miR-122在前列腺癌中的表達(dá)水平與臨床病理特征的相關(guān)性

唐曉梅 楊雅梅 李婷

(1.寶雞市人民醫(yī)院病理科，陜西 寶雞 721000；2.寶雞市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，陜西 寶雞 721000)

前列腺癌常見于中老年男性，是嚴(yán)重影響男性身心健康與生活質(zhì)量的泌尿系惡性腫瘤。前列腺癌發(fā)病早期無特異性癥狀，約70.0%患者在就診時(shí)已處于晚期。病理學(xué)檢查為前列腺癌的診斷金標(biāo)準(zhǔn)，大多在影像學(xué)引導(dǎo)下進(jìn)行侵襲性直腸內(nèi)活組織穿刺，但對(duì)患者具有一定的創(chuàng)傷，且診斷時(shí)間較長(zhǎng)。前列腺癌抗原3(PCA3)是尿液中分離出來的用于前列腺癌早期診斷的的生物標(biāo)志物，在前列腺癌中呈現(xiàn)高表達(dá)狀況，與患者的病理特征與預(yù)后都有一定的安全性，但是診斷的敏感度和特異度有待提高[1]。miRNAs是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)分子，也是長(zhǎng)度為25 nt的單鏈RNA分子，miRNAs可與靶向的mRNA結(jié)合，從而抑制mRNA的表達(dá)，在一定程度上講解mRNA，從而參與調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡、細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化等總體過程[2]。研究[3-4]顯示，miR-122對(duì)前列腺癌的診斷與預(yù)后預(yù)測(cè)可能具有重要價(jià)值。本文主要探討miR-122在前列腺癌中的表達(dá)水平與臨床病理特征的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年7月至2021年3月在本院進(jìn)行前列腺檢查的患者共168例，納入標(biāo)準(zhǔn)：患者主訴為前列腺疾病癥狀(包括血精、血尿、尿頻、排尿困難等；每例患者在病理活檢之前均行影像學(xué)與血清學(xué)檢查，檢查間隔≤1個(gè)月；年齡20～75歲；患者知情同意并簽署知情同意書；檢查前未行放射治療、化療等治療。臨床資料缺失者；合并其他部位惡性腫瘤者；合并嚴(yán)重心肝功能不全者。

1.2方法 采集所有患者的空腹靜脈血3 mL，不抗凝，室溫靜置30 min左右，4 000 r/min 離心10 min，取上層血清儲(chǔ)存于-80℃ 冰箱。采取Trizol法提取血清總RNA(提取試劑盒購自西安天隆公司)，測(cè)定RNA濃度(NanoDrop 2000設(shè)備)，然后進(jìn)行RNA逆轉(zhuǎn)錄。采用qPCR方法檢測(cè)外周血miR-122表達(dá)水平，檢測(cè)設(shè)備購自羅氏公司，檢測(cè)試劑盒購自大連TAKARA公司，以U6作為內(nèi)參，繪制擴(kuò)增曲線，計(jì)算miR-122的的相對(duì)含量。同時(shí)采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)所有患者的血清PCA3含量，試劑盒購自美國(guó)Abcam 公司，檢測(cè)儀器為上海生工公司的STARlet 酶聯(lián)免疫分析儀。

1.3臨床病理特征調(diào)查 調(diào)查所有患者的前列腺體積、收縮壓、舒張壓等一般資料與臨床資料，判定前列腺癌患者的臨床分級(jí)狀況。

2 結(jié) 果

2.1病理結(jié)果 在168例患者中，病理診斷為前列腺癌68例(前列腺癌組，Ⅰ級(jí)38例、Ⅱ級(jí)22例、Ⅲ級(jí)8例)，前列腺增生100例(前列腺增生組)。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 兩組一般資料的比較

2.2miR-122相對(duì)表達(dá)水平 前列腺癌組的miR-122相對(duì)表達(dá)水平、PCA3含量均高于前列腺增生組(P<0.05)，且在不同病理分級(jí)患者中均有差異(F=29.022、19.873，P<0.05)。見表2。

表2 外周血miR-122相對(duì)表達(dá)水平及PCA3含量的比較

2.3相關(guān)性分析 前列腺癌組的Pearson結(jié)果顯示，臨床分級(jí)、PCA3含量與miR-122相對(duì)表達(dá)水平存在正相關(guān)性(r=0.772、0.677，P均=0.000)。

2.4影響因素分析 前列腺癌組COX回歸分析顯示，臨床分級(jí)、PCA3含量均為影響外周血miR-122相對(duì)表達(dá)水平的重要因素(P=0.006、0.013，OR=8.275、3.833，95%CI 1.843～34.022、95%CI1.475～8.551)。

3 討 論

由于各種內(nèi)外在因素的影響，當(dāng)前前列腺疾病患者逐年增多，包括前列腺增生與前列腺癌等。其中前列腺增生患者的治療目的是防治病情進(jìn)展，提高患者的生活質(zhì)量，減輕癥狀。不過由于很多患者伴隨有多種基礎(chǔ)疾病，各項(xiàng)生理功能退化，也伴隨有臟器功能老化，為此容易進(jìn)展到前列腺癌。這部分患者多伴隨有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，失去了再次手術(shù)根治的機(jī)會(huì)，導(dǎo)致患者的5年生存率下降，且生活質(zhì)量不高，為此早期診斷具有重要價(jià)值[5]。臨床應(yīng)用最廣泛的前列腺癌篩查方法為血清前列腺特異抗原和直腸指檢聯(lián)合檢測(cè)，雖應(yīng)用較方便，但是診斷敏感度與特異性有待提高。研究[6]顯示，PCA3是一種與前列腺癌相關(guān)的異常表達(dá)分子標(biāo)志物，可用于判斷前列腺癌患者的病情。本文結(jié)果顯示，前列腺癌組的外周血PCA3含量高于前列腺增生組(P<0.05)，且在不同病理分級(jí)患者中對(duì)比差異也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，表明PCA3可能在前列腺癌的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用。

miRNA是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)，也是調(diào)控基因表達(dá)與表觀遺傳的重要作用因子，其組成長(zhǎng)度為22個(gè)核苷酸左右，主要結(jié)合于靶基因的非翻譯區(qū)，從而參與調(diào)控人體內(nèi)多種細(xì)胞的增殖、凋亡與侵襲等。隨著醫(yī)學(xué)研究的發(fā)展，現(xiàn)代已經(jīng)發(fā)現(xiàn)有超過50余個(gè)miRNAs與前列腺癌的發(fā)生與發(fā)展有一定的相關(guān)性[7-8]。本文結(jié)果顯示，前列腺癌組的miR-122相對(duì)表達(dá)水平高于前列腺增生組(P<0.05)，且在不同病理分級(jí)患者中均有差異(P<0.05)。

多數(shù)前列腺癌患者早期癥狀不明顯，發(fā)現(xiàn)時(shí)已處于中晚期，PCA3水平能較為敏感的反映前列腺癌患者的病情與預(yù)后，但鑒別診斷價(jià)值有待提高。現(xiàn)代研究[9]表明，前列腺疾病的發(fā)生與發(fā)展周期比較長(zhǎng)，特別由前列腺增生向前列腺癌的轉(zhuǎn)化步驟比較多，涉及許多的基因在不同節(jié)點(diǎn)的表達(dá)。在轉(zhuǎn)錄后miRNA翻譯水平對(duì)編碼基因的表達(dá)具有調(diào)控作用，可影響細(xì)胞的分化、增殖及凋亡，從而調(diào)控前列腺癌的預(yù)后。也有學(xué)者采用miRNA表達(dá)基因芯片發(fā)現(xiàn)miRNAs異常表達(dá)是前列腺癌患者的預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，其中相對(duì)miR-21低表達(dá)的患者而言，高表達(dá)的患者具有較短的生化復(fù)發(fā)時(shí)間[10-11]。本文中前列腺癌組的Pearson結(jié)果顯示，臨床分級(jí)、PCA3含量與前列腺癌的miR-122相對(duì)表達(dá)水平存在正相關(guān)性；COX回歸分析顯示臨床分級(jí)、PCA3含量都為影響外周血miR-122相對(duì)表達(dá)水平的重要因素。

綜上所述，miR-122在前列腺癌中呈現(xiàn)高表達(dá)水平，與患者的病理分級(jí)、外周血PCA3含量存在相關(guān)性，可為前列腺癌的臨床診治提供較可靠的客觀學(xué)依據(jù)。