犢牛產腸毒素性大腸桿菌病的防治

張力國

摘要：致病性大腸埃希菌共有5種，其中產腸毒素性大腸埃希菌（Enterotoxigenic…Escherichia…coli，ETEC）是一種常見的消化道致病菌，可導致犢牛發熱、腹瀉，甚至造成死亡，對畜牧養殖造成很大損失。本文從該病菌的致病機制、臨床診斷、防治措施等方面進行簡要綜述。

關鍵詞：犢牛；產腸毒素性大腸埃希菌

1 ETEC簡介和致病機制

產腸毒素性大腸埃希菌是致病性大腸埃希菌的一種，革蘭氏染色呈短桿狀，兩端稍鈍圓，屬于革蘭氏陰性菌，無芽抱。ETEC培養的適宜溫度為37℃、pH為7.2～7.4。在LB培養基平板上呈現圓形、邊緣整齊、稍隆起的光滑菌落；在伊紅—美蘭培養基平板上呈現帶有金屬光澤的紫黑色光滑菌落；在麥康凱培養基平板上呈現粉紅色光滑菌落。

ETEC是導致犢牛腹瀉發生的重要病原體，能夠產生兩種類型的毒力因子，即低分子量的耐熱型腸毒素STa，以及產生細胞毒素的菌毛抗原（F4、F5、F6、F41等）。

ETEC導致新生犢牛發生分泌性腹瀉。研究表明，產腸毒素性大腸埃希菌經消化道進入動物腸道內，并通過菌毛附著于宿主腸細胞上，在腸道定植后進行大量繁殖，并釋放腸毒素，腸毒素激活鳥苷酸環化酶，引起腸細胞中環磷酸鳥苷水平升高，使粘膜細胞吸收功能下降，分泌功能增強，造成體液、碳酸鹽和其他離子成分的損失，最終引發動物腹瀉。一般來說，犢牛所攜帶的ETEC只產生STa。

使致病性產腸毒素性大腸桿菌附著于腸細胞的Ⅰ型菌毛屬于蛋白質，之前將之歸類為莢膜抗原，目前文獻中均稱為菌毛（F）抗原。菌毛抗原包括F4 （K88）、F5 （K99）、F6 （987P）、F18和F41等，具有其中一個或多類型的菌毛抗原均能引起犢牛腹瀉，但F5（K99）抗原是引起犢牛致病最常見的一種抗原，常用作制備診斷試劑和疫苗。由于腸毒素不具備免疫原性，通常利用研究菌毛抗原的抗體來防制犢牛的產腸毒素性大腸埃希菌病，然而，不同的菌毛抗原之間缺乏交叉保護性。所以，針對特異性產腸毒素性大腸埃希菌的菌毛抗原抗體來制作初乳，只能夠防止犢牛發生該菌毛抗原引起的大腸埃希菌病。

2 臨床癥狀與診斷

低于10日齡的犢牛易發生該病，主要癥狀為腹瀉。感染初期，體溫明顯升高，可達到39℃甚至41℃，通常會出現急性腸炎癥狀，脫水和肌肉無力，全身狀態下降，糞便的顏色、性狀變化很大，但通常為大量水樣腹瀉，腹瀉物呈黃色、白色或者綠色。病犢牛的體溫降低至正常水平之下，眼結膜充血，膿性分泌物將眼瞼粘連，出現代謝性酸中毒和低血糖，最急性病例可在4～12小時內發生休克，急性病例得不到及時救治，會在表現出臨床癥狀3～4天之后因心衰而死。

剖檢可見真胃黏膜充血、水腫并且內有大量凝乳塊、膠狀黏液；小腸有明顯的積液，腸黏膜充血，腸壁變薄；腸系膜淋巴結腫脹、瘀血，顏色變黑；膽囊內可見黏稠、暗綠色膽汁。多數病例的肝臟、腎臟等實質器官及心內膜有出血點。最急性感染可導致犢牛出現典型的代謝性酸中毒，血漿中重碳酸鹽濃度降低，pH值下降，產生低氯血和低鈉血，高鉀血和低血糖是特征性血液指標。

一般可以結合犢牛的發病日齡、臨床癥狀，最終以實驗室檢測結果進行確診。糞便中可分離出ETEC，如有犢牛死亡病例，可采集空腸內容物進行分離。經麥康凱等鑒別培養基培養，革蘭氏染色、鏡檢后進行純培養，增菌后提取核酸，利用16S rRNA通用引物進行擴增，進行核酸比對，同源性大于99%鑒定為大腸桿菌。再利用PCR技術檢測腸毒素STa基因及菌毛抗原，最終確定為ETEC。

臨床上要對糞便進行病毒和原蟲檢測，因為ETEC經常與冠狀病毒、輪狀病毒以及微細隱孢球蟲發生混合感染。同時也要對沙門氏菌和產氣莢膜梭菌引起的疾病進行鑒別診斷。其中，雖然沙門氏菌也可以導致犢牛腹瀉，但沙門氏菌患牛會出現發熱，中性白細胞減少以及核左移；產氣莢膜梭菌可引起患牛腹部高度膨脹而沒有明顯腹瀉，表現肌肉無力、脫水和休克，但很少出現嚴重的代謝性酸中毒。

3 治療措施

3.1……非藥物治療

癥狀較輕的犢牛可以口服補液鹽，原則上可自行康復。按照機體損失的電解質和水分的量來口服補液鹽可以緩解腹瀉，但不會減少體液流失、糞便量或縮短病程。口服電解質溶液的作用十分重要，特別是靜脈輸液后的治療或用作感染不嚴重的犢牛唯一藥物時，因為腹瀉導致碳酸氫根（HCO3-）不斷丟失，必須使用含有重碳酸鹽的電解質溶液進行治療。

臨床可根據以下原則進行補充電解質。第一，躺臥病牛，脫水占體重的12%～15%，補充濃度為15～20毫摩爾/升；第二，肌肉無力病牛，脫水占體重的8%～12%，補充濃度為10～15毫摩爾/升；第三，能正常運動病牛，脫水占體重的5%～8%，補充濃度為5～10毫摩爾/升。當然，上述原則也不是絕對的，還需臨床觀察，做出準確判斷。

3.2……藥物治療

高毒力的ETEC往往對多種抗生素具有抗藥性，利用藥物治療不應只是簡單的使用更好的抗生素，而是應該從發病牛群采取多個樣本，送到有條件的實驗室鑒別產腸毒素大腸埃希菌及其抗原，同時進行抗生素敏感性實驗。由于脫水導致腎臟灌流減少，會引起腎前性氮血癥，所以，在臨床用藥時，要避免腎中毒。

腹瀉嚴重的犢牛應連用3～5天廣譜抗生素（慶大霉素、丁胺卡那霉素、磺胺三甲氧芐胺嘧啶、恩諾沙星等均是合理的選擇）抗菌消炎，靜脈滴注林格氏液，以保持液體平衡，并治療酸中毒，補充葡萄糖維持機體所需能量。可以活動并有吸吮反應的犢牛可內服腸黏膜保護劑和吸附劑，減少毒素吸收。停用抗生素后，內服益生菌制劑及消化酶，每天2次以調整腸道微生態平衡。若腹瀉超過4天，要考慮有其他微生物并發感染。

4 預防措施

預防具有重要意義，尤其是在犢牛場發病率和死亡率較高時。防控牛源該疾病，牛舍溫度要保持在16～19℃，相對濕度保持在50%～70%，保持通風良好，要減少環境中大腸埃希菌滋生繁殖及增強牛群對病原菌的免疫力。當出現病牛時，要立即將其隔離并進行診治，避免其他牛接觸病牛的糞便、污水，防止疾病蔓延。另外，預防和減少該病還要隨著牛群結構的不斷優化、檢驗標準的更加嚴格來不斷的加強環境治理、盡早建立預警監測技術以及建立完善的預防方法。更要從管理和預防方面控制輪狀病毒、微細隱孢球蟲、冠狀病毒等或其他腸道病原菌的混合感染。

在養殖過程中，對母畜進行疫苗接種，從而預防新生幼畜ETEC腹瀉的發生，被認作是一種有高成本效益的健康管理方式。如果從多頭患牛糞便樣品中檢出攜帶有F抗原的ETEC，就應立刻采取預防措施。可以在懷孕母牛產前6周和3周使用具有F抗原的商品苗來免疫，同時給新生犢牛飼喂優質母乳即可解決問題。如果商品苗不能抑制疫病的發生，在確定致病菌為ETEC后，可以考慮使用自家菌苗。但必須注意，只有在完全確診ETEC感染且商品苗無效的情況下才可以使用自家菌苗。另外，雖然益生菌不是疫苗，但卻可以作為粘附抑制劑來預防ETEC。

5 小結

ETEC可導致犢牛高發病率和高死亡率，是一種危害較大的細菌性傳染病，目前，對它的致病機理以及相關毒力因子已經有了比較全面的了解。但是，養殖戶經常使用自購的藥物進行治療，缺乏科學依據，導致該菌的耐藥性顯著增強。因此，牛場的預防和治療相結合尤為重要，要加強養殖戶疫苗免疫接種意識，掌握更多精細化管理方式，整體提高牛群的抵抗力、降低該病發生率，對于不同牛舍實施針對性的科學防控方案，提高該病的治愈率，多種方案方法共同推進，才能為畜禽養殖業的蓬勃發展保駕護航。

項目編號：FSYC20224001