血清IgE、IL-10、TNF-α水平在分泌性中耳炎患兒早期診斷和病情評估中的應(yīng)用價值

王定松，馬善春*，雷小平，連 剛，梁雪梅

(成都醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院·成都市郫都區(qū)人民醫(yī)院 1.耳鼻咽喉頭頸外科；2.泌尿外科，四川 成都610000)

分泌性中耳炎(SOM)在成人與兒童中均可發(fā)病，但兒童發(fā)病率較高，診斷較為困難，進而導(dǎo)致漏診率較高[1-2]。近年來，隨著臨床對于SOM發(fā)病機制的深入研究，已有學(xué)者證實中耳積液中存在腫瘤壞死因子(TNF)-α，白介素-10(IL-10)，免疫球蛋白E(IgE)[3-5]。目前臨床對于上述細胞因子的研究多集中于成人SOM患者，關(guān)于兒童的研究較少。本研究旨在探討血清IgE、IL-10、TNF-α水平在SOM患兒早期診斷和病情評估中的應(yīng)用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇成都醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院2017年7月-2020年9月收治的103例SOM患兒作為研究組，納入標準：①符合SOM診斷標準[6]；②均在本院接受治療；③患兒臨床資料完整；④患兒家屬對本研究知情同意。排除標準：①合并變應(yīng)性鼻炎、哮喘等影響免疫功能疾病；②合并惡性腫瘤者；③存在中耳占位、鼻咽部占位等疾病；④近3個月內(nèi)存在抗生素或激素類藥物使用史。另選擇同期體檢的87例健康兒童作為對照組。研究組男63例，女40例；年齡3-13歲，平均(6.43±1.27)歲；病情程度：急性41例，亞急性33例，慢性29例。對照組男51例，女36例；年齡3-12歲，平均(6.28±1.35)歲。兩組研究對象一般資料比較無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法根據(jù)SOM患兒病因進行治療，其中上呼吸道感染患兒根據(jù)感染原因?qū)ΠY治療，細菌感染患兒給予抗菌、消炎治療，病毒感染患兒給予抗病毒治療，腺樣體肥大或保守治療無效患兒給予腺樣體切除手術(shù)治療。分別抽取研究組(治療前后)和對照組(體檢當日)兒童空腹靜脈血，以3 000 r/min的速度離心10 min，取上層清液，于-20℃冷凍保存。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清IgE、IL-10、TNF-α水平，具體方法：根據(jù)說明配制各種所需試劑，從平衡至室溫的密封袋中取出所需的板條，除空白孔外，分別將不同濃度標準品加入相應(yīng)孔中，100 μl/孔；將標準品/標準稀釋液按1:5稀釋，加入相應(yīng)孔中，100 μl/孔，封孔板，37℃溫箱孵育90 min；洗板4次，加入酶標抗體工作液100 μl/孔，37℃孵育60 min；洗板4次，加入顯色劑100 μl/孔，避光顯色15-20 min；加入終止液100 μl/孔，混勻后測量OD45值。

2 結(jié)果

2.1 兩組患兒血清IgE、IL-10、TNF-α水平比較研究組患兒血清IgE、IL-10、TNF-α水均顯著高于對照組(P<0.05)，見表1。

表1 兩組患兒血清IgE、IL-10、TNF-α水平比較

2.2 血清IgE、IL-10、TNF-α水平對SOM的診斷價值血清IgE、IL-10、TNF-α水平三者聯(lián)合診斷SOM的曲線下面積(AUC)、敏感度均顯著高于單一指標診斷(P<0.05),見表2和圖1。

表2 血清IgE、IL-10、TNF-α水平對SOM的診斷價值

2.3 不同病程患兒血清IgE、IL-10、TNF-α水平比較急性SOM患兒血清IgE、IL-10、TNF-α水平顯著低于亞急性和慢性患兒，而亞急性患兒上述血清指標均顯著低于慢性患兒(P<0.05),見表3。

2.4 血清IgE、IL-10、TNF-α水平與疾病病程相關(guān)性血清IgE、IL-10、TNF-α水平均與疾病病程呈正相關(guān)(P<0.05),見表4。

表3 不同病程患兒血清IgE、IL-10、TNF-α水平比較

圖1 血清IgE、IL-10、TNF-α水平對SOM的診斷ROC曲線

表4 血清IgE、IL-10、TNF-α水平與疾病病程相關(guān)性

2.5 研究組治療前后血清IgE、IL-10、TNF-α水平比較與治療前比較，研究組患兒IgE、IL-10、TNF-α水平均顯著降低(P<0.05),見表5。

表5 研究組治療前后血清IgE、IL-10、TNF-α水平比較

3 討論

SOM若可在疾病早期及時診斷和治療，則預(yù)后較好[7]。有研究顯示SOM患者血清IgE、IL-10、TNF-α水平存在顯著升高[8-9]。本研究對SOM患兒進行血液分析，結(jié)果顯示研究組患兒血清IgE、IL-10、TNF-α水平均顯著高于對照組，提示SOM患兒也存在血清IgE、IL-10、TNF-α水平異常升高。分析其原因，中耳黏膜經(jīng)抗原刺激后，可產(chǎn)生免疫應(yīng)答[10]。而IgE主要由消化道、呼吸道黏膜細胞產(chǎn)生，在正常兒童血液中含量較低，但SOM的發(fā)生會促使機體受疾病刺激，從而使IgE蛋白大量生成，并與免疫細胞膜表面的受體結(jié)合作用，產(chǎn)生免疫應(yīng)答。TNF-α作為炎癥介質(zhì)，在感染等因素作用下，可促使SOM患兒機體免疫活性細胞增加，釋放TNF-α等細胞因子，促使機體血清TNF-α水平迅速升高；而IL-10作為免疫調(diào)節(jié)細胞因子以及抗炎因子，在SOM發(fā)生過程中，會大量釋放來調(diào)節(jié)機體炎癥反應(yīng)以及免疫功能[11]。本研究在既往研究基礎(chǔ)上，進一步通過ROC曲線分析其臨床意義，結(jié)果顯示血清IgE、IL-10、TNF-α水平三者聯(lián)合診斷SOM的AUC、敏感度均顯著高于單一指標診斷，因此三者聯(lián)合的診斷效能更高，這也是本研究的創(chuàng)新之處。

本研究通過Spearman相關(guān)性分析顯示，提示血清IgE、IL-10、TNF-α水平越高，患兒病程越長。既在SOM患兒疾病早期，TNF-α水平升高可促進發(fā)病部位以及全身免疫系統(tǒng)的免疫應(yīng)答，其機制可能與激活PMN介導(dǎo)過度炎癥反應(yīng)、誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細胞黏附分子的過度表達、促進炎癥介質(zhì)產(chǎn)生等有關(guān)[12]。而IL-10通過下調(diào)Th1/2細胞介導(dǎo)的免疫炎癥反應(yīng)等機制對上述促炎作用產(chǎn)生拮抗作用。當這種調(diào)節(jié)失衡時，會促使炎癥反應(yīng)進入慢性過程，并通過血液等途徑擴展至全身，進而加重中耳部位的炎癥損傷。此外，本研究還顯示研究組患兒IgE、IL-10、TNF-α水平治療后較治療前顯著降低，可能與經(jīng)過治療后患兒炎癥反應(yīng)的消失有關(guān)。

綜上所述，血清IgE、IL-10、TNF-α水平在SOM患兒中血液中呈高表達，其水平變化與患兒的病程、轉(zhuǎn)歸相關(guān)。臨床檢測血清血清IgE、IL-10、TNF-α水平可為兒童SOM的診斷治療提供參考。