hs-CRP、IL-6和WBC檢測(cè)對(duì)小兒呼吸道病毒感染的診斷價(jià)值

隗曉華 李文斌 高鴻博 王艷飛 曹燕玲 劉振奎

小兒呼吸系統(tǒng)感染是兒科較常見(jiàn)疾病，分為上下呼吸道感染，上呼吸道感染主要由病毒感染導(dǎo)致，占80%左右，少部分患兒為細(xì)菌感染或支原體、衣原體等并病原體感染，下呼吸道感染主要是細(xì)菌、病毒感染引起[1]。小兒呼吸道病毒感染診斷主要依據(jù)為病原體，但病原體檢測(cè)相對(duì)繁瑣，檢測(cè)速度較慢，不利于早期診斷，延誤治療時(shí)間。研究證實(shí)，炎性因子在小兒呼吸道病毒感染疾病進(jìn)展中發(fā)揮重要作用，超敏C-反應(yīng)蛋白(hypersensitive C-reactive protein，hs-CRP)是血漿中的一種C-反應(yīng)蛋白，由肝臟合成，是一種全身性炎性反應(yīng)急性期的非特異性標(biāo)志物，對(duì)小兒呼吸道病毒感染具有一定診斷價(jià)值；白細(xì)胞介素-6(Interleukin-6，IL-6)是趨化家族的一種細(xì)胞因子，由白細(xì)胞(white blood cell，WBC)產(chǎn)生，在WBC間隙發(fā)揮作用，當(dāng)機(jī)體發(fā)生炎性感染、免疫反應(yīng)時(shí)，IL-6水平顯著升高；WBC是一類無(wú)色、球形、有核的血細(xì)胞，當(dāng)機(jī)體發(fā)生感染、炎性時(shí)，其水平顯著上升[2，3]。本研究通過(guò)對(duì)我院呼吸道病毒感染患兒行hs-CRP、IL-6、WBC檢測(cè)，探討對(duì)小兒呼吸道病毒感染的診斷價(jià)值，報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 回顧性分析我院2020年9月至2022年2月收治的50例呼吸道病毒感染患兒為研究對(duì)象(病毒感染組)，其中男30例，女20例；年齡5個(gè)月～8歲，平均年齡(4.36±0.22)歲;病程2～8 d，平均病程(6.12±0.25)d；另選50例同期健康兒童為對(duì)照組，男28例，女22例；年齡6個(gè)月～8歲，平均年齡(4.42±0.24)歲。2組兒童基本資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。本研究經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn)：①參照《急慢性咽炎》[4]、《實(shí)用小兒呼吸病學(xué)》(第2版)[5]呼吸道疾病、支氣管、肺部感染等診斷標(biāo)準(zhǔn)，患兒有頭痛、發(fā)熱、咳嗽、咳痰、呼吸困難等癥狀；② 2組兒童家屬知曉并同意本研究。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn)：①存在先天性心臟病和(或)嚴(yán)重肝腎等重要臟器疾病者；②存在肺部器質(zhì)性病變者；③伴凝血功能障礙者；④存在惡性腫瘤性疾病者；⑤免疫功能較正常同齡兒低下或缺陷者；⑥于研究開(kāi)始2周內(nèi)進(jìn)行過(guò)抗感染治療且無(wú)法配合靜脈采血者。

1.3 方法 取患兒空腹血3 ml，以3 500 r/min離心10 min分離血清。

1.3.1 降鈣素原(PCT)檢測(cè)：采用電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測(cè)。

1.3.2 血清淀粉樣蛋白A(SAA)檢測(cè)：采用干式熒光免疫分析儀AFS2000A設(shè)備檢測(cè)，試劑盒為南京諾唯贊醫(yī)療科技有限公司。

1.3.3 WBC檢測(cè)：使用電阻抗法檢測(cè)WBC水平。

1.3.4 hs-CRP檢測(cè)：采用韓國(guó)Boditech Med inc公司生產(chǎn)i-CHROMA Reader免疫熒光分析儀檢測(cè)。

1.3.5 IL-6檢測(cè)：取上清，采用上海紀(jì)寧IL-6檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫法)檢測(cè)，將試劑盒取出后恢復(fù)至室溫，設(shè)置待測(cè)樣本、陰性對(duì)照、標(biāo)準(zhǔn)品，洗板3次加入100 μl酶標(biāo)本，在37 ℃溫育1 h后棄去液體，甩干，加入洗滌液，靜置30 s后棄去液體，反復(fù)5次，拍干，加入顯色劑A 50 μl，顯色劑B 50 μl，混勻后在37 ℃避光顯色10 min，加入終止液50 μl，混勻后在450 nm下測(cè)定各孔吸光度數(shù)值，在白色背景下觀察顯色情況，陽(yáng)性為藍(lán)色，陰性為無(wú)色。

1.3.6 D二聚體檢測(cè)：采集的靜脈血加入枸櫞酸鈉抗凝，分離血漿，采用上海初態(tài)生物的人D二聚體ELISA試劑盒檢測(cè)，將試劑盒取出后恢復(fù)到室溫，設(shè)置測(cè)樣本、陰性對(duì)照、標(biāo)準(zhǔn)品孔，樣本稀釋液40 ml，每孔加100 ml辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的檢測(cè)抗原，在37℃溫育1 h后棄去液體，甩干，加入洗滌液，靜置1 min后棄去液體，反復(fù)5次，拍干，每孔加顯色劑A 50 ml，顯色劑B 50 ml，混勻后在37℃避光顯色15 min，加入終止液50 ml，在450 nm下測(cè)定各孔吸光度數(shù)值，計(jì)算濃度。

1.4 觀察指標(biāo)

1.4.1 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)：比較2組兒童hs-CRP、IL-6、D-二聚體、PCT、SAA、WBC水平。

1.4.2 2組一般資料比較，包括性別、年齡、出生方式、居住地、早產(chǎn)史、有無(wú)哮喘史、用力肺活量、第1秒用力呼氣容積，并采用安徽FGC-A+肺功能測(cè)試儀檢測(cè)用力肺活量、第1秒用力呼氣容積。

1.4.3 Logstic多因素分析:影響小兒呼吸道病毒感染的危險(xiǎn)因素。

1.4.4 ROC曲線：分析hs-CRP、IL-6、D-二聚體及聯(lián)合檢測(cè)小兒呼吸道病毒感染的診斷價(jià)值并繪制ROC曲線圖。

2 結(jié)果

2.1 2組一般資料比較 病毒感染組居住農(nóng)村、有早產(chǎn)史、哮喘史、吸二手煙、多次使用抗菌藥物占比顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。2組間性別比、年齡、出生方式、用力肺活量、第1秒用力呼氣容積無(wú)差異(P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1 2組一般資料比較 n=50，例(%)

2.2 2組兒童hs-CRP、IL-6、D二聚體、PCT、WBC、SAA水平比較 病毒感染組hs-CRP、IL-6、D二聚體、PCT、WBC、SAA水平顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 2組兒童hs-CRP、IL-6、D二聚體、PCT、WBC、SAA水平比較

2.3 小兒呼吸道病毒感染的Logstic多因素分析 以小兒呼吸道病毒感染為因變量，以小兒一般資料里存在差異因素和IL-6、D二聚體、PCT、WBC、SAA為自變量進(jìn)行二元Logstic回歸分析，結(jié)果顯示，hs-CRP、IL-6、WBC水平升高、居住農(nóng)村、有早產(chǎn)史及哮喘史是小兒呼吸道病毒感染的危險(xiǎn)因素(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 小兒呼吸道病毒感染的logstic多因素分析

2.4 hs-CRP、IL-6、WBC及聯(lián)合診斷價(jià)值分析 hs-CRP、IL-6、WBC及聯(lián)合診斷小兒呼吸道病毒感染的曲線下面積AUC分別為0.644、0.885、0.617、0.923，聯(lián)合診斷AUC顯著高于單獨(dú)檢測(cè)(P<0.05)敏感度分別為92.0%、84.0%、58.0%、94.0%；特異度分別為54.0%、80.0%、74.0%、82.0%。見(jiàn)表4，圖1。

圖1 hs-CRP、IL-6、WBC及聯(lián)合診斷小兒呼吸道病毒感染的ROC曲線圖

表4 hs-CRP、IL-6、WBC及聯(lián)合診斷小兒呼吸道病毒感染的效能分析

3 討論

呼吸系統(tǒng)是一個(gè)開(kāi)放性系統(tǒng)，直接與外界相連，環(huán)境、細(xì)菌、病毒等均可導(dǎo)致機(jī)體全身或呼吸系統(tǒng)局部防御功能降低，引發(fā)呼吸系統(tǒng)感染[6]。小兒呼吸道由于氣管、支氣管發(fā)育尚未成熟，相對(duì)狹窄，且黏膜血管較豐富，黏液腺分泌不足，黏液形成較少，同時(shí)呼吸道纖毛運(yùn)動(dòng)、清除能力較差，肺泡面積和數(shù)量較少，因而免疫力降低時(shí)，易發(fā)生呼吸道感染，誘發(fā)缺氧，長(zhǎng)期進(jìn)展演化為肺部感染，流行病學(xué)研究結(jié)果表明，兒童感性疾病發(fā)病率占小兒疾病高達(dá)40%[7]。肺部感染主要為肺實(shí)質(zhì)和間質(zhì)感染，由細(xì)菌、病毒感染引發(fā)，主要以肺炎形式出現(xiàn)，治療不及時(shí)，極有可能引發(fā)心力衰竭、敗血癥等疾病，嚴(yán)重威脅患兒生命安全。

小兒急性上呼吸道感染最為常見(jiàn)，在住院的患兒中，上、下呼吸道感染占所有感染60%以上，多數(shù)為肺炎，也是我國(guó)<5歲兒童第1位死亡原因[8]。 因此，對(duì)小兒呼吸道病毒感染性早期明確診斷，針對(duì)性治療，對(duì)改善患兒預(yù)后極為重要。hs-CRP是機(jī)體受到細(xì)菌、病毒等微生物入侵或機(jī)體組織受損后，由肝細(xì)胞分泌合成的蛋白，可識(shí)別侵入體內(nèi)病原體及損傷細(xì)胞磷脂，激活補(bǔ)體系統(tǒng)，清除體內(nèi)反應(yīng)原。研究表示，當(dāng)機(jī)體感染時(shí)，hs-CRP水平會(huì)明顯升高，炎性反應(yīng)結(jié)束后，迅速降低，常作為特異性炎性反應(yīng)標(biāo)志物[9]。IL-6能加速炎性反應(yīng)，對(duì)組織、器官具有一定損害，機(jī)體正常情況下，血液中IL-6含量較低，呼吸道感染后，IL-6水平快速升高，IL-6參與急性期炎性反應(yīng)，激活炎性細(xì)胞，進(jìn)而參與C-反應(yīng)蛋白的合成，加速炎性反應(yīng)[10]。D-二聚體是最簡(jiǎn)單交聯(lián)纖維蛋白降解產(chǎn)物，為繼發(fā)性纖溶特有代謝物，作為凝血常規(guī)的重要監(jiān)測(cè)指標(biāo)，其水平高低可反映機(jī)體是否處于高凝狀態(tài)[11]。楊志梅[12]認(rèn)為，D-二聚體作為診斷小兒肺部感染性疾病的指標(biāo)，隨著機(jī)體炎性反應(yīng)被抑制，抗凝系統(tǒng)恢復(fù)，D-二聚體水平逐漸恢復(fù)正常水平，可幫助醫(yī)師診斷疾病和判斷預(yù)后。PCT含有116個(gè)氨基酸，屬于一種降鈣素前肽物質(zhì)，主要由甲狀腺分泌而來(lái)，健康人體中PCT分泌較少，血清含量較低，一旦出現(xiàn)細(xì)菌感染、膿毒癥時(shí)，PCT水平顯著上升，但發(fā)生病毒感染或自身免疫性疾病時(shí)，其水平升高不顯著，因此，常作為臨床細(xì)菌感染與病毒感染鑒別的重要指標(biāo)。血常規(guī)檢查是小兒呼吸道感染疾病的基本檢查項(xiàng)目，其中WBC及其各項(xiàng)分類比例為鑒別感染類型的常規(guī)指標(biāo)，但由于個(gè)體血液中WBC基礎(chǔ)值差異較大，且WBC基礎(chǔ)值易受各種因素影響，因此，單獨(dú)采用WBC用于小兒呼吸道病毒感染的診斷靈敏度和特異度較差，難以提供足夠價(jià)值信息。SAA為一類經(jīng)肝臟所產(chǎn)生的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，主要表達(dá)于泡沫細(xì)胞、肝細(xì)胞及脂肪細(xì)胞中，正常情況下，在血清中含量極低，當(dāng)機(jī)體發(fā)生細(xì)菌或病毒感染時(shí)，水平顯著上升，甚至達(dá)到正常水平100倍左右[13]。

本研究結(jié)果顯示，呼吸道病毒感染患兒hs-CRP、IL-6、D二聚體、PCT、WBC、SAA二聚體水平顯著升高，表明感染患兒體內(nèi)炎性反應(yīng)加劇。韓菲等[14]研究表示，在小兒呼吸道感染性疾病中，hs-CRP水平較健康兒童高，有利于疾病的早期診斷；梁結(jié)玲等[15]研究證實(shí)，機(jī)體發(fā)生細(xì)菌感染，原本極低微量的hs-CRP含量會(huì)提高數(shù)十倍，但被病毒感染時(shí)，敏感度較弱，病毒感染患兒水平顯著低于細(xì)菌感染患兒；霍姝琦[16]研究發(fā)現(xiàn)細(xì)菌感染患兒IL-6水平顯著高于病毒感染患者和健康兒童，IL-6可評(píng)估呼吸道感染患兒嚴(yán)重程度，預(yù)測(cè)患者短期療效。潘晨等[17]研究表示，感染患兒IL-6水平高于正常健康兒童。宋亞娣等[18]研究發(fā)現(xiàn)，感染患兒IL-6水平較健康兒童高。鄧建忠等[19]在D二聚體檢測(cè)小兒肺部感染相關(guān)研究中發(fā)現(xiàn)，在肺部感染患兒中D二聚體水平快速上升，顯著高于健康兒童，認(rèn)為D二聚體可診斷小兒肺部感染疾病，判斷肺部感染疾病類型，為患兒治療提供指導(dǎo)。主要原因?yàn)樾貉什苛馨徒M織較成人豐富，氣管、支氣管腔相對(duì)狹窄，軟骨更軟，缺乏彈性組織，血管豐富，黏液腺分泌不足和纖毛運(yùn)動(dòng)差，極易引起感染，分泌物不易被排出，容易出現(xiàn)缺氧情況，導(dǎo)致血管內(nèi)皮損傷，同時(shí)組織生成大量因子，激活凝血系統(tǒng)，使凝血系統(tǒng)遭受損傷，造成凝血功能障礙，引起高凝血癥。楊愛(ài)國(guó)[20]研究發(fā)現(xiàn)，肺炎患兒D二聚體水平顯著高于健康兒童，主要原因?yàn)閮和尾堪l(fā)育不完全，呼吸道感染后炎性可阻礙機(jī)體通氣、換氣功能，造成機(jī)體缺氧。楊德平[21]研究發(fā)現(xiàn)，SAA在兒童早期細(xì)菌感染、病毒感染患兒體內(nèi)表達(dá)明顯升高。孫志剛等研究表明，呼吸道感染患兒早期SAA水平顯著升高，提示血清SAA及SAA/CRP水平可輔助診斷感染性疾病。杜春梅等[22]將肝素結(jié)合蛋白(HBP)結(jié)合PCT應(yīng)用于小兒呼吸道細(xì)菌感染診斷發(fā)現(xiàn)，呼吸道細(xì)菌感染患兒HBP、PCT顯著上升，HBP、PCT截?cái)嘀捣謩e為13.78 ng/ml、0.13 ng/ml，證實(shí)HBP、PCT可應(yīng)用于小兒呼吸道細(xì)菌感染診斷。張宏燕等[23]研究發(fā)現(xiàn)，呼吸道細(xì)菌感染患兒PCT水平顯著升高，但病毒感染患兒無(wú)顯著變化，主要原因?yàn)镻CT僅應(yīng)答細(xì)菌、真菌、寄生蟲(chóng)感染，對(duì)病毒感染應(yīng)答較弱。柏居林等[24]研究發(fā)現(xiàn)WBC在呼吸道感染患兒體內(nèi)顯著上升。李作潔[25]研究表明，WBC診斷兒童呼吸道病毒感染的AUC為0.537，認(rèn)為其存在一定價(jià)值，但需要輔助其他指標(biāo)綜合判定。以上研究結(jié)果均與本研究一致。

本研究結(jié)果顯示，病毒呼吸道感染患兒中，居住農(nóng)村、有早產(chǎn)史、哮喘史、吸二手煙、多次使用抗菌藥物患兒占比較高，且多因素回歸分析發(fā)現(xiàn)，居住農(nóng)村，有早產(chǎn)史、哮喘史是小兒呼吸道病毒感染的危險(xiǎn)因素。主要原因?yàn)樾汉矸瓷淙?，纖毛運(yùn)動(dòng)功能較為缺乏，容易出現(xiàn)呼吸道感染，其中農(nóng)村兒童生活質(zhì)量相對(duì)較差，微量元素較缺乏，可能存在一些先天性疾病，因此感染風(fēng)險(xiǎn)顯著增加。此外，早產(chǎn)兒可能由于特殊呼吸中樞發(fā)育不成熟，體內(nèi)碳酸分解為二氧化碳數(shù)量減少，出生后不能有效刺激呼吸中樞，肺泡數(shù)量較少，整體呼吸肌發(fā)育不全，出聲后咳嗽反射比較弱，同時(shí)早產(chǎn)兒出生后從母體內(nèi)攜帶抗體較低，易出現(xiàn)呼吸道感染。茆儉等[26]研究認(rèn)為，小兒呼吸道病毒感染一年四季均可發(fā)病，微量元素不足、早產(chǎn)史均是小兒呼吸道感染的危險(xiǎn)因素。王志丹等[27]研究表示，哮喘與感染關(guān)系比較密切，小兒身體抵抗力比較差，哮喘患兒更容易繼發(fā)呼吸道感染。以上研究均與本研究相似。因此，對(duì)于農(nóng)村早產(chǎn)且具有呼吸道病史的患兒需多加關(guān)注，加強(qiáng)健康知識(shí)宣教，給予充足營(yíng)養(yǎng)。

本研究結(jié)果顯示，當(dāng)小兒呼吸道病毒感染時(shí)hs-CRP、IL-6、WBC水平升高，hs-CRP、IL-6、WBC及聯(lián)合診斷小兒呼吸道病毒感染的曲線下面積AUC分別為0.644、0.885、0.617、0.923，診斷敏感度分別為92.0%、84.0%、58.0%、94.0%，特異度分別為92.0%、84.0%、58.0%、94.0%，且聯(lián)合診斷AUC顯著增大。表明三者聯(lián)合檢查可彌補(bǔ)單項(xiàng)檢查的不足，提高診斷效能。李朝輝等[28]研究表示，SAA聯(lián)合hs-CRP診斷價(jià)值更高，對(duì)小兒呼吸道感染性疾病患兒預(yù)后具有一定判定價(jià)值。本研究未對(duì)hs-CRP、IL-6、WBC水平進(jìn)行動(dòng)態(tài)檢測(cè)，這些指標(biāo)對(duì)患兒預(yù)后有無(wú)影響，需進(jìn)一步研究。

綜上所述，在小兒呼吸道病毒感染中，hs-CRP、IL-6、WBC水平呈高表達(dá)，且居住農(nóng)村、有早產(chǎn)史及哮喘史是小兒呼吸道病毒感染的危險(xiǎn)因素，hs-CRP、IL-6、WBC聯(lián)合檢查對(duì)小兒呼吸道病毒感染的診斷價(jià)值較高。