干擾素α1b聯合孟魯司特鈉治療小兒嗜酸性粒細胞支氣管炎的療效及對氧化應激反應、外周血FOXP3 mRNA水平的影響

趙利娟，馬 敏，王學增

1.河南省鄭州瑞祥醫院兒科，河南鄭州 450100；2.河南省第二人民醫院兒科，河南鄭州 450000

嗜酸性粒細胞(Eos)支氣管炎(EB)是引發慢性咳嗽的常見病因之一，是以呼吸道Eos增多為主要病理變化，而患者由于呼吸道梗阻致喘憋，影響患者生活質量[1]。調查結果指出，EB是引起慢性咳嗽的一個重要原因，占慢性咳嗽的10%～30%[2]。既往研究指出，EB和哮喘免疫病理學特征接近[3]。EB對于激素反應較好，吸入性糖皮質激素是2006年美國胸科醫師協會建議的一線治療藥物，多數EB患者經治療后具有良好預后，少數患者在停藥后反復發作[4]。因此仍需尋找更為有效的治療方案。干擾素α1b具有抗病毒、抗細胞增殖、免疫調節等作用[5]，對傳染性單核細胞增多癥等具有良好效果[6]。孟魯司特鈉為白三烯受體拮抗劑，在支氣管炎治療中效果良好[7]。既往研究表明，支氣管炎患兒體內多具有明顯的氧化應激反應，在病情發生、發展中起到重要作用[8]。鑒于此，本研究選取EB患兒128例，分析干擾素α1b聯合孟魯司特鈉的療效及對氧化應激反應的影響，現報道如下。

1 資料和方法

1.1一般資料 選取2019年5月至2021年5月鄭州瑞祥醫院收治的128例EB患兒為研究對象，采用隨機數字表法將患兒分為對照組和觀察組，每組64例。觀察組：男33例，女31例；年齡5～11歲，平均(7.85±1.16)歲；病程8～18 d，平均(13.06±2.09)d。對照組：男29例，女35例；年齡5～11歲，平均(8.03±1.34)歲；病程9～17 d，平均(12.95±1.83)d。兩組一般資料比較，差異均無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

診斷標準：符合《咳嗽的診斷與治療指南：2009版》[9]中的EB診斷標準。納入標準：EB首次發病。排除標準：(1)入組前接受支氣管擴張劑、糖皮質激素等藥物治療；(2)存在嚴重腎肝功能異常；(3)伴消化道病變；(4)過敏體質；(5)中途自愿退出研究；(6)同期接受其他研究。所有患兒家屬對本研究知情同意并簽署知情同意書。本研究通過鄭州瑞祥醫院倫理委員會審核批準。

1.2方法

1.2.1治療方法 所有患兒入院之后均予以吸氧、化痰、止咳等基礎治療。

對照組采用孟魯司特鈉(Merck Sharp & Dohme Ltd，批準文號：國藥準字J20130054)治療，睡前口服，5 毫克/次，1次/日。觀察組采用干擾素α1b(深圳科興藥業有限公司，批準文號：國藥準字S20033035)聯合孟魯司特鈉治療。孟魯司特鈉具體用法同對照組；干擾素α1b進行霧化吸入，2 μg/kg，2次/日。兩組持續用藥2周。

1.2.2觀察指標 (1)對比兩組臨床療效。臨床控制：咳嗽消失，Eos比例恢復正常；顯效：偶有咳嗽，Eos比例恢復正常；有效：咳嗽頻繁，但未影響日常生活，Eos比例接近正常；無效：尚未達到上述標準[10]。總有效率=(總例數-無效例數)/總例數×100%。

(2)對比兩組臨床癥狀消失時間，臨床癥狀包括發熱、咳嗽、咳痰、喘息、哮鳴音。

(3)對比治療前后兩組外周血Eos計數及誘導痰EOS分類。收集所有患兒晨起空腹靜脈血，采用XS-500i型號全自動血液分析儀(日本希森美康)進行Eos計數。所有患者晨起收集痰液前先清水漱口，然后深咳，咳痰到已消毒的培養皿內，將痰液處理后作痰涂片，由專業醫務人員利用光學顯微鏡進行細胞分類。

(4)對比治療前后兩組外周血FOXP3 mRNA水平及T淋巴細胞亞群水平。收集全部研究對象晨起空腹靜脈外周血5 mL，通過ZE5型號流式細胞儀(美國Bio-Rad公司)檢測CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細胞百分比，計算CD4+T淋巴細胞/CD8+T淋巴細胞比值。靜脈血經RNA提取與反轉錄試劑盒反轉錄cDNA第1鏈，采用熒光定量PCR檢測FOXP3 mRNA基因表達，用2-ΔΔCt計算FOXP3 mRNA水平。

(5)對比治療前后兩組外周血氧化應激指標水平。檢測的氧化應激指標包括超氧化物歧化酶(SOD)、總抗氧化能力(T-AOC)、晚期蛋白氧化產物(AOPPs)、脂質過氧化氫(LHP)。收集晨起空腹外周靜脈血5 mL，以3 000 r/min離心5 min，離心半徑12 cm，取血清，采用比色法測定T-AOC水平；采用黃嘌呤氧化酶法測定SOD水平；采用酶聯免疫吸附試驗測定AOPPs、LHP水平。

2 結 果

2.1兩組臨床療效比較 觀察組臨床總有效率(95.31%)高于對照組(79.69%)，差異有統計學意義(χ2=7.143，P=0.008)。見表1。

表1 兩組臨床療效比較[n(%)]

2.2兩組臨床癥狀消失時間比較 觀察組發熱、咳嗽、咳痰、喘息、哮鳴音消失時間均短于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 兩組臨床癥狀消失時間比較

2.3治療前后兩組外周血Eos計數及誘導痰Eos分類比較 治療前兩組外周血Eos計數及誘導痰Eos分類比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。治療后兩組外周血Eos計數及誘導痰Eos分類均較治療前減少(P<0.05)，且治療后觀察組外周血Eos計數及誘導痰Eos分類少于對照組(P<0.05)。見表3。

表3 治療前后兩組外周血Eos計數及誘導痰Eos分類比較

2.4治療前后兩組外周血FOXP3 mRNA水平及T淋巴細胞亞群分析 治療前兩組外周血FOXP3 mRNA水平、CD3+T淋巴細胞百分比、CD4+T淋巴細胞百分比、CD8+T淋巴細胞百分比、CD4+T淋巴細胞/CD8+T淋巴細胞比值相比，差異無統計學意義(P>0.05)。治療后兩組外周血FOXP3 mRNA水平、CD3+T淋巴細胞百分比、CD4+T淋巴細胞百分比、CD4+T淋巴細胞/CD8+T淋巴細胞比值均較治療前升高(P<0.05)，CD8+T淋巴細胞百分比較治療前下降(P<0.05)；且治療后觀察組外周血FOXP3 mRNA水平、CD3+T淋巴細胞百分比、CD4+T淋巴細胞百分比、CD4+T淋巴細胞/CD8+T淋巴細胞比值均高于對照組(P<0.05)，CD8+T淋巴細胞百分比低于對照組(P<0.05)。見表4。

表4 治療前后兩組外周血FOXP3 mRNA水平及T淋巴細胞亞群分析

組別nCD3+ T淋巴細胞百分比(%)治療前治療后FOXP3 mRNA治療前治療后觀察組6445.15±6.3759.78±6.32a2.14±0.314.03±0.75a對照組6446.21±7.0652.42±6.17a2.16±0.333.64±0.53at0.3533.3970.8926.666P0.7240.0010.374<0.001

2.5治療前后兩組外周血氧化應激指標水平比較 治療前兩組外周血SOD、T-AOC、AOPPs、LHP水平相比，差異均無統計學意義(P>0.05)。治療后兩組外周血SOD、T-AOC水平較治療前升高(P<0.05)，且治療后觀察組外周血SOD、T-AOC水平均高于對照組(P<0.05)。治療后兩組外周血AOPPs、LHP水平較治療前降低(P<0.05)，且治療后觀察組外周血AOPPs、LHP水平均低于對照組(P<0.05)。見表5。

表5 治療前后兩組外周血氧化應激指標水平比較

3 討 論

EB是一類以氣道Eos浸潤為特征的非哮喘支氣管炎，2006年被美國《咳嗽的診斷與治療指南》作為獨立疾病納入慢性咳嗽的常見病因。EB病因可能和吸入變應原與接觸職業性過敏原等因素有關，屬于嗜酸性氣道炎癥，臨床表現是特應性干咳、慢性咳嗽等狀況，影響患者日常生活。近幾年，EB發病率呈逐年升高趨勢[11]。臨床上關于EB發病機制尚未闡明，常用糖皮質激素吸入治療，部分患者效果欠佳，故需尋找更為有效的治療方案。

孟魯司特鈉可競爭性結合半胱氨酸受體，下調白三烯活性，起到降低氣道炎癥反應的效果，有利于減輕氣道阻塞，以改善臨床癥狀。干擾素α1b具有免疫調節和廣譜抗病毒等作用，可促進基因產物形成，阻滯DNA及RNA生長、病毒蛋白翻譯，激活巨噬細胞、NK細胞等，增強細胞吞噬能力，提高機體自身抵抗力。干擾素α1b能阻滯Eos、T淋巴細胞，減少炎癥因子釋放與合成，減輕炎癥反應，改善臨床癥狀，且霧化吸入便于痰液稀釋，可快速減輕咳痰癥狀，并增強患兒治療依從性。本研究結果中觀察組臨床總有效率達95.31%，發熱、咳嗽、咳痰、喘息、哮鳴音消失時間明顯縮短，Eos計數及誘導痰Eos分類得到改善，說明干擾素α1b聯合孟魯司特鈉治療可提高治療效果，減輕臨床癥狀。

EB患兒伴細胞免疫功能異常。CD3+T淋巴細胞反映T淋巴細胞總數；CD4+T淋巴細胞越少，細胞免疫應答越差；CD4+T淋巴細胞/CD8+T淋巴細胞比值下降說明細胞免疫功能減弱[12]；CD8+T淋巴細胞殺傷能力因FOXP3 mRNA表達減少而增強[13]。本研究結果顯示，治療后觀察組外周血FOXP3 mRNA水平、CD3+T淋巴細胞百分比、CD4+T淋巴細胞百分比、CD4+T淋巴細胞/CD8+T淋巴細胞比值高于對照組，說明干擾素α1b聯合孟魯司特鈉治療可改善免疫功能，促進病情好轉，原因可能為干擾素α1b存在免疫調節功能。

呼吸道Eos增多后，可導致呼吸道產生炎癥反應，過度釋放脂質過氧化、活性氧，損傷組織細胞，破壞機體內氧化與抗氧化之間的動態平衡，導致患兒產生氧化應激反應；AOPPs與LHP為氧化代謝產物，其水平和氧化應激度呈正比；SOD反映了抗氧化能力，由于疾病機體增加了SOD消耗，使SOD呈低表達[14]。本研究顯示，經干擾素α1b、孟魯司特鈉聯合治療2周后，外周血SOD、T-AOC水平升高，AOPPs、LHP水平下降，說明EB患兒體內氧化應激反應得到改善，其原因可能是干擾素α1b能減少Eos分泌，阻滯炎癥因子分泌，減輕炎癥反應，降低脂質過氧化與活性氧的過度釋放，有利于氧化與抗氧化之間的平衡恢復。

綜上所述，干擾素α1b與孟魯司特鈉聯合治療EB患兒效果顯著，可減輕臨床癥狀，下調Eos計數、痰Eos分類，增強免疫功能，調節氧化應激。