地榆皂苷Ⅰ對膿毒癥大鼠急性肺損傷的保護作用及機制研究 Δ

包代琴 ，劉奕言 ，張紫森 ，佘漢 ，譚磊 ，李濤 ，毛慶祥 ，劉良明 （.陸軍特色醫(yī)學(xué)中心麻醉科，重慶 40004；.陸軍特色醫(yī)學(xué)中心野戰(zhàn)外科研究部戰(zhàn)傷休克與輸血研究室/創(chuàng)傷、燒傷與復(fù)合傷國家重點實驗室，重慶 40004）

膿毒癥是由機體對感染反應(yīng)失調(diào)引起的危及生命的器官功能障礙[1]。肺是膿毒癥后易受損的靶器官之一，在病程早期便可出現(xiàn)嚴重的急性肺損傷，這是導(dǎo)致組織缺血、缺氧，進而誘發(fā)多器官功能障礙甚至衰竭的重要原因[2]。目前臨床缺乏針對膿毒癥肺損傷的保護措施，研究肺損傷的防治措施對膿毒癥的救治具有重要意義。

地榆是薔薇科植物地榆Sanguisorba officinalisL.的干燥根，為我國傳統(tǒng)中藥，具有廣泛的藥用價值，其化學(xué)成分豐富，包含酚類、黃酮類、三萜類等多種化學(xué)成分，具有涼血止血、解毒斂瘡及抗菌等多種功效[3]。地榆皂苷屬于地榆三萜皂苷類化合物，根據(jù)化學(xué)結(jié)構(gòu)式的不同分為地榆皂苷Ⅰ和地榆皂苷Ⅱ[4]。研究發(fā)現(xiàn)，地榆皂苷Ⅰ因其抗氧化、抗病毒、抗出血和抗腫瘤等特性在多種疾病中均發(fā)揮重要作用[5―6]。近年來針對皂苷類的研究發(fā)現(xiàn)，地榆皂苷Ⅰ作為潛在的藥物活性物質(zhì)，具有刺激免疫細胞增殖和細胞因子分泌的功能[7]；其因具有抗氧化和下調(diào)炎癥介質(zhì)白細胞介素1β（interleukin 1 beta，IL?1β）和基質(zhì)金屬蛋白酶 2（matrix metalloproteinase 2，MMP?2）轉(zhuǎn)錄水平的作用，而被用于美容類抗皺產(chǎn)品[8]。此外，地榆皂苷Ⅰ還能誘導(dǎo)基因P53介導(dǎo)的G2/M細胞周期阻滯和細胞凋亡，從而抑制乳腺癌細胞增殖[9]。然而，地榆皂苷Ⅰ對膿毒癥后急性肺損傷是否有保護作用，目前尚不清楚。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)是運用生物信息學(xué)的方法，通過對藥物與基因、蛋白質(zhì)?蛋白質(zhì)互作（protein?protein in‐teraction）數(shù)據(jù)進行集成分析，從而指導(dǎo)研究者更好地對中藥單體治療疾病的具體機制進行研究。因此，本研究運用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的方法來預(yù)測地榆皂苷Ⅰ治療膿毒癥的潛在靶點，并通過盲腸結(jié)扎穿孔（cecum ligation and puncture，CLP）術(shù)建立膿毒癥大鼠模型，驗證地榆皂苷Ⅰ對膿毒癥大鼠急性肺損傷的保護作用及機制。

1 材料

1.1 實驗動物

健康成年SD大鼠192只，雌雄各半，體質(zhì)量（200±20） g，由陸軍特色醫(yī)學(xué)中心實驗動物中心提供，實驗動物生產(chǎn)許可證號：SCXK（渝）20170002，使用許可證號：SYXK（渝）20170002。大鼠自由飲食，實驗前禁食12 h。

1.2 主要藥物與試劑

地榆皂苷Ⅰ（批號D?022，純度98%）購自成都瑞芬思生物科技有限公司；伊文思藍（貨號E2129）購自美國Sigma公司；腫瘤壞死因子 α（tumor necrosis factor?α，TNF?α）、IL?6酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）試劑盒（貨號分別為E?EL?R2856c、E?EL?R0015c）均購自武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司；兔源緊密連接蛋白1（tight junction protein 1，ZO?1）抗體、兔源血管內(nèi)皮鈣黏蛋白（vascular endothelial cadherin，VE?cadherin）抗體（貨號分別為ab190085、ab231227）均購自英國Abcam公司；山羊抗兔IgG二抗（貨號DkxGt?003?ERHOX）購自美國LI?COR公司；戊巴比妥鈉（貨號57?33?0）購自上海依赫生物有限公司；林格氏液（貨號RYX010）購自青島捷世康生物科技有限公司；多巴胺、頭孢呋辛鈉（貨號分別為M62581?20MG、C3747?1G）均購自上海璧合生化科技有限公司；蘇木素染液、伊紅染液（貨號分別為H69840、AG1100）均購自上海吉至生化科技有限公司；β?肌動蛋白抗體（β?actin，貨號LM?0061R）購自上海聯(lián)邁生物工程有限公司。

1.3 主要儀器

Allegra 64R型高速冷凍離心機購自美國Beckman Coulter公司；Odyssey型雙色紅外線激光成像系統(tǒng)購自美國LI?COR公司；spark型多功能微孔板檢測儀購自奧地利Tecan公司；BV51W1型微循環(huán)顯微鏡購自日本Olympus公司；GEM3500型全自動血氣分析儀（貨號GEM3500）購自上海朗逸醫(yī)療器械有限公司。

2 方法

2.1 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析

2.1.1 膿毒癥的靶點篩選 通過PubChem數(shù)據(jù)庫（http：//pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/）搜索地榆皂苷Ⅰ的英文關(guān)鍵詞“ziyuglycoside Ⅰ”，得到其3D結(jié)構(gòu)，導(dǎo)入Swiss?TargetPrediction 數(shù)據(jù)庫（http：//www.swisstargetpredic‐tion.ch/）[10]，得到相關(guān)的預(yù)測靶點。

2.1.2 膿毒癥?地榆皂苷Ⅰ共同靶點篩選 通過Gene Cards數(shù)據(jù)庫（https：//www.genecards.org/）[11]搜索關(guān)鍵詞“膿毒癥”，得到其相關(guān)靶點。通過Venny在線繪圖工具（https：//bioinfogp.cnb.csic.es/tools/venny/index.html）繪制膿毒癥與地榆皂苷Ⅰ的靶點交集圖。

2.1.3 膿毒癥?地榆皂苷Ⅰ靶點的PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建 通過將Venny圖取交集得到的靶點數(shù)據(jù)輸入到String數(shù)據(jù)庫（https：//string?db.org/）[12]，利用Cytoscape 3.7.1軟件繪制PPI網(wǎng)絡(luò)圖[13]。

2.1.4 基因本體功能富集分析和京都基因與基因組百科全書通路富集分析 通過David數(shù)據(jù)庫（https：//david.ncifcrf.gov/）[14]對膿毒癥與地榆皂苷Ⅰ靶點交集進行基因本體（gene ontology，GO）功能富集分析和京都基因與基因組百科全書（Kyoto encyclopedia of genes and ge‐nomes，KEGG）通路富集分析，以P≤0.05進行功能條目和信號通路篩選。

2.2 實驗驗證

2.2.1 分組、造模與給藥 將192只SD大鼠按隨機數(shù)字表法分為4組：假手術(shù)組（Sham組）、膿毒癥組（Sep組）、常規(guī)治療組（CT組）和地榆皂苷Ⅰ治療組（ZgⅠ組），每組48只。本文采用CLP術(shù)制備SD大鼠膿毒癥模型，以30 mg/kg戊巴比妥鈉經(jīng)腹腔進行麻醉，大鼠對針刺感無反應(yīng)后，將其置于綁鼠板，沿腹中線剪開皮膚約2 cm。Sham組只進行探查操作，不進行盲腸結(jié)扎和穿孔。Sep組、CT組、ZgⅠ組用無菌鑷探查盲腸后用無菌手術(shù)縫線（4#）于回盲瓣下方近盲腸端1/4處結(jié)扎盲腸，使用20G無菌針頭于盲腸遠端近結(jié)扎處穿孔，此時針頭從進針處貫通盲腸，擠出腸道內(nèi)容物約0.2 mL，按解剖結(jié)構(gòu)將結(jié)扎盲腸與腸道內(nèi)容物一同還納腹腔并用無菌手術(shù)縫線（1#）逐層縫合切口。術(shù)后每組按25 mL/kg劑量腹腔注射無菌生理鹽水。CLP術(shù)后 12 h 插管監(jiān)測大鼠平均動脈壓，當(dāng)平均動脈壓下降30%或以上，認為造模成功[15]。CT組大鼠在CLP術(shù)后12 h經(jīng)股靜脈輸注35 mL/kg林格氏液，同時予以1.75 mg/kg血管活性藥物多巴胺及100 mg/kg抗生素頭孢呋辛鈉。ZgⅠ組大鼠在CLP術(shù)前1 h經(jīng)鼠尾靜脈注射10 mg/kg地榆皂苷Ⅰ[實驗前，將100 mg地榆皂苷Ⅰ溶于1 mL 二甲基亞砜（DMSO）得到100 mg/mL地榆皂苷Ⅰ溶液]，術(shù)后12 h在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上股靜脈輸注10 mg/kg地榆皂苷Ⅰ（取地榆皂苷Ⅰ溶液溶于500 μL無菌生理鹽水后經(jīng)尾靜脈注射給藥，保證DMSO最終濃度低于10%，減輕DMSO對動物的毒性）。治療結(jié)束后，結(jié)扎大鼠股靜脈，分層縫合肌肉和皮膚，放回動物房單籠觀察。本實驗劑量依據(jù)均參考前期預(yù)實驗結(jié)果。

2.2.2 大鼠動脈血氣及血清炎癥因子水平檢測 分別采用全自動血氣分析儀和ELISA試劑盒檢測。Sep組大鼠于術(shù)后12 h，Sham組、CT組和ZgⅠ組大鼠于治療結(jié)束后3 h，將大鼠麻醉固定，取大鼠腹主動脈血1 mL，檢測動脈氫離子濃度指數(shù)（hydrogen ion concentration，簡稱pH值）、動脈血氧分壓（partial arterial oxygen pressure，PO2）、二氧化碳分壓（partial pressure of carbon dioxide，PCO2）水平。另取大鼠股靜脈血2 mL，室溫下靜置2 h，1 000×g離心10 min，取上層血清，檢測大鼠血清炎癥因子TNF?α、IL?6水平。

2.2.3 肺濕/干質(zhì)量比計算 取材時間同“2.2.2”項下，將大鼠麻醉固定并處死，打開胸腔，取左肺上葉，用濾紙吸干肺組織表面血液，并稱質(zhì)量，而后放置在錫箔紙上。50 ℃烤箱烘干72 h后再次稱質(zhì)量，計算濕/干質(zhì)量比，作為評價肺水腫情況的指標(biāo)。

2.2.4 肺組織病理形態(tài)觀察 采用蘇木素?伊紅（HE）染色。取材時間同“2.2.2”項下，在大鼠吸氣末夾閉并結(jié)扎氣管，使肺充盈，打開胸腔，經(jīng)心臟灌注等滲生理鹽水直至肺組織幾乎不見血色，后用4%多聚甲醛繼續(xù)灌注。取下肺組織，用4%多聚甲醛固定后，石蠟包埋并切片。將肺組織石蠟切片置于60 ℃烤箱，于二甲苯和梯度酒精中脫蠟并水化。蘇木素染細胞核，伊紅染細胞質(zhì)，脫水封片后使用微循環(huán)顯微鏡觀察各組大鼠肺組織病理形態(tài)并拍照。

2.2.5 肺血管通透性觀察 采用伊文思藍染色。取材時間同“2.2.2”項下，經(jīng)頸靜脈插管按60 mg/kg劑量注射伊文思藍，注射后30 min沿腹白線打開腹腔，結(jié)扎下腔靜脈，剪開腹主動脈，經(jīng)頸靜脈緩慢灌注50 mL生理鹽水，此時肺組織基本不見血色，取完整肺組織并處死大鼠。用冷PBS漂洗表面血液，濾紙吸干組織表面水分，立即肉眼觀察肺血管通透性并拍照。

2.2.6 肺靜脈ZO?1、VE?cadherin蛋白表達的檢測 采用Western blot法檢測。取材時間同“2.2.2”項下，取肺靜脈組織，提取組織總蛋白。經(jīng)電泳分離蛋白，轉(zhuǎn)膜，脫脂牛奶封閉，孵育ZO?1一抗、VE?cadherin一抗、β?actin一抗（稀釋度分別為1∶1 000、1∶2 000、1∶6 000），4 ℃冰箱過夜。次日TBST洗膜3次，每次5 min，室溫孵育山羊抗兔二抗（稀釋度1∶20 000），采用雙色紅外線激光成像系統(tǒng)曝片。采用Image J軟件分析蛋白條帶灰度值，以目的條帶灰度值與β?actin條帶灰度值的比值表示目的蛋白的表達水平。

2.2.7 大鼠72 h存活情況 每組按隨機數(shù)表法隨機選取16只SD大鼠，CLP術(shù)后12 h造模成功開始，記錄大鼠的72 h存活時間，并計算72 h存活率。

2.3 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學(xué)處理。計量資料以±s表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD?t檢驗；存活情況采用Kaplan?Meier生存曲線分析。檢驗水準(zhǔn)α＝0.05。

3 結(jié)果

3.1 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析結(jié)果

3.1.1 地榆皂苷Ⅰ潛在靶點預(yù)測 使用PubChem數(shù)據(jù)庫獲得地榆皂苷Ⅰ的SDF格式化學(xué)結(jié)構(gòu)，導(dǎo)入SwissTarget‐Prediction數(shù)據(jù)庫，篩選得到地榆皂苷Ⅰ靶點共100個，按照概率進行排序，選取排名前10位的基因和靶點，見表1。

表1 地榆皂苷Ⅰ靶點預(yù)測排名前10位的基因和靶點

3.1.2 膿毒癥?地榆皂苷Ⅰ靶點的篩選結(jié)果 從Gene Cards數(shù)據(jù)庫中獲得與膿毒癥相關(guān)的靶點共1 854個。100個地榆皂苷Ⅰ靶點與1 854個膿毒癥相關(guān)靶點篩選出共同靶點47個，為地榆皂苷Ⅰ治療膿毒癥的潛在靶點，詳見圖1A。

3.1.3 膿毒癥?地榆皂苷Ⅰ靶點的PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建結(jié)果 將47個交集靶點導(dǎo)入String數(shù)據(jù)庫，獲得膿毒癥?地榆皂苷Ⅰ靶點PPI網(wǎng)絡(luò)圖，詳見圖1B。結(jié)果顯示，PPI網(wǎng)絡(luò)共包括47個節(jié)點和314條邊，其中節(jié)點平均度為10.6，平均局部聚集系數(shù)為0.558。

圖1 膿毒癥?地榆皂苷Ⅰ靶點網(wǎng)絡(luò)

3.1.4 GO功能富集和KEGG通路富集分析結(jié)果 將地榆皂苷Ⅰ和膿毒癥交集的47個共同靶點通過David數(shù)據(jù)庫進行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析，根據(jù)P≤0.05共篩選出245個GO功能條目和117個KEGG信號通路，詳見圖2。GO功能富集分析結(jié)果顯示，活性氧族代謝正向調(diào)控 （positive regulation of reactive oxygen species metabolic process）、損傷修復(fù)（would healing）、內(nèi)皮細胞增殖調(diào)控（regulation of endothelial cell prolifera‐tion）、細胞激活（cell activation）、血管發(fā)生（blood vessel development）、氧化 應(yīng)激反應(yīng)（response to oxidative stress）等生物學(xué)過程參與其中。KEGG通路富集分析結(jié)果顯示，細胞凋亡（apoptosis）、缺氧誘導(dǎo)因子1信號通路（HIF?1 signaling pathway）、緊密連接（tight junction）等多條信號通路參與其中。根據(jù)以上網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)結(jié)果預(yù)測，地榆皂苷Ⅰ可能通過改善膿毒癥后血管內(nèi)皮細胞間連接、保護肺血管屏障功能，來減輕膿毒癥急性肺損傷。

圖2 地榆皂苷Ⅰ治療膿毒癥的GO功能富集和KEGG通路富集分析圖（排名前10位）

3.2 實驗驗證結(jié)果

3.2.1 大鼠動脈血氣及血清炎癥因子檢測結(jié)果 大鼠動脈血氣檢測結(jié)果顯示，與Sham組比較，Sep組大鼠pH值、PO2水平顯著降低，PCO2水平顯著升高（P＜0.05）；與Sep組比較，CT組大鼠pH值、PO2水平顯著升高，PCO2水平顯著降低（P＜0.05）；與CT組比較，ZgⅠ組大鼠pH值、PO2水平顯著升高，PCO2水平顯著降低（P＜0.05），接近Sham組水平。血清炎癥因子檢測結(jié)果顯示，與Sham組比較，Sep組大鼠血清TNF?α、IL?6水平顯著升高（P＜0.05）；與Sep組比較，CT組大鼠血清IL?6水平顯著降低（P＜0.05）；與CT組比較，ZgⅠ組大鼠血清炎癥因子TNF?α、IL?6水平顯著降低（P＜0.05），接近Sham組水平。結(jié)果見圖3、圖4。

圖3 各組大鼠動脈血氣檢測結(jié)果

圖4 各組大鼠血清炎癥因子檢測結(jié)果

3.2.2 肺濕/干質(zhì)量比計算結(jié)果 與Sham組比較，Sep組大鼠肺濕/干質(zhì)量比顯著升高（P＜0.05）；與Sep組比較，CT組大鼠肺濕/干質(zhì)量比顯著降低（P＜0.05）；與CT組比較，ZgⅠ組大鼠肺濕/干質(zhì)量比顯著降低（P＜0.05），接近Sham組水平。結(jié)果見圖5。

圖5 各組大鼠肺組織濕/干質(zhì)量比結(jié)果

3.2.3 肺組織病理變化結(jié)果 HE染色結(jié)果顯示，Sham組大鼠肺泡輪廓清晰可見，結(jié)構(gòu)完整，肺泡壁厚度正常，未見炎性細胞浸潤；與Sham組比較，Sep組大鼠肺泡出現(xiàn)大范圍破裂，肺泡壁增厚并伴有水腫，有明顯炎性細胞浸潤；與Sep組比較，CT組大鼠肺組織病理結(jié)構(gòu)無明顯改善；與CT組比較，ZgⅠ組大鼠肺泡破裂情況明顯減少，肺泡結(jié)構(gòu)幾乎恢復(fù)正常，肺泡壁厚度降低，炎性細胞浸潤明顯降低。結(jié)果見圖6。

圖6 各組大鼠肺組織病理形態(tài)顯微圖（HE染色，×200）

3.2.4 肺血管通透性觀察結(jié)果 伊文思藍染色結(jié)果顯示，Sham組大鼠肺表面光滑、折光度好，僅有少量藍色斑點，伊文思藍滲漏極少；與Sham組比較，Sep組大鼠肺表面顏色暗淡，有大量伊文思藍滲出，左下肺呈明顯深藍色；與Sep組比較，CT組大鼠肺表面顏色和伊文思藍滲出無明顯改善；與CT組比較，ZgⅠ組大鼠肺表面色澤明顯改善，伊文思藍滲漏點大幅減少，提示地榆皂苷Ⅰ治療可明顯改善膿毒癥大鼠肺血管通透性。結(jié)果見圖7。

圖7 各組大鼠肺組織血管通透性觀察結(jié)果（伊文思藍染色）

3.2.5 肺靜脈ZO?1、VE?cadherin蛋白表達檢測結(jié)果 與Sham組比較，Sep組大鼠肺靜脈ZO?1、VE?cadherin的蛋白表達水平顯著降低（P＜0.05）；與Sep組比較，CT組大鼠肺靜脈ZO?1蛋白表達水平顯著升高（P＜0.05）；與CT組比較，ZgⅠ組大鼠肺靜脈ZO?1、VE?cadherin表達水平顯著升高（P＜0.05），接近Sham組蛋白表達水平。結(jié)果見圖8。

圖8 各組大鼠肺靜脈ZO?1、VE?cadherin蛋白表達結(jié)果

3.2.6 大鼠72 h存活結(jié)果 Sep組大鼠72 h存活率為12.5%（2/16），存活時間較Sham組大鼠顯著縮短（P＜0.05）；CT組大鼠72 h存活率為25.0%（4/16），存活時間與Sep組大鼠比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；ZgⅠ組大鼠72 h存活率為31.2%（5/16），存活時間較CT組大鼠顯著延長（P＜0.05）。結(jié)果見圖9。

圖9 各組大鼠72 h存活率和存活時間結(jié)果

4 討論

膿毒癥是一種由感染引起的生理、病理和生化異常綜合征，嚴重膿毒癥可導(dǎo)致多器官功能障礙綜合征。迄今為止，炎癥誘導(dǎo)的細胞因子激活和大量活性氧簇形成被認為是膿毒癥的主要致病機制[2]。流行病學(xué)調(diào)查顯示，肺被認為是膿毒癥最早累及的器官，約半數(shù)膿毒癥休克患者伴隨急性肺損傷或者急性呼吸窘迫綜合征，其特征是肺部炎癥、肺水腫、低順應(yīng)性和由于肺血管通透性增加引起的肺毛細血管滲漏[16―17]。基于中藥在膿毒癥治療中突出的療效，近年來應(yīng)用中西醫(yī)結(jié)合方法治療膿毒癥相關(guān)肺損傷是我國醫(yī)學(xué)研究的重要課題之一，尋找能有效治療膿毒癥的中藥單體和復(fù)方制劑，成為目前的研究熱點。離體實驗中，研究人員發(fā)現(xiàn)地榆皂苷Ⅰ在發(fā)揮顯著自由基清除能力時（10～50 μg/mL）無細胞毒性，同時還能在轉(zhuǎn)錄水平顯著抑制MMP?1的表達[18―20]。在體實驗中，研究人員發(fā)現(xiàn)含地榆皂苷Ⅰ的護膚霜能顯著拮抗紫外線輻射誘導(dǎo)的裸鼠光老化，且能在轉(zhuǎn)錄水平顯著抑制IL?1β、MMP?2、MMP?9的表達，發(fā)揮減輕炎癥和減慢膠原蛋白降解速率的作用[21]。但目前尚未見地榆皂苷Ⅰ應(yīng)用于膿毒癥治療的研究。

本研究通過構(gòu)建“藥物?靶點?疾病?通路”網(wǎng)絡(luò)模型，結(jié)合GO功能富集分析發(fā)現(xiàn)，活性氧簇代謝正向調(diào)控、損傷修復(fù)、內(nèi)皮細胞增殖調(diào)控、細胞激活、血管發(fā)生、氧化應(yīng)激反應(yīng)等生物學(xué)過程參與其中；再結(jié)合KEGG通路富集分析發(fā)現(xiàn)，在相關(guān)信號通路中，主要有細胞凋亡、緊密連接、缺氧誘導(dǎo)因子1信號通路等多條信號通路參與其中。

血管內(nèi)皮細胞具有多種生理功能，參與機體凝血、免疫、物質(zhì)轉(zhuǎn)運和生物活性物質(zhì)釋放等多項重要的生命活動[22―23]。膿毒癥后血管內(nèi)皮受損，血管滲漏導(dǎo)致血管內(nèi)液體外滲，致使組織水腫和有效循環(huán)量下降，損傷組織和器官功能，并最終發(fā)展為多器官功能障礙[24―25]。因此，血管通透性增加作為膿毒癥重要的病理生理過程，是導(dǎo)致多器官功能損傷和高死亡率的重要原因之一。血管通透性主要與內(nèi)皮細胞屏障完整性相關(guān)聯(lián)，膿毒癥后血管內(nèi)皮緊密連接結(jié)構(gòu)破壞，是導(dǎo)致血管滲漏的主要原因[26]。

本研究網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)結(jié)果預(yù)測，地榆皂苷Ⅰ治療膿毒癥可能與緊密連接、血管功能等有關(guān)。因此，本研究觀察了地榆皂苷Ⅰ對膿毒癥后動物肺血管滲漏及動物存活的影響。與CT組比較，ZgⅠ組大鼠肺血管滲漏明顯改善，肺靜脈緊密連接蛋白ZO?1和鈣黏蛋白VE?cadherin表達顯著恢復(fù)；同時，肺功能接近正常水平，肺病理結(jié)構(gòu)明顯改善，炎癥細胞浸潤明顯減少，肺水腫明顯減輕，血清炎癥因子水平顯著下降，大鼠72 h存活率明顯提高，存活時間顯著延長。

綜上所述，地榆皂苷Ⅰ通過增強緊密連接信號通路，調(diào)控肺血管緊密連接蛋白ZO?1及鈣黏蛋白VE?cadherin表達水平，從而減輕膿毒癥后肺血管滲漏，改善動物存活率，提高存活時間。