）進行正相硅膠柱層析，用V（石油醚）∶V（乙酸乙酯）為100∶0，70∶30，50∶50，25∶75，0∶100 梯度洗脫，收集獲得5 個組分（Fr. 5-1～Fr. 5-5）。組分Fr. 5-5 常溫下靜置揮發獲得黃色結晶，用甲醇洗滌3 次，獲得化合物8（6.5 mg）和11（5.8 mg）。對組分Fr. 5-3 采用半制備HPLC進行制備，流動相為甲醇-水，體積比為75∶25 等度洗脫，流速為2 mL/min，獲得化合物9（tR= 15.7 min，4.5 mg）和10（tR= 23.0 min，2.8 mg）。對Fr.2 （342 mg）經多次葡聚糖凝膠Sephadex LH-20 分離［V（石油醚）∶V（氯仿）∶V（甲醇）為2∶1∶1，V（氯仿）∶V（甲醇）為1∶1 體系］，得化合物7（3.5 mg）。Fr.6（328 mg）經正相硅膠柱層析，V（氯仿）∶V（甲醇）為100∶0，90∶10，80∶20，70∶30，50∶50，0∶100 梯度洗脫，收集獲得6 個組分（Fr. 6-1～Fr. 6-6）。組分Fr. 6-5 于常溫下靜置揮發獲得黃色固體，依次用石油醚、二氯甲烷和甲醇洗滌3次，得到化合物13（5.9 mg）。組分Fr.6-4經葡聚糖凝膠Sephadex LH-20 層析分離（純甲醇體系）洗脫，得化合物12（7.9 mg）。

3 α-葡萄糖苷酶抑制活性測試

采用比色法［15］測定化合物對α-葡萄糖苷酶的抑制活性。待測樣品用DMSO 溶解，濃度配制為20 μmol/mL，實驗所需的酶和底物則采用pH = 7，濃度為0.01 mol/L 的KH2PO4/K2HPO4緩沖液配成適宜濃度，所有用于測試的初始反應體系均為1 mL，內含0.02 U 酶、0.2 μmol 底物（對硝基苯-β-半乳糖苷）、10 μL DMSO、10 μL 樣品。取一定量的酶液，加入空白的DMSO 溶液或樣品溶液，迅速混勻；然后，37 ℃水浴20 min，取出，加入一定量的底物，混勻，測定在405 nm 的波長條件下測定體系在1 min 內吸光度值的變化。阿卡波糖用作陽性對照。

4 結果與分析

4.1 菌株鑒定

菌株SK6YW3L 經rDNA 的ITS 序列測定，測序結果如下：TCCGTAGGTGAACCTGCGGAGGGATCATTACA CAAATATGAAGGCGGGCTGGAATCTCTCGGGG TTACAGCCTTGCTGAATTATTCACCCTTGTCTT TTGCGTACTTCTTGTTTCCTTGGTGGGTTCGCC CACCACTAGGACAAACATAAACCTTTTGTAATT GCAATCAGCGTCAGTAACAAATTAATAATTACA ACTTTCAACAACGGATCTCTTGGTTCTGGCATC GATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATAAGTAGT GTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCT TTGAACGCACATTGCGCCCTTTGGTATTCCAAA GGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTTGTACCCTC AAGCTTTGCTTGGTGTTGGGCGTCTTGTCTCTA GCTTTGCTGGAGACTCGCCTTAAAGTAATTGG CAGCCGGCCTACTGGTTTCGGAGCGCAGCACA AGTCGCACTCTCTATCAGCAAAGGTCTAGCAT CCATTAAGCCTTTTTCAACTTTGACCTCGATCA GGTAGGGATACCCGCTGAACTTAAGCATATCA AAGTCCGGAGGAA

將菌株SK6YW3L 的堿基序列與NCBI 數據庫中序列相似性較高的已有序列，用BLAST 進行相似性分析，發現其與菌株Alternaria longipes（KJ722535）有99.0%的相似。因此，可鑒定菌株SK6YW3L為鏈格孢屬真菌Alternariasp.。

4.2 結構鑒定

化合物1，黃色結晶。高分辨質譜HR-EI-MS給出分子離子峰為298.046 8［M］+（理論值為298.047 2），結合化合物的1H 和13C NMR 可知分子式為C16H10O6，不飽和度Ω為12。1H NMR 譜圖中，在低場區域有1個酚羥基信號δH12.86，以及4個芳香氫信號，其中包括1 組間位耦合質子信號δH6.60（d，J=2.3 Hz，H-2），δH7.10 （d，J=2.3 Hz，H-4）和2 個孤立的質子信號δH8.42 和7.59（表1）。而在高場區域則只含有1 個甲基信號δH2.68。進一步分析13C NMR 可知，分子中含有16 個碳，包括3 個羰 基 碳（δC200.5，184.8 和181.5），1 個 甲 基 碳δC30.2，以及12個sp2雜化的碳，不飽和度為9，故可推斷化合物1應該為一個三環體系化合物。結合分子式，可知化合物中含有3個OH 基團。根據13C譜中2 個典型的羰基碳的化學位移值δC184.8 和181.5，可知該化合物為典型的蒽醌類化合物。HMBC 譜圖中（圖2），由甲基碳質子（H3-12）與C-11，C-7有相關，可知分子中含有1個乙酰基，且連在C-7 位上。經文獻檢索，可推斷化合物為7-acetyl-1，3，6-trihydroxyanthracene-9，10-dione［16］。該結構經單晶X-Ray 衍射分析驗證［17］（圖3），同時檢索文獻可知，該單晶為新單晶，未見文獻報道， 單晶數據見表2（deposition No. CCDC 1420827）。

圖2 部分化合物的HMBC相關示意圖Fig.2 The HMBC correlations of several compounds

圖3 化合物1和4的單晶ORTEP圖Fig.3 Perspective ORTEP drawing of compounds 1 and 4

化合物2，黃色粉末。EI-MS 給出分子離子峰為300［M］+，比較化合物1和2的1H 和13C NMR 譜圖可知，化合物2 的氫譜中在δH5.27 多了1 組裂分為四重峰的質子信號（表1）。同時，在1 中的甲基也裂分成二重峰，且化學位移值明顯向高場移動δH1.50。因此，可以推測化合物2 應為化合物1 在C-11 位的羰基還原為羥基的產物。13C NMR 圖中，支鏈上的酮羰基碳的消失以及在δC66.8處多出1個碳信號均說明上述化合物結構的推測是合理的。進一步測定化合物的旋光值可知，化合物的旋光度為［α］-30（c0.01 MeOH）與文獻報道的化合物（11S）-1，3，6-trihydroxy-7-（1-hydroxyethyl）anthracene-9，10-dione［18］旋光方向一致，故可推斷化合物2 的C-11 位的構型為S。經文獻檢索，鑒定化合物2 為已知化合物蒽醌（11S）-1，3，6-trihydroxy-7-（1-hydroxyethyl）anthracene-9，10-dione。

表1 化合物1～3的1H NMR（500 MHz）和13C NMR（125 MHz）數據表Table 1 The 1H NMR（500 MHz）and 13C NMR（125 MHz）data of compounds 1-3

化合物3，黃色粉末。EI-MS 顯示化合物分子離子峰m/z為255［M］+，為奇數，可判斷化合物結構中含有奇數個氮。結合13C NMR 確定化合物3的分子式為C14H9NO4，計算不飽和度Ω為11。化合物3的1H NMR 譜圖顯示的信號與化合物1很相似，只是后者的一個質子δH8.42 往更低場δH9.25 進行了移動。結合分子式中含氮的推論以及該質子的碳（C-8）化學位移為δC147.9，推斷化合物結構中含有1個吡啶片段。綜合上述推論和HMBC信息和文獻檢索（圖2），鑒定化合物3 為已知化合物7-O-demethyl-6-deoxybostrycoidin［19］。

化合物4，黃色晶體。EI-MS 顯示分子離子峰為m/z為336［M］+。13C NMR 譜圖中顯示16個碳信號，其中包括2 個典型的蒽醌類羰基碳信號（δC188.6 和183.7），4 個sp3雜化碳（δC68.6，68.8，73.0 和73.9），推斷化合物4 可能為四氫蒽醌類化合物或衍生物。進一步分析1H NMR 譜圖可知（表3），分子中含有1個螯合羥基質子δH12.14，1 個甲基質子δH3.89，1 個甲氧基質子δH1.25，1 對相互耦合的芳香質子δH7.00（d，J= 2.5 Hz，H-4）和δH6.77（d，J= 2.5 Hz，H-2），以及在化學位移為3.5～6.0間含有7個質子信號。結合1H、13C NMR以及HMBC 相關（圖2），鑒定化合物4 為已知化合物altersolanol A［20］。通過培養，成功獲得了化合物4的單晶結構，并通過銅靶單晶X-Ray 衍射實驗（表2），測定其絕對構型為5R，6S，7R，8S，Flack 值為-0.06（8）（deposition No.CCDC1435677）。

表2 化合物1和2的單晶衍射數據表Table 2 Crystal parameters of compounds 1 and 2

化合物5，黃色粉末。EI-MS 顯示分子離子峰為m/z320［M］+。對比化合物4 和5 兩者的1H和13C NMR（包括135°DEPT 譜）譜可知（表3），兩者含有相同的骨架，化合物5 在碳譜中少了1 個δC68.8 的碳信號和多了1 個在高場區域的CH2信號δC29.9；以及在氫譜中含有2 個CH2質子信號δH3.00，dd（J= 6.0，19.6 Hz）和2.51，dd（J= 9.7，19.6 Hz）。由于亞甲基質子裂分為雙重峰，故可確定應該是在C-7 或C-8 為失去了羥基而形成了亞甲基。進一步分析HMBC 譜圖（圖2），由H2-8 和C-7、C-8a 以及C-9 的相關，可確定是在C-8 位失去了羥基。經文獻檢索，鑒定化合物5為已知化合物dactylariol［21］。

表3 化合物4～6的1H NMR（500 MHz）和13C NMR（125 MHz）數據表Table 3 The 1H NMR（500 MHz）and 13C NMR（125 MHz）data of compounds 4-6

化合物6，黃色粉末。EI-MS 給出分子離子峰為m/z304［M］+，對比化合物5 少了16（一個氧原子的相對原子質量）。而碳譜中兩者顯示相同的碳信號個數，只是化合物6 在化學位移為50～70 處只含有2 個碳信號δC69.0 和70.2；而在高場區域則相對應地又多了1 個亞甲基碳信號δC35.8。因此，可初步假設化合物6 應為5 的再次丟失一個羥基產物。135°DEPT 譜中在高場區域顯示2 個亞甲基碳信號也驗證了上述推論。結合1H NMR 譜圖中，由其中1 個CH2上的2 個質子相互裂分δH2.75，d（18.0）和2.55，d（18.0），確定另一個CH2應位于C-5 位上。經文獻檢索，鑒定化合物6 為已知化合物altersolanol B［22］。

化合物5 和6 的絕對構型是通過與化合物4 的CD 和旋光數據比對而確定的（圖4）。由實驗測得的CD 曲線可知，三者基本吻合，且三者的旋光方向一致［化合物4：［α］-75（c0.01 MeOH）；化合物5：［α］-15（c0.01 MeOH）和化合物6：［α］-23（c0.01 MeOH）］。因此，可推斷化合物5 的絕對構型也為5R，6S，7R，化合物6 的絕對構型也為6S，7R。

化合物7，橙色粉末。EI-MS 顯示分子離子峰m/z270［M］+。結合化合物的1H 和13C NMR 可知分子式為C15H10O5。從化合物的氫譜中可知，該化合物也具有典型的蒽醌類化合物特征：含有2個螯合的酚羥基質子δH12.16 和12.04；2 組間位耦合的芳香氫質子δH7.53（d，J=1.1 Hz，1H）和7.11（d，J=1.1 Hz，1H），7.23（d，J= 2.4 Hz，1H）和6.64（d，J= 2.4 Hz，1H）；1 個苯環上取代的甲基δH2.45；以及碳譜中2 個明顯的酮羰基峰信號δC191.8 和δC182.2。通過文獻檢索，鑒定化合物7 為emodin，即已知化合物大黃素［23］。

化合物8，橙紅色固體，EI-MS 顯示分子離子峰為m/z284［M］+。對比化合物8 和7 的1H NMR數據，發現化合物8 多出1 個甲氧基信號δH3.92（s，3H）。檢索文獻，鑒定化合物8 為1，8-dihydroxy-3-methoxy-6-methylanthracene-9，10-dione，即已知化合物大黃素甲醚［24］。

化合物9，黃色粉末狀固體，EI-MS顯示分子離子峰為m/z286［M］+。對比化合物9 和7 的1H NMR數據，發現化合物9 在高場區域少了1 個甲基質子信號，同時多出1 個連有氧的亞甲基質子信號δH4.77（s，2H）。檢索文獻，鑒定化合物9 為已知化合物6-hydroxy-aloeemodin［25］。

化合物10，黃色粉末。EI-MS顯示分子離子峰m/z為268［M］+。對比化合物10 和8 的1H NMR 數據，發現化合物10在低場區域多了1個芳烴質子信號，且與另外的2 個芳香質子信號相互耦合δH8.18（d，J= 7.9 Hz，1H），7.59（dd，J= 1.1 Hz，7.9 Hz，1H）和8.06（d，J= 1.1 Hz，1H）。檢索文獻，鑒定化合物10為已知化合物anthraquinone A［26］。

化合物11，黃色粉末。EI-MS顯示分子離子峰m/z284［M］+。對比可知，化合物11的相對分子質量比10多16。而在1H NMR譜中，少了1個間位耦合的芳香質子信號，且原本的1 個裂分為dd 峰的質子變為d峰（J=7.7 Hz）。文獻檢索，鑒定化合物11 為已知化合物1，5-dihydroxy-7-methoxy-2-methylanthracene-9，10-dione［27］。

化合物12，紅色粉末。EI-MS 給出分子離子峰為m/z618［M］+，結合化合物的1H和13C NMR數據（表4）可知，化合物分子式C32H26O13，計算不飽和度Ω= 15。從1H 和13C NMR 數據可以看出該化合物可能為1 個二聚蒽醌類化合物。1H NMR 譜圖中給出4 個芳香質子信號（δH8.09，s；7.24，d，J=2.5 Hz；6.61，d，J=2.5 Hz和6.88，s），2個明顯的甲基信號，以及2 個甲氧基信號。13C NMR 譜圖給出的明顯的信號包括4個羰基碳信號（δC190.7，189.2，185.7 和183.3），2 個甲基碳（δC22.3 和δc 17.2），2個甲氧基碳（δC57.1 和δC56.5），以及4 個連在雜原子上的碳信號（δC75.2，74.7，70.7 和70.1）。比較化合物4的核磁譜圖，推斷該化合物應為一個二聚蒽醌類化合物，且其中一個結構單元為化合物4，而剩余的信號則構成了1 個簡單的蒽醌。檢索文獻，鑒定化合物12為已知化合物alterporriol N［28］。

表4 化合物12和13的1H NMR（500 MHz）和13C NMR（125 MHz）數據表（DMSO-d6）Table 4 The 1H NMR（500 MHz）and 13C NMR（125 MHz）data of compounds 12 and 13（DMSO-d6）

通過對比化合物12的實驗CD 數據（圖5）與文獻報道的化合物alterporriol N的CD數據可以發現，化合物12與文獻化合物的CD 在319（-3.67），286（-16.82），261（+16.65），232（+21.66）和216（-23.85）的cotton 效應基本一致。因此可以確定化合物12的軸手性為S。

圖5 化合物12和13的CD曲線圖Fig.5 The CD spectra of compounds 12 and 13

化合物13，紅色粉末。EI-MS 顯示出與化合物12相同的相對分子質量m/z618［M］+。1H和13C NMR 譜圖中顯示該化合物也是1 個二聚蒽醌。對比兩者的1H NMR 譜圖可知，兩者的譜圖質子信號個數完全一樣，且部分質子信號完全相同，故推測兩個化合物結構應相差不大。但與12不同的是，化合物13的1H NMR 譜圖中顯示的是4個孤立的芳香質子（δH7.66，s；7.53，s；6.83，s 和6.82，s）。故推斷分子中應該不含間位芳香質子信號。檢索文獻，鑒定化合物13為已知化合物alterporriol A［29］。化合物13的絕對構型通過與文獻化合物的CD 進行對比而確定的（圖5）。文獻化合物alterporriol A 在甲醇溶劑體系下測定的CD 曲線在316（+1.42），284（+5.21），267（-6.96）和225（+2.19）的cotton效應與化合物13的基本一致，故可確定化合物的軸手性為S。

5 總結與展望

對廣西山口紅樹植物無瓣海桑來源的內生真菌Alternariasp.SK6YW3L 進行發酵，從其發酵粗提物中共分離并鑒定了13 個蒽醌類化合物，表明該菌株產生蒽醌化合物的潛力很大。α-葡萄糖苷酶抑制活性結果顯示，化合物1～3對α-葡萄糖苷酶表現出中等強度的抑制活性，IC50值分別為（210.1 ±1.2），（125.8 ± 1.5）和（68.7 ± 1.3）μmol/L（阿卡波糖IC50值為（446.7±1.6）μmol/L）；化合物4～13則不顯示明顯的抑制活性（IC50> 200 μmol/L）。除此之外，文獻［18］報道化合物1對P.syringaepv.lachrymans，A.avenae和E.carotovora3 株細菌顯示強的抑菌活性（MIC 值分別為3.91，3.91和7.81μg/mL）；化合物2則對上述3 株細菌顯示較弱的抑菌活性（MIC值分別為15.6，15.6和7.81μg/mL）。化合物2還被報道對EV71細胞株表現出強的細胞毒活性［16］（IC50值為25.7 μmol/L）。化合物1～3首次報道為廣西山口紅樹林內生真菌鏈格孢屬次級代謝產物，為蒽醌類化合物的獲取提供了新來源。后續我們將繼續挖掘紅樹林內生真菌的抗菌、細胞毒等活性蒽醌類物質，以期獲得新的藥物先導化合物。