某三甲醫院血小板抗體陽性的影響因素分析

劉 娟，向紅銘，彭海燕△

湖南省常德市第一人民醫院：1.輸血科；2.病案科，湖南常德 415000

血小板輸注是維持血小板減少及血小板功能障礙患者止血的必要療法[1]。然而，反復進行血小板輸注可能會導致同種異體抗體的形成[2]，主要包括血小板相關抗體、血小板特異性抗體及CD36抗體[3]。血小板抗體是導致血小板輸注無效、輸血后紫癜、新生兒同種免疫性血小板減少癥及特發性血小板減少性紫癜的主要原因[4]。因此，血小板抗體檢測對于血小板相關疾病的預防和診斷具有重要意義。目前，紅細胞抗體檢測已成為臨床輸血前的常規檢測項目，但血小板抗體檢測還未得到充分重視。本研究對2017-2021年在本院住院并可能需要輸注血小板的2 229例患者進行血小板抗體檢測，并分析血小板抗體陽性患者的分布情況及影響因素，為臨床提高血小板輸注療效提供參考依據。

1 資料與方法

1.1一般資料 回顧性分析2017年1月1日至2021年12月31日本院2 229例住院患者的血小板抗體檢測結果，其中男1 160例、女1 069例，平均年齡(44±25)歲。納入標準：(1)血小板計數<50×109/L及伴有出血需輸注血小板治療；(2)血小板輸注無效；(3)新生兒免疫性血小板減少；(4)輸注血小板后發生非溶血性輸血反應；(5)患有自身免疫性疾病；(6)不明原因的血小板減少患者。排除標準：病歷資料不完整。本研究已通過本院醫學倫理會批準。

1.2主要儀器與試劑 IH-1000全自動血型分析儀為美國伯樂公司產品；配套所用血型分析稀釋液及血型檢測卡為珠海貝索生物技術有限公司產品；單克隆抗-A、抗-B標準血清為北京金豪制藥股份有限公司產品；抗-D標準血清為英國密理博有限公司產品；血小板抗體檢測反應板、凍干血小板抗體篩檢細胞、低離子強度溶液、抗人IgG抗體、指示紅細胞以及陰、陽性對照為長春博德生物技術有限責任公司產品。TD-3A型血小板專用離心機為長春博研科學儀器有限責任公司產品。

1.3方法

1.3.1血型檢測 采集患者靜脈血2～3 mL置于乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝管中，離心后用IH-1000全自動血型分析儀對標本進行ABO及RhD血型鑒定，有疑問的標本采用試管法復查。

1.3.2血小板抗體檢測 采集患者靜脈血3～5 mL，待血清析出后離心，取上清進行檢測。采用固相凝集法檢測血小板抗體。檢測前將試劑盒平衡至室溫，取凍干血小板抗體篩檢細胞配制血小板懸液；并將洗滌液原液用蒸餾水稀釋至合適濃度配制洗滌工作液，抗體檢測步驟嚴格按照試劑盒使用說明書進行操作。指示紅細胞在微孔底部形成單層判為陽性反應；指示紅細胞只結合到部分孔底判為弱陽性反應；指示紅細胞在微孔中央形成細胞扣判為陰性反應。

2 結 果

2.1住院患者血小板抗體檢測結果分布 2 229例住院患者中，血小板抗體檢測陽性276例，陰性1 953例，陽性率為12.38%。男性患者的血小板抗體陽性率為9.66%，女性患者的血小板抗體陽性率為15.34%，差異有統計學意義(P<0.001)；有輸血史患者的血小板抗體陽性率為15.03%，無輸血史患者的血小板抗體陽性率為11.50%，差異有統計學意義(P<0.05)；不同年齡、不同血型患者的血小板抗體陽性率比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。見表1。

2.2血小板抗體陽性患者的科室分布 血小板抗體陽性患者主要分布在風濕免疫科(41.27%)、呼吸內科(22.22%)、感染科(15.15%)、新生兒科(15.15%)等科室，結果見表2。

表2 血小板抗體陽性患者的科室分布

續表2 血小板抗體陽性患者的科室分布

2.3血小板抗體陽性患者的疾病分布 在疾病分布中，血小板抗體陽性率最高的為系統性紅斑狼瘡，其次為結締組織的其他系統性受累及紫癜和其他出血性情況，結果見表3。

表3 血小板抗體陽性患者的疾病分布

2.4血小板抗體陽性影響因素的多因素分析 本研究中因變量為血小板抗體是否陽性(陰性=0，陽性=1)，自變量為性別(男=0，女=1)、輸血史(無=0，有=1)、各病種(以其他病種為參照)，進行二分類Logistic回歸分析。結果顯示，女性、有輸血史、系統性紅斑狼瘡、結締組織的其他系統性受累、紫癜和其他出血性情況是血小板抗體陽性的危險因素(P<0.05)。見表4。

表4 血小板抗體陽性率影響因素的多因素分析

3 討 論

血小板在生理性止血、血栓形成、維持血管完整性等方面起著重要作用[5]。血小板輸注是一項挽救生命的干預措施。近年來，血小板輸注已被廣泛應用于現代醫療實踐中，用于預防和治療患有血液系統惡性腫瘤、實體瘤、大手術出血、外傷患者的血小板減少性出血，以及更少見的血小板功能障礙綜合征患者[6]。然而，盡管在血小板的生產、儲存和輸血方面已取得了重大進展，輸血反應仍然是一個重大的臨床問題。免疫因素是導致輸血反應的主要原因之一[7]。血小板表面含有多種抗原，包括ABO血型抗原、人類白細胞抗原(HLA)、人類血小板抗原(HPA)和定位于CD36上的Naka抗原[8]。相關研究表明，HLA抗體和HPA抗體的存在是血小板輸注引起各種反應的主要原因，如血小板輸注不應期 (PTR) 和輸血后紫癜(PTP)[9]。因此，早期檢測血小板抗體并在輸血前選擇抗原陰性供體的血小板是臨床預防和應對PTR的主要途徑[10]。

本研究結果顯示，2 229例患者的血小板抗體檢測陽性率為12.38%，稍高于文獻[11]報道的10.62%，這可能與區域、人群分布等因素有關。女性患者的血小板抗體陽性率顯著高于男性，與吳燕等[12]的研究結果較一致。這可能是由于女性的妊娠所致，妊娠是導致血小板抗體陽性的重要因素[13]。另外，本研究多因素Logistic回歸分析結果顯示，有輸血史是血小板抗體陽性的危險因素，這與牛佳萌等[9]的研究結果較一致。由于當前血小板輸注主要采用ABO同型隨機輸注法，避免了ABO系統不合的不良反應，但血小板表面抗原系統多而復雜，除了ABO抗原外，還包括HLA抗原和HPA抗原等，一旦輸注的血液制品與患者抗原存在差異時，易刺激機體產生血小板抗體。此外，袁慧銘等[14]的研究還指出，血小板抗體陽性率與輸血次數之間呈正相關，血小板陽性率會隨著輸血次數的增多而增高。

本研究結果顯示，風濕免疫科為血小板抗體陽性檢測率最高的科室。將血小板抗體陽性患者的疾病種類按ICD-10分類，系統性紅斑狼瘡、結締組織的其他系統性受累以及紫癜和其他出血性情況為血小板抗體陽性的危險因素，其原因可能是患有這幾類疾病的患者自身免疫系統失調，容易產生針對自身血小板相關抗原的抗體，從而導致血小板破壞加劇，血小板計數減少[15]。有研究稱系統性紅斑狼瘡患者除產生血小板抗體外，還可能產生抗磷脂抗體，而抗磷脂抗體又可與血小板結合。因此，系統性紅斑狼瘡中血小板減少癥的機制可能依賴于抗磷脂抗體與血小板抗原抗體之間更復雜的相互作用[16]。此外，本研究發現呼吸內科患者的血小板抗體陽性率也較高，且該科室血小板抗體陽性患者多為肺炎患者，說明機體發生炎癥反應時，也可能會刺激機體產生血小板抗體。有研究在15例新型冠狀病毒感染恢復期擬捐獻血漿者中發現其血小板抗體全部呈陽性，但具體發生機制還需進一步研究[17]。

綜上所述，本研究發現女性、有輸血史、系統性紅斑狼瘡、結締組織的其他系統性受累、紫癜和其他出血性情況是血小板抗體陽性的危險因素，在輸注血小板前應綜合考慮這些因素，盡可能選擇血小板交叉配血相容的獻血者血小板，防止出現輸注無效。