宮頸癌患者OCT4與臨床病理、HPV感染及SCC-Ag水平的關系

梁艷萍，競柏松，張琳

(1.永城市人民醫院 婦科，河南 商丘 476600，2.商丘市第一人民醫院 婦科，河南 商丘 476100)

宮頸癌屬于女性惡性腫瘤疾病中第二位常見的惡性腫瘤，具有復發、癌細胞轉移的特點，影響患者預后[1]。Liu等[2]認為，為了有效提升患者的預后，需找到可截斷癌細胞轉移關鍵分子或者片段。八聚體結合轉錄因子4(octamer-binding transcription factor 4，OCT4)屬于干細胞標志物，可使干細胞異常進行自我繁殖形成腫瘤。研究OCT4基因表達情況，可為宮頸癌診治提供依據。相關研究指出，OCT4的異常表達主要存在于干細胞中，是促進干細胞自我更新、潛能性病變的關鍵因子，其OCT4基因片段在癌細胞組織中表達率顯著高于正常細胞，在結腸癌、乳腺癌、肺癌、膀胱癌等異常高表達[3-4]。為了更好地證明OCT4在干細胞中表達，與宮頸癌細胞密切相關，且與HPV感染關聯，本研究選取永城市人民醫院接受治療的150例宮頸癌患者的包埋腫瘤組織標本作為研究對象，探討宮頸癌中OCT4表達與臨床病理、人乳頭狀瘤病毒(human papilloma virus，HPV)感染及鱗狀細胞癌抗原(squamous cell carcinoma antigen，SCC-Ag)水平的關系。

1 對象與方法

1.1 研究對象選取2018年1月至2021年10月于永城市人民醫院接受治療的150例宮頸癌患者的包埋腫瘤組織標本作為研究對象進行回顧性分析，年齡45～75歲，平均(66.7±7.9)歲，收集患者臨床分期、癌癥類型、分化、淋巴結轉移等相關信息，所有患者未接受任何形式的放化療，臨床診治病理學資料完整。本研究經醫院醫學倫理委員會審批通過。

1.2 檢測方法兔抗OCT4抗體主要是由美國Abcam生物公司提供，采用免疫組織化學檢測試劑盒[基因科技(上海)股份有限公司]進行測試。標本經體積分數為4%的甲醛水溶液固定，石蠟包埋，4 μm厚連續切片，常規免疫組織化學染色(SP法)。兔抗OCT4的工作濃度為1∶100、1∶200，實驗步驟嚴格按照說明書進行。染色強度：不著色、淺黃色、棕黃色、棕褐色分別為0、1、2、3分。陽性細胞百分率：0、 0～<25%、25%～<50%、50%～<75%、75%～100%分別代表0、1、2、3、4分。染色積分>3分為高表達，≤3分為低表達。以鱗狀細胞癌抗原測定試劑盒(蘇州長光華醫生物醫學工程有限公司，國械注準20173400146)化學發光免疫分析法檢測SCC-Ag，檢測方法按說明書進行。參考值設置為1.5 μg·L-1，0.1 μg·L-1為試劑盒靈敏度。免疫組織化學檢測HPV，HPV分型檢測試劑盒購自亞能生物技術(深圳)有限公司，檢測的HPV亞型包括16、18、31、33、35、39、45、51等和5種低危型(6、11、42、43、44)。

1.3 統計學方法采用SPSS 25.0統計軟件進行數據統計分析，計數資料以頻數和百分數(%)表示，組間比較采用χ2檢驗。以P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 一般資料收集和整理所有受試者類型、OCT4表達、組織學分化、臨床分期、淋巴結轉移、HPV陽性、SCC-Ag等資料，描述統計結果。見表1。

表1 一般資料(n=150)

2.2 宮頸癌中OCT4表達與臨床病理的關系OCT4與類型、分期、分化、淋巴結轉移之間差異無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表2 OCT4表達與臨床病理[n(%)]

2.3 OCT4表達與HPV感染及SCC-Ag的關系有無HPV感染的患者OCT4表達對比，差異具有統計學意義(P<0.05)。不同SCC-Ag水平的患者OCT4表達對比，差異具有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 有無HPV感染與OCT4表達的比較[n(%)]

3 討論

OCT4屬于OCT結構基因的一部分，是POU(Pit-Oct-Unc)轉錄因子激活轉錄的結果因子，主要在囊胚細胞核中表達，也在早期胚胎中表達，可維持干細胞的多樣化，促進細胞自我更新[5]。研究指出，通過OCT4可觀察干細胞發展方向，對研究細胞分化、胚胎發育等具有積極作用[6-7]。若OCT4持續性異常表達，促使組織部分細胞保留異常更新能力，無限制擴大和增殖，導致腫瘤的發生。

從本研究中來看，在不同類型的鱗癌、腺癌中OCT4高表達概率為84.62%及90.00%，且與分化程度、分期、淋巴結轉移等密切相關。這均表明OCT4與腫瘤細胞發生發展密不可分。Rasti等[8]研究證明OCT4是維持正常干細胞、腫瘤干細胞的多能性和自我更新特性的關鍵調控基因，它們誘導彼此的表達，調節癌癥進展，并且是腫瘤干細胞生物標記。Simmet等[9]通過小鼠實驗指出，OCT4是維持囊胚內細胞團中Nanog 陽性外胚層細胞所必需的。國內研究中，李冬雷等[10]從喉癌角度指出，OCT4和β-catenin在癌癥組織中均異常表達，協同參與癌癥的發生和發展過程，聯合檢測有助于預測和評估患者預后。譚遙等[11]認為OCT4表達對間充質干細胞干性維持能力具有積極影響。這表示OCT4可以替代Nanog成為干細胞的標志物，用于臨床診治和預后。綜合以上種種，OCT4可以如Nanog一般成為腫瘤干細胞的生物標志物。

相關研究指出，HPV感染與宮頸癌的發生密切相關[12]。本研究中，鱗癌、腺癌不同類型的宮頸癌HPV感染率超過了75%，說明HPV感染參與到宮頸癌發生和發展中。具體原因是HPV感染的病毒可通過侵害宿主細胞，整合基因組，諸如E6、E7等蛋白基因可激活癌細胞基因，抑制抗癌基因和癌細胞凋亡過程，導致癌細胞無限惡性增殖[13-14]。HPV感染與OCT4表達的相關系數為0.796，屬于中度相關，這表示HPV感染與OCT4表達具有顯著的相關關系。HPV感染可能與OCT4蛋白高表達密切相關，OCT4表達越多，HPV感染率隨之增加。Panayiotou等[15]研究顯示，OCT4與HPV E7特異性地在E7蛋白的CR3區域相互作用，并且在C33A細胞和人類永生化角質形成細胞中引入HPV致癌基因會產生OCT4相關的轉錄和表型模式，OCT4與HPV E7物理相互作用，可調節其在HPV+宮頸癌中的活性。Nathansen等[16]認為，OCT4可通過調節同源重組因子PSMC3IP和RAD54L賦予頭頸部鱗狀細胞癌干性和放射抗性。國內研究中，李昌秀等[17]指出，OCT4與宮頸癌的發生發展密不可分，且OCT4高表達與高危型HPV感染相關，兩者可能協同作用于宮頸癌，這為診治提供新的方向。從國內外研究中來看，OCT4作為轉錄的結果因子，可以通過不同基因因子影響HPV感染，進一步作用于宮頸癌。這說明OCT4影響HPV感染的發生率，臨床可用OCT4結合其他物質用于臨床宮頸癌診治和預后，提升治療效率。

SCC-Ag屬于一種內源性絲氨酸蛋白酶抑制劑，是腫瘤TA-4抗原中亞型之一，參與到癌細胞生長、浸潤、轉移當中，是腫瘤生物學標志物之一，尤其是在宮頸癌診斷中，其表達升高程度與腫瘤體積表現呈正相關。王華等[18]指出，OCT4表達與SCC-Ag的水平呈正相關。這與本研究具有一定的相似性，分析OCT4表達與SCC-Ag一致性為0.567，屬于中等一致性，這表明OCT4可替代SCC-Ag用于宮頸癌診斷，也可相互聯合用于臨床診斷，具有較高的醫學價值。國外相關研究指出，SCC-Ag也是預測宮頸癌預后的有用指標[19]。本研究中，OCT4于宮頸癌各項臨床指標中并無統計學意義，這說明該指標并不會因不同類型、不同分化程度等而產生差異。國內外相關于OCT4表達與SCC-Ag表達之間的運作機制的研究并不多見，但是兩者之間的正相關關系較為明確。這說明SCC-Ag增加，OCT4表達上升，宮頸癌程度上升，反之亦然，為此，臨床中應高度重視OCT4表達異常情況，為臨床診治宮頸癌提供借鑒。

綜上所述，宮頸癌患者中，OCT4表達在不同臨床病理中無差異，與HPV感染及SCC-Ag的表達存在顯著的關聯性。