2018—2021年石家莊市某定點醫(yī)院確診的1483例HIV感染患者性別、年齡及血清免疫球蛋白抗體種類分析

劉騰飛，侯博超，石紫軒，黃穎，楊莉

石家莊市第五醫(yī)院檢驗科，石家莊 050021

艾滋病，即獲得性免疫缺陷綜合征（AIDS），其病原體為人類免疫缺陷病毒（HIV），根據(jù)聯(lián)合國艾滋病聯(lián)合規(guī)劃署（UNAIDS）和世界衛(wèi)生組織（WHO）的最新統(tǒng)計［1］，2018年全球共計3790 萬多例HIV 感染者，其中有170 多萬例為新發(fā)HIV 感染者，全年因艾滋病而致死的人口將超過77 萬人［2］。目前，艾滋病已形成嚴(yán)重威脅我國公眾健康的重要公共衛(wèi)生問題［3］。在現(xiàn)代醫(yī)療手段仍無法在艾滋病治療方面采取十分有效的措施時，及時發(fā)現(xiàn)HIV 感染者是預(yù)防HIV 傳播的最有效途徑，而抗體檢查是我國現(xiàn)階段診斷人群HIV感染的主要依據(jù)。按照國家艾滋病診療規(guī)范［4］要求，艾滋病診斷過程需經(jīng)過初篩、復(fù)檢和確證，初篩有反應(yīng)性的標(biāo)本，需要通過兩種不同原理或品牌制造的篩查試劑進行復(fù)檢；當(dāng)出現(xiàn)兩個實驗均呈有反應(yīng)或一組有反應(yīng)一組無反應(yīng)的情況時，則需采用免疫印跡試驗（WB）加以確證［5］，WB 試驗結(jié)果為有反應(yīng)性的方可確認(rèn)感染HIV。石家莊地區(qū)的HIV 初篩實驗室初篩結(jié)果為有反應(yīng)性的標(biāo)本均需送到石家莊市第五醫(yī)院的HIV確證實驗室進行復(fù)檢及確證，確證試驗亦采用WB。HIV 感染人體后，不同的感染時期參與的蛋白不同，所對應(yīng)產(chǎn)生的抗體也不盡相同，在WB 試驗中表現(xiàn)為不同的帶型組合［6］。近幾年石家莊市新增的HIV感染者的人群構(gòu)成特征有哪些特點，是否有所變化，而新增的HIV感染者于感染的什么階段被確認(rèn)未見相關(guān)研究報道。本研究收集2018年1月—2021年7月石家莊第五醫(yī)院的確證實驗室確證為HIV 感染者的性別、年齡等資料及WB試驗的免疫印跡結(jié)果，對其相關(guān)資料及WB條帶特點進行分析，探討石家莊地區(qū)在這4年中新增HIV 感染者的性別、年齡的構(gòu)成特點及常見免疫球蛋抗體種類。

1 對象與方法

1.1 研究對象 2018年1月—2021年7月送往石家莊市第五醫(yī)院艾滋病確證實驗室的初篩有反應(yīng)性的血清標(biāo)本總計3 238例份，通過確證試驗申請單收集所有的年齡、性別及現(xiàn)住址等相關(guān)基礎(chǔ)資料，這3 238 例份標(biāo)本在石家莊市第五醫(yī)院經(jīng)復(fù)檢及WB確認(rèn)為HIV感染且現(xiàn)住址為石家莊市的患者血清標(biāo)本共計1 483例份。

HIV 感染的復(fù)檢與確證：按《全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范》（2015年修訂版）的規(guī)定［7］，所有的初篩陽性樣本送到石家莊市第五醫(yī)院HIV 確證實驗室后，使用膠體金快速檢測法（美爾利爾公司試劑）和化學(xué)發(fā)光法（美國雅培的試劑及儀器）兩種不同的檢測方法進行復(fù)檢，兩次復(fù)檢均呈陰性反應(yīng)的樣本判定為HIV 抗體陰性；兩次復(fù)檢均為陽性或是一陰一陽的樣本判定為篩查實驗有反應(yīng)性，對該樣本進行WB確證實驗（麥克萊金公司的試劑及MP 生物醫(yī)學(xué)亞太私人有限公司的全自動蛋白印跡儀），檢測血清中是否含有HIV 外膜蛋白（env）gp120、gp41、gp105、gp36，逆轉(zhuǎn)錄酶蛋白（pol）p51、p31 及核心蛋白（gag）p24、p17 的抗體。根據(jù)《艾滋病和艾滋病病毒感染診斷標(biāo)準(zhǔn)》（2019年修訂），至少有2 條env 帶（gp41和gp120）出現(xiàn)，或至少1 條env 帶和至少1 條gag 或pol 帶同時出現(xiàn)或符合國家批準(zhǔn)的HIV 抗體確證試劑盒提供的陽性判定標(biāo)準(zhǔn)時可確證為HIV-1 抗體陽性。

1.2 分析方法 統(tǒng)計2018—2021年的石家莊市HIV 感染者確證陽性率；所有入組患者按性別分為男性組與女性組，按年齡分為＜18歲組、19～39歲組、40～59 歲組、＞60 歲組。分析每年不同性別，各年齡組間的HIV 感染陽性率的差異；同時分析各組研究對象的WB帶型結(jié)果，比較各組8種蛋白的檢出率。1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS23.0 統(tǒng)計軟件。血清中g(shù)p120、gp41、p51、p31、p24、p17 及gp105、gp36 的檢出率比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2018—2021年石家莊市HIV 確證陽性者性別、年齡分布 2018—2022年送到石家莊市第五醫(yī)院的初篩有反應(yīng)性的標(biāo)本3 238 例份，2018年的461例份標(biāo)本中，確證陽性249 例份，確證不確定性9 例份，確證陰性203 例份，確證陽性率為54.01%；2019年的1 138 例份標(biāo)本中，確證陽性530 例份，確證不確定性25 例份，確證陰性583 例份，確證陽性率為46.57%；2020年的1 021 例份標(biāo)本中，確證陽性465例份，確證不確定性25 例份，確證陰性531 例份，確證陽性率為45.54%；2021年的618 例份標(biāo)本中，確證陽性239 例份，確證不確定性7 例份，確證陰性372 例份，確證陽性率為38.67%。2018年—2021年，石家莊地區(qū)HIV 確證陽性率呈逐年遞減趨勢（χ2趨勢=22.505，P＜0.05）。

石家莊地區(qū)2018-2021年HIV 確證陽性者性別構(gòu)成：2018—2021年石家莊市共檢測到1 483例HIV感染者中，2018—2021年男性分別為217（87.15%）、451（85.09%）、398（85.59%）、217 例（87.85%），4年總計1 283 例（86.05%），女性分別為32（12.85%）、79（14.91%）、67（14.41%）、30 例（12.15%），4年總計208 例（13.95%），2018—2021年的男女比例分別為6.78∶1，5.71∶1，5.94∶1，7.23∶1，各年間男性HIV 確證陽性者均多于女性，2018—2021年男女性別構(gòu)成比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=1.405，P＞0.05）。

石家莊地區(qū)2018—2021年HIV 確證陽性者年齡構(gòu)成：2018—2021年1483 例HIV 感染者中，患者年齡主要集中在19～39 歲（46.75%），其次是40～59歲（38.70%）；低于18 歲（2.15%）、高于60 歲（12.40%）占比相對較低，詳見表1。

表1 2018—2021石家莊市HIV確證陽性者年齡構(gòu)成

2.2 2018—2021年石家莊市HIV 確證陽性者免疫球蛋白抗體類型 2018—2021年石家莊地區(qū)1 483例HIV 確證陽性者的WB試驗結(jié)果中，抗env編碼的蛋白抗體gp120、gp41、gp105、gp36 檢出的例數(shù)分別為1 327 例、1 483 例、237 例、121 例，檢出率分別為89.48%、100.00%、15.98%、8.16%；抗pol 編碼的蛋白抗體p51、p31 檢出例數(shù)分別為1 419 例、1 332 例，檢出率分別為95.68%、89.82%；抗gag 編碼的抗體p24、p17 檢出例數(shù)分別為1 336 例、461 例，檢出率分別為90.09%、31.09%。其中單條帶型gp41 的檢出率最高，其余檢出率由高到低依次為p51、p24、p31、gp120、p17、gp105、gp36。

不同性別的HIV確證陽性者血清中各類HIV免疫球蛋白抗體檢出率的比較：1 483 例HIV 感染者中，男性1 283 例，8 種HIV 蛋白抗體gp120、gp41、gp105、gp36，p51、p31，p24、p17 的檢出例數(shù)分別為1 131、1 281、217、103、1 216、1 134、1 149、376例，檢出率分別為88.15%、99.84%、16.91%、8.03%、94.78%、88.39%、89.56%、29.32%；女性有208 例，8 種HIV 蛋白抗體的檢出例數(shù)分別為195、206、217、20、18、202、198、186、85 例，檢出率分別為93.75%、99.04%、9.62%、8.65%、97.12%、95.19%、89.42%、40.87%；在這8 種HIV 免疫球蛋白抗體中，男性gp120、p31、p17 的檢出率低于女性（χ2分別為5.698、8.702、11、196，P＜0.05），男性gp105 的檢出率高于女性（χ2=7.131，P＜0.05）。其余帶型的檢出率在不同性別間的檢出率差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

不同年齡的HIV確證陽性者血清中HIV免疫球蛋白抗體檢出率的比較：在1 483例HIV感染者血清中，8 種HIV 抗體的檢出情況見表2。HIV 免疫球蛋白抗體的p51、p31 在＜18 歲年齡組中的檢出率低于其他組（χ2分別為8.769、13.385，P均＜0.05），gp105在＞60 歲年齡組中的檢出率高于其他組（χ2=8.725，P＜0.05）。

表2 不同年齡HIV確證陽性者血清中HIV-1免疫球蛋白抗體檢出結(jié)果

3 討論

HIV 感染的標(biāo)準(zhǔn)檢測方法是檢測HIV 抗體，包括初篩試驗和確證試驗兩部分，近年HIV 初篩檢測試劑不斷更新?lián)Q代，尤其是抗原/抗體檢測的化學(xué)發(fā)光法的廣泛應(yīng)用，進一步提高了試劑的敏感性，但也存在一定程度的假陽性［7］。本研究顯示石家莊地區(qū)在2018—2021年這4年新感染HIV患者的確證陽性率呈下降趨勢，而確證陽性數(shù)呈現(xiàn)逐漸增高趨勢，說明石家莊地區(qū)的HIV感染的初篩檢測技術(shù)的敏感性不斷提高，雖然假陽性率有所增加，但是明顯提高了HIV早期感染的診斷率。

據(jù)2018年《中國艾滋病性病》雜志報道，現(xiàn)存國內(nèi)HIV感染者/艾滋病患者數(shù)量仍十分龐大；最新統(tǒng)計男女比例為4∶1［8］，男性患者數(shù)仍高于女性。與最新數(shù)據(jù)類似，本研究顯示石家莊地區(qū)新增HIV 感染患者中的男性數(shù)遠高于女性，這4年HIV 感染者總的男女比為6.17∶1，且這4年男女比例未顯出統(tǒng)計學(xué)差異。由此可見石家莊地區(qū)新增HIV感染者男性數(shù)量明顯多于女性，且男女比例明顯高于全國統(tǒng)計的比例。有研究顯示男性HIV患者感染多可能與高危性行為在男性中發(fā)生頻率高于女性以及男男性行為的增加有一定聯(lián)系［9］，所以如何減少男性的高危性行為發(fā)生是石家莊地區(qū)預(yù)防措施重要的一環(huán)。另外，本研究結(jié)果顯示石家莊地區(qū)新增HIV 感染者中19～39 歲占46.75%、40～59 歲占38.70%，由此可見石家莊地區(qū)新增HIV 感染者以青壯年為主，這是因為處于本年齡段的人群處于性活躍時期，其發(fā)生危險性行為增加感染風(fēng)險的可能性高于其他年齡層［10］。由以上可見石家莊地區(qū)防治艾滋病的重點人群以青壯年男性為主。

根據(jù)國家艾滋病診斷標(biāo)準(zhǔn)［4］，艾滋病感染者隨疾病發(fā)展進程可劃分成原發(fā)感染期、感染中期和艾滋病期。由于機體感染HIV 的不同階段，含有不同HIV 蛋白抗原，所以產(chǎn)生不同的相應(yīng)抗體，因此WB試驗的條帶結(jié)果也不同。是否出現(xiàn)特定的帶型組合是WB 實驗判定HIV 感染的條件，不同感染時期呈現(xiàn)不同的帶型結(jié)果也是判定HIV不同病理分期的重要標(biāo)準(zhǔn)之一。在HIV 的病毒顆粒中，HIV 結(jié)構(gòu)基因主要有env、pol、gag 3 個編碼區(qū)，每個編碼區(qū)又含有多個蛋白。env 基因編碼的外膜蛋白gp120 和跨膜蛋白gp41 的功能主要是參與病毒與CD4+受體的結(jié)合；pol 基因編碼的逆轉(zhuǎn)錄蛋白p51 和p31 是病毒復(fù)制所需的酶系；gag 基因編碼的衣殼蛋白p24 和內(nèi)膜蛋白p17［11-12］。本研究的結(jié)果表明，抗env 的檢出率最高（gp120 為89.48，gp41 為100.00%），抗pol 基因編碼的抗體檢出率次之（p51 為95.68%，p31 為89.82%）；p24 的檢出率也高達90.90%。這幾項單條帶型的檢出率高，表明其抗原的刺激性比較強，從而使機體產(chǎn)生的相應(yīng)抗體較為穩(wěn)定，因而在石家莊地區(qū)HIV 確證試驗檢測中，gp120、gp41、p51、p31、p24 這5 個帶型是判斷陽性的重要證據(jù)。相關(guān)研究表明，p24 是HIV 感染后最早出現(xiàn)的抗體，是HIV 早期感染的重要信息，p24 的缺失是艾滋病期的重要標(biāo)志［9］，而本地區(qū)90.90% HIV 感染者的標(biāo)本中都檢測到了這一帶型，這提示本研究中新增的HIV 感染者在確證時處于HIV 感染早期，表明石家莊地區(qū)新增HIV 感染者在病毒復(fù)制活躍時被及時發(fā)現(xiàn)，提示石家莊地區(qū)的防控措施是及時有效的?？筫nv 基因編碼的gp105 與gp36 的檢出率低于其余帶型，而gp105 和gp36 的主要作用是用于區(qū)分HIV-1 型與2型，其對于HIV-2型的特異性遠高于HIV-1［13］。本研究結(jié)果均為HIV-1 型，所以這兩個免疫球蛋白抗體的檢測不是本地區(qū)檢測的重點。

有研究顯示不同性別之間免疫球蛋白抗體檢出率有差異，可能和不同地區(qū)人群的遺傳背景之間的差異有關(guān)，也可能和不同性別感染者的傳播途徑有關(guān)系［14］。本研究結(jié)果顯示，在不同性別之間，2018—2021年石家莊地區(qū)HIV 確證陽性者中g(shù)p120、p31、p17 檢出率男性低于女性，gp105 檢出率男性高于女性。

在不同年齡組間，p51、p31、gp105 的檢出率有統(tǒng)計學(xué)差異，p51 在＜18年齡組，19～39 歲組，40～59歲組，＞60歲組中的檢出率分別為84.38%，93.97%，95.84%，94.59%；而p31 在各年齡組間的檢出率分別為75.00%（＜18 歲）、86.94%（19～39 歲）、91.68%（40～59 歲）、89.19%（＞60 歲），p51、p31 是在HIV 復(fù)制過程中所需要的酶類，在大于19歲患者中的檢出率都較高，出現(xiàn)這種情況可能的原因是當(dāng)年齡處于青壯年時，機體免疫力較強，相應(yīng)產(chǎn)生抗體的數(shù)量就較多。＜18 歲的未成年人中這兩種免疫球蛋白抗體的檢出率在這4組中檢出率最低，尤其p31的檢出率明顯低于其他年齡組。這可能與未成年人免疫力低下，在HIV 的早期感染檢測時，p31 抗體還未產(chǎn)生有關(guān)［15］，因此石家莊地區(qū)未成年人進行HIV 確證實驗時出現(xiàn)這兩條帶型缺失而無法確診時，應(yīng)及時隨訪觀察，不要輕易排除而造成漏診。gp105 在各年齡組間的檢出率分別為15.63%（＜18 歲）、13.49%（19～39 歲）、16.64%（40～59 歲）、22.16%（＞60 歲）。在本研究中顯示，其在＞60 歲年齡組中的檢出率較高。單條帶型gp105是HIV-2的特異性帶型之一，本研究中的研究對象隨著年齡的增加，gp105 的檢出率呈增高的趨勢，但是表達的濃度還是明顯低于gp120，所以感染的亞型仍然是HIV-1 型，所以在進行確證實驗結(jié)果的亞型判斷時應(yīng)考慮到這種情況，注意HIV感染亞型的準(zhǔn)確判斷。

總之，石家莊地區(qū)HIV 陽性者主要為青壯年男性，所以石家莊地區(qū)需要針對這類重點人群制定精準(zhǔn)的防治措施，加大這類人群的關(guān)于艾滋病相關(guān)知識宣傳，加強這類人群的自我防護意識。gp120、gp41、p51、p31、p24 是石家莊地區(qū)HIV 陽性患者的確證試驗檢測中的重要證據(jù)。了解艾滋病確診流程，促使更多有高危性行為的人群盡早進行檢測，同時不斷對檢驗人員進行培訓(xùn)，了解石家莊地區(qū)HIV確證實驗的特點，以便準(zhǔn)確判斷是否感染HIV，減少HIV 的早期漏診，使HIV 感染者能早發(fā)現(xiàn)早預(yù)防，以促進本地區(qū)艾滋病的防控及治療。