miRNA-383在惡性腫瘤中的研究進(jìn)展△

侯宣辰，郭志娟

1內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)研究生院，呼和浩特 010059

2內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬人民醫(yī)院病理科，呼和浩特 010020

惡性腫瘤是世界上人類死亡的主要原因，并產(chǎn)生嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。自1991年以來，腫瘤死亡風(fēng)險持續(xù)下降，總體下降32%，至2019年約350萬例腫瘤患者幸免于難。雖然總體病死率下降了，但是仍然有部分患者病死率升高，如女性患者[1]。這與多種因素有關(guān)，包括飲食、環(huán)境、不良生活習(xí)慣等。雖然傳統(tǒng)治療及早發(fā)現(xiàn)、早期手術(shù)治療、運用靶向治療改善了腫瘤的發(fā)展及惡化[2]，但是仍然存在局限性，尤其是惡性腫瘤患者的預(yù)后不佳。研究發(fā)現(xiàn)，基因靶向治療與免疫靶向方法（免疫檢查點抑制劑、個性化疫苗和/或嵌合抗原受體T細(xì)胞）、激素治療等可用于惡性腫瘤的優(yōu)化治療，但是這些方法依然存在一系列的挑戰(zhàn)[4]。研究不完善、預(yù)后不佳、腫瘤治療產(chǎn)生耐藥性等問題依然困擾著人類，因此需要繼續(xù)深入研究惡性腫瘤。微小RNA（microRNA，miRNA）是長度為18～26個核苷酸的非編碼RNA，通過與靶標(biāo)mRNA內(nèi)3'-非翻譯區(qū)（3'-untranslated region，3'-UTR）的互補序列配對靶向誘導(dǎo)miRNA降解，使其轉(zhuǎn)錄受到抑制。miRNA通過控制多個基因的表達(dá)在細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、代謝、分化、增殖以及凋亡等關(guān)鍵細(xì)胞活動中發(fā)揮作用。研究發(fā)現(xiàn)，miRNA與惡性腫瘤進(jìn)展有關(guān)，包括細(xì)胞周期、細(xì)胞增殖或凋亡、血管生成、上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）和腫瘤侵襲，在惡性腫瘤的發(fā)生和發(fā)展中發(fā)揮重要的作用，因此可作為腫瘤診斷、治療及預(yù)后評估的生物標(biāo)志物[3]。近幾年發(fā)現(xiàn)多種miRNA通過轉(zhuǎn)錄、翻譯等過程在惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮積極作用，其中，miRNA-383通過作用于惡性腫瘤的基因或蛋白因子進(jìn)而調(diào)節(jié)細(xì)胞周期、增殖、侵襲、遷移、凋亡及耐藥性等，發(fā)揮抑癌作用。因此，了解miRNA-383在惡性腫瘤中的生物學(xué)行為具有重要意義。本文對miRNA-383在惡性腫瘤中的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，以便更好地了解其在惡性腫瘤中的作用機制，為惡性腫瘤的治療提供新的思路。

1 miRNA-383在惡性腫瘤中的研究進(jìn)展

1.1 miRNA-383的結(jié)構(gòu)及功能

miRNA-383是一種新發(fā)現(xiàn)的miRNA，它定位于染色體8p22，位于肌聚糖zeta（sarcoglycan zeta，SGCZ）基因的第三個內(nèi)含子內(nèi)[5]，SGCZ是一種蛋白質(zhì)編碼基因，在各種疾病中表達(dá)失調(diào)[6]，因此，miRNA-383被發(fā)現(xiàn)在多種類型的腫瘤中表達(dá)異常，其通過作用于基因轉(zhuǎn)錄過程、WNT/β-連環(huán)蛋白信號通路及長鏈非編碼RNA（long non-coding RNA，lncRNA）海綿化等調(diào)節(jié)惡性腫瘤的生長、凋亡、侵襲和遷移，并且在結(jié)直腸癌、肝細(xì)胞癌、胃癌、肺癌、髓母細(xì)胞瘤及膠質(zhì)瘤等多種惡性腫瘤的發(fā)展過程中起到抑癌作用。

1.2 miRNA-383與結(jié)直腸癌

2021年美國結(jié)直腸癌病死率為35.4%，結(jié)直腸癌分別是美國和英國第三大和第四大腫瘤，其發(fā)病率和病死率在亞洲和北美洲均呈上升趨勢，以50歲以下患者多見[7]。結(jié)直腸癌早期不易被發(fā)現(xiàn)，大多數(shù)患者晚期才被發(fā)現(xiàn)。內(nèi)鏡取活檢已成為診斷結(jié)直腸癌的金標(biāo)準(zhǔn)，但需要耗費大量金錢及專業(yè)醫(yī)師診斷，因此需要探索先進(jìn)的分子診斷標(biāo)志物用于腫瘤的檢查和治療，而miRNA常常在結(jié)直腸癌中表達(dá)失調(diào)，因此可作為結(jié)直腸癌篩查的生物標(biāo)志物[8]。Li等[9]通過雙熒光素酶報告基因檢測系統(tǒng)檢測miRNA-383模擬物在結(jié)直腸癌細(xì)胞中的過表達(dá)效率，發(fā)現(xiàn)cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白1（cAMP responsive element binding protein 1，CREB1）增加使miRNA-383過表達(dá)，從而增加對結(jié)直腸癌細(xì)胞增殖和糖酵解的抑制作用以及對結(jié)直腸癌細(xì)胞凋亡的促進(jìn)作用，說明miRNA-383可通過直接作用于CREB1抑制結(jié)直腸癌的發(fā)展。Li等[10]發(fā)現(xiàn)miRNA-383通過與mRNA 3'-UTR結(jié)合直接負(fù)調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞周期相關(guān)蛋白（cell-cycle related and expression-elevated protein in tumor，CREPT）表達(dá)，阻斷WNT信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，少部分降低腫瘤相關(guān)基因的表達(dá)，包括細(xì)胞周期蛋白D1（cyclin D1）、細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶4/6（cyclin-dependent kinase 4/6，CDK4/6），進(jìn)而抑制結(jié)直腸癌的進(jìn)展。Yan等[11]發(fā)現(xiàn)miRNA-383可以直接靶向抑制配對盒基因6（paired box 6，PAX6），進(jìn)而抑制結(jié)直腸癌的增殖和侵襲。由此推斷miRNA-383可以作為腫瘤抑制因子用于結(jié)直腸癌的治療。Zou等[12]采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR）檢測circ_0068464和miRNA-383在結(jié)直腸癌和癌旁正常組織中的表達(dá)，結(jié)果顯示，circ_0068464在結(jié)直腸癌細(xì)胞和組織中異常上調(diào)，miRNA-383在結(jié)直腸癌細(xì)胞和組織中顯著下調(diào)。同時通過雙熒光素酶報告基因檢測系統(tǒng)和RNA免疫沉淀測定法驗證了circ_0068464與miRNA-383之間的相互作用。此外，miRNA-383轉(zhuǎn)變了circ_0068464敲低對WNT/β-連環(huán)蛋白信號通路的抑制作用，進(jìn)而抑制結(jié)直腸癌的進(jìn)展。由此可見，miRNA-383在結(jié)直腸癌中發(fā)揮抑癌作用，未來可以作為診斷和治療結(jié)直腸癌的潛在靶點。

1.3 miRNA-383與肝細(xì)胞癌

肝細(xì)胞癌是全球第五大腫瘤，患者5年生存率為18%，僅次于胰腺癌[13]。目前采用手術(shù)切除、肝移植、全身化療等方法進(jìn)行治療，但是這些方法無法改善肝細(xì)胞癌的預(yù)后。研究發(fā)現(xiàn)，使用miRNA可靶向腫瘤特異性信號通路，進(jìn)而預(yù)防和治療肝細(xì)胞癌[14]。Cheng等[15]通過定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction，qRT-PCR）等技術(shù)發(fā)現(xiàn)，與癌旁正常組織相比，肝細(xì)胞癌組織中的miRNA-383表達(dá)顯著下調(diào)，PHD指蛋白8（PHD finger protein 8，PHF8）表達(dá)顯著上調(diào)，miRNA-383的過表達(dá)使PHF8沉默，抑制了肝細(xì)胞癌的增殖、遷移和侵襲。除PHF8外，miRNA-383還可作用于腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF）超家族成員APRIL來抑制肝細(xì)胞癌的增殖。Chen等[16]研究了miRNA-383在64個肝細(xì)胞癌組織和4個肝細(xì)胞癌細(xì)胞系中的表達(dá)模式，發(fā)現(xiàn)miRNA-383在肝細(xì)胞癌組織和細(xì)胞系中均下調(diào)，還發(fā)現(xiàn)miRNA-383可能通過下調(diào)APRIL的表達(dá)部分抑制肝細(xì)胞癌增殖。因此，可通過靶向miRNA-383-APRIL軸來治療肝細(xì)胞癌。更令人驚喜的是，Wang等[17]采用qRT-PCR檢測miRNA-383在從肝細(xì)胞癌患者中提取的45個成對腫瘤組織和鄰近非腫瘤組織中的表達(dá)水平，使用免疫組化法對白細(xì)胞介素-17（interleukin-17，IL-17）進(jìn)行染色，發(fā)現(xiàn)miRNA-383在腫瘤組織中顯著下調(diào)，而IL-17在腫瘤組織中上調(diào)，說明miRNA-383在肝細(xì)胞癌中發(fā)揮抑癌作用；此外，IL-17升高可減弱miRNA-383在肝細(xì)胞癌中的抑制作用，同時miRNA-383可抑制磷酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子3（phosphorylated signal transduction and activator of transcription 3，p-STAT3），因此miRNA-383通過信號轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子3（signal transduction and activator of transcription 3，STAT3）信號通路靶向IL-17發(fā)揮抑癌作用。由此推斷，miRNA-383可通過調(diào)節(jié)PHF8、APRIL、IL-17來抑制肝細(xì)胞癌的增殖、侵襲、遷移。

1.4 miRNA-383與胃癌

胃癌是全球第三大常見腫瘤類型，也是第三大常見腫瘤死亡原因。早期胃癌的主要治療方法是內(nèi)鏡切除術(shù)，非早期胃癌通過手術(shù)治療，晚期胃癌可采用化療及靶向治療[18]。研究發(fā)現(xiàn)，miRNA在胃癌中活躍，其中miRNA-383在胃癌中起抑癌作用。Zhu等[19]發(fā)現(xiàn)，miRNA-383在胃癌組織中的表達(dá)顯著降低，并與胃癌晚期進(jìn)展相關(guān)。通過功能分析發(fā)現(xiàn)，miRNA-383的過表達(dá)抑制了胃癌細(xì)胞的增殖并促進(jìn)了胃癌細(xì)胞的凋亡。Azarbarzin等[6]通過qRT-PCR研究了40例胃癌患者的成對腫瘤組織和鄰近非腫瘤組織中miRNA-383的表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)與鄰近非腫瘤組織相比，miRNA-383在腸型胃腺癌組織中的下調(diào)幅度高達(dá)7倍，說明miRNA-383可以作為胃癌的抑癌基因。同時，Tao等[20]采用生物信息學(xué)分析和熒光素酶報告基因檢測系統(tǒng)分析B細(xì)胞淋巴瘤/白血病-2（B cell lymphoma/leukemia-2，Bcl-2）與miRNA-383的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)與鄰近非腫瘤組織相比，胃癌組織中miRNA-383水平較低，而Bcl-2水平較高，而且發(fā)現(xiàn)過表達(dá)miRNA-383可通過靶向Bcl-2mRNA的3'-UTR抑制其蛋白質(zhì)翻譯，導(dǎo)致氟尿嘧啶處理的胃癌細(xì)胞存活率降低。此外，Zhu等[19]在生物信息學(xué)數(shù)據(jù)庫中發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞周期蛋白E2是miRNA-383的靶標(biāo)；miRNA-383可通過結(jié)合細(xì)胞周期蛋白E2的3'-UTR，降低細(xì)胞周期蛋白E2在胃癌細(xì)胞中的表達(dá)；與正常組織相比，胃癌組織中細(xì)胞周期蛋白E2上調(diào)。結(jié)果表明miRNA-383通過靶向抑制細(xì)胞周期蛋白E2，誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞在G1期停滯，抑制胃癌的進(jìn)展。Xu等[21]發(fā)現(xiàn)，組蛋白去乙?；?9（histone deacetylase 9，HDAC9）是胃癌的癌基因，在胃癌中上調(diào)，并與胃癌預(yù)后息息相關(guān)，而miRNA-383可通過抑制HDAC9發(fā)揮抑癌作用。由此可見，miRNA-383可通過靶向作用于Bcl-2、細(xì)胞周期蛋白E2及HDAC9發(fā)揮抑癌作用，由此可推斷miRNA-383在胃癌中可作為診斷、治療及判斷預(yù)后的生物標(biāo)志物。

1.5 miRNA-383與髓母細(xì)胞瘤

髓母細(xì)胞瘤是惡性腫瘤中最難治的腫瘤，以兒童多見，常常采用化療、手術(shù)切除、原發(fā)腫瘤部位和顱脊椎軸放療的方法進(jìn)行治療，但是生存率低，因此需要尋找新的治療方法[22]。王少增等[23]發(fā)現(xiàn)，miRNA-383轉(zhuǎn)染組人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞系（Daoy細(xì)胞系）的硫氧還蛋白依賴性過氧化物還原酶3（peroixinedoxin 3，PRDX3）表達(dá)水平低于對照組，說明miRNA-383確實對PRDX3有著負(fù)向調(diào)控的作用。而流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡時發(fā)現(xiàn)miRNA-383轉(zhuǎn)染組細(xì)胞凋亡比例高于對照組，揭示miRNA-383能夠通過調(diào)控PRDX3參與細(xì)胞凋亡的過程，機制為miRNA-383下調(diào)PRDX3基因的表達(dá)，通過提高細(xì)胞內(nèi)活性氧水平，降低線粒體膜電位水平，從而抑制人髓母細(xì)胞瘤的增殖并誘導(dǎo)其凋亡。因此，miRNA-383通過下調(diào)PRDX3的表達(dá)水平來抑制Daoy細(xì)胞系的增殖，并促進(jìn)其凋亡。Wang等[24]通過實時qRT-PCR檢測人髓母細(xì)胞瘤組織、Daoy細(xì)胞系和正常腦組織樣本中的PRDX3和miRNA-383表達(dá)發(fā)現(xiàn)，人髓母細(xì)胞瘤組織中miRNA-383表達(dá)水平明顯低于正常腦組織，人髓母細(xì)胞瘤組織和Daoy細(xì)胞系中的PRDX3蛋白表達(dá)水平均高于正常腦組織，說明miRNA-383的上調(diào)可降低PRDX3的表達(dá)，抑制人髓母細(xì)胞瘤增殖并促進(jìn)其凋亡。兩項研究得到了相同的結(jié)論，所以miRNA-383-PRDX3軸是調(diào)節(jié)人髓母細(xì)胞瘤生長和凋亡的重要靶點。

1.6 miRNA-383與肺癌

肺癌是全球腫瘤相關(guān)死亡的主要原因，分為小細(xì)胞肺癌和非小細(xì)胞肺癌，支氣管鏡檢查和活檢是其主要的確診方法，但是存在費用高和易引發(fā)并發(fā)癥的缺點，而新的生物標(biāo)志物如miRNA可重復(fù)取樣而且價格便宜[25]，因此可用于腫瘤的早期診斷。Gu等[26]發(fā)現(xiàn)WNT1是miRNA-383的靶基因，miRNA-383過表達(dá)可抑制WNT1、β-連環(huán)蛋白和細(xì)胞周期蛋白D1的表達(dá)，促進(jìn)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞凋亡，進(jìn)而縮小裸鼠非小細(xì)胞肺癌的腫瘤體積。He等[27]通過蛋白質(zhì)印跡法及細(xì)胞侵襲實驗等方法發(fā)現(xiàn)miRNA-383宿主基因上chr8p22位點缺失導(dǎo)致肺腺癌組織中miRNA-383的低表達(dá)。而miRNA-383通過與RNA結(jié)合基序蛋白24（RNA binding motif protein 24，RBM24）mRNA的3'-UTR相互作用來負(fù)調(diào)節(jié)RBM24，進(jìn)而提高對順鉑的敏感性。因此，chr8p22丟失導(dǎo)致miRNA-383在肺腺癌細(xì)胞中表達(dá)下調(diào)，RBM24表達(dá)上調(diào)，從而降低了腫瘤細(xì)胞對化療的敏感性。因此提高miRNA-383或抑制RBM24可提高肺腺癌細(xì)胞的順鉑敏感性進(jìn)而促進(jìn)肺癌細(xì)胞的凋亡。Yuan等[28]通過qRT-PCR等技術(shù)發(fā)現(xiàn)E2F轉(zhuǎn)錄因子7（E2F transcription factor 7，E2F7）是miRNA-383的靶基因，circ-CCS可海綿化miRNA-383，通過促進(jìn)E2F7的上調(diào)，進(jìn)而促進(jìn)肺癌的發(fā)展。因此miRNA-383在肺癌中作為抑癌因子發(fā)揮作用。由此可見，miRNA-383通過作用于WNT1、β-連環(huán)蛋白、RBM24及E2F7等抑制肺癌的發(fā)生發(fā)展，因此miRNA-383是肺癌診斷和治療的重要靶標(biāo)。

1.7 miRNA-383與膠質(zhì)瘤

膠質(zhì)瘤是最常見的中樞神經(jīng)腫瘤，惡性程度極高，目前手術(shù)治療、放療、化療和靶向治療均取得了一定的進(jìn)展，但是易復(fù)發(fā)且生存率低仍然是需要解決的問題，因此需要尋找及時診斷和靈敏度高的工具，而miRNA就參與其中[29]。其中miRNA-383通過作用于調(diào)節(jié)蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子（cancerous inhibitor of protein phosphatase 2A，CIP2A）、PRDX3、ADAM金屬肽酶結(jié)構(gòu)域12（ADAM metallopeptidase domain 12，ADAM12）在膠質(zhì)瘤中起到抑癌作用。Zhang和Wang[30]采用定量PCR、蛋白質(zhì)印跡法等方法發(fā)現(xiàn)miRNA-383在膠質(zhì)瘤患者中低表達(dá)，CIP2A在膠質(zhì)瘤中高表達(dá)。熒光素酶測定顯示miRNA-383可以與CIP2A的3'-UTR結(jié)合，此外，miRNA-383過表達(dá)與Argonaute 2蛋白（Ago2）形成RNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合物（RNA-induced silencing complex，RISC）來抑制CIP2A的表達(dá)，進(jìn)而抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖及侵襲。Xu等[31]在人膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞中使用蛋白質(zhì)印跡法及流式細(xì)胞術(shù)發(fā)現(xiàn)PRDX3可促進(jìn)細(xì)胞自噬，增加細(xì)胞凋亡及提高活性氧水平。而且，PRDX3是miRNA-383的靶蛋白，miRNA-383與PRDX3表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。因此，miRNA-383通過下調(diào)PRDX3誘導(dǎo)人膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡和線粒體活性氧產(chǎn)生，從而促進(jìn)氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的自噬進(jìn)而促進(jìn)U87細(xì)胞凋亡。Wang等[32]通過熒光素酶測定證實ADAM12是miRNA-383的直接靶標(biāo)，LINC01614可通過海綿化miRNA-383在膠質(zhì)瘤中發(fā)揮致癌作用，而搶救實驗表明過表達(dá)LINC01614可以提高ADAM12mRNA水平，總之，LINC01614通過海綿化miRNA-383調(diào)節(jié)ADAM12表達(dá)來促進(jìn)膠質(zhì)瘤的進(jìn)展。所以，miRNA-383在膠質(zhì)瘤中起抑癌作用，可作為診斷及治療膠質(zhì)瘤的重要靶點。

1.8 miRNA-383與膽管癌

干擾素調(diào)節(jié)因子1（interferon regulatory factor 1，IRF1）是膽管癌的腫瘤抑制因子，miRNA-383可與IRF1相互作用在膽管癌中發(fā)揮抑癌作用。Wan等[33]通過熒光素酶報告基因檢測系統(tǒng)發(fā)現(xiàn)IRF1是miRNA-383的功能靶標(biāo)，參與調(diào)節(jié)膽管癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲。miRNA-383靶向作用于IRF13'-UTR，負(fù)性調(diào)控其表達(dá)，進(jìn)而抑制膽管癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲。因此，miRNA-383是診斷和治療膽管癌的重要靶點。

2 小結(jié)及展望

miRNA-383與惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，其與相應(yīng)的靶分子結(jié)合參與惡性腫瘤的生物學(xué)過程。目前對于miRNA-383在惡性腫瘤中的研究不斷深入，發(fā)現(xiàn)miRNA-383在惡性腫瘤中起抑癌作用。但目前對miRNA-383在惡性腫瘤中作用的研究仍然較少，其在惡性腫瘤中的作用靶點和作用機制還知之甚少，還需要繼續(xù)研究。此外，最近幾年發(fā)現(xiàn)的lncRNA與miRNA-383海綿化影響著惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展，這是一個新穎的方向，目前在各種惡性腫瘤中逐步開展，可作為一種研究思路?？偠灾枰^續(xù)深入研究miRNA-383在惡性腫瘤中的作用機制，尋找抑制惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展的重要靶點和信號通路，為惡性腫瘤的治療尋找新的道路。