LC-MS/MS 測定氨磺樂靈在水和土壤中的殘留量

黃 慧，張 武，閆妮娜

(浙江長三角化學品安全評價有限公司，杭州 310023)

氨磺樂靈(oryzalin)，又名氨磺靈、黃草消，化學名稱為3,5-二硝基-N′,N′-二丙基對氨基苯磺酰胺，是一種低毒選擇性芽前除草劑，其通過破壞幼苗分生細胞的有絲分裂，從而抑制雜草幼芽及幼根的生長，主要用于大豆、花生、棉花、果樹等作物田防除一年生禾本科和闊葉雜草，也可用于水稻等作物田的雜草[1～3]。

氨磺樂靈在國內已獲得登記[4]，但對于氨磺樂靈在環(huán)境中的檢測方法鮮有報道[5]。本研究擬采用高效液相色譜質譜聯用法建立氨磺樂靈在土壤和水等環(huán)境介質中的殘留檢測方法，相對于目前已報導的高效液相色譜法[6]具有靈敏度高、可靠性強的特點，可為該除草劑在環(huán)境中的安全監(jiān)測提供科學指導。

1 材料與方法

1.1 供試樣品與材料

98.0%氨磺樂靈標準品(CAS 號19044 88 3，上海源葉生物科技有限公司)；乙腈、甲酸(均為色譜純，美國TEDIA 公司)；自來水；潮棕土：自然風干后過2 mm 篩。

1.2 儀器

LCMS 8040 高效液相質譜聯用儀(日本島津公司)；XSE205DU 電子天平(美國梅特勒 托利多公司)；VELOCITY 14 Pro 離心機(英國Dynamica 公司)；MS 3 BASIC 渦旋混合器(德國艾卡公司)。

1.3 試驗設計

依據《農藥登記 土壤和水中化學農藥分析方法建立和驗證指南》(NY/T 3151—2017)[7]、《農作物中農藥殘留試驗準則》(Y/T 788—2018)[8]，分別進行水、土中的添加回收試驗。

準確稱取標準物質，用乙腈溶解配制儲備液；用乙腈/水(1∶1，體積比)混合溶液逐步稀釋配制系列標準溶液。以氨磺樂靈的質量濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線。并以水/土中的基質溶液配制基質標準溶液，分別考察基質效應；當基質效應＜20%，可使用溶劑標準曲線進行計算，否則需用基質標準曲線進行計算。

1.4 試驗方法

1.4.1 溶液配制

以乙腈為溶劑，配制得到質量濃度為1 000 mg/L的儲備液1。

溶劑標準曲線：以乙腈/水(1∶1，體積比)混合溶液為溶劑，逐級稀釋配制質量濃度為0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、50.0μg/L 的系列標準溶液，待儀器穩(wěn)定后依次連續(xù)注入上述標準溶液，以峰面積對質量濃度回歸分析，制得標準曲線。

水中基質標準曲線：以空白自來水為溶劑，制得0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、50.0μg/L 的基質標準溶液。以峰面積對質量濃度回歸分析，制得標準曲線。

土中基質標準曲線：以空白土壤提取液為溶劑，制得0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、50.0μg/L 的基質標準溶液。以峰面積對質量濃度回歸分析，制得標準曲線。

用乙腈/水(1∶1，體積比)混合溶液稀釋制得質量濃度為0.1 mg/L的儲備液2 和1.0 mg/L 的儲備液3，待用。

1.4.2 水中添加回收試驗

分別設置1.0、10μg/L 2 個添加水平，每個添加水平設置5 個平行，同時設置1 個空白對照。

量取10 mL 空白自來水，分別加入質量濃度為0.1 mg/L 的儲備液2 和1.0 mg/L 的儲備液3 各100 μL，使添加水平分別為1.0、10μg/L，搖晃混勻。靜置片刻后，過0.22μm 濾膜，LC MS/MS 測定。

1.4.3 土壤中添加回收試驗

分別設置0.001、0.01 mg/kg 2 個添加水平，每個添加水平設置5 個平行，同時設1 個空白對照。

稱取空白土壤10.0 g 于100 mL 離心管中，分別加入質量濃度為0.1 mg/L 的儲備液2 和1.0 mg/L 的儲備液3 各100μL，使添加水平分別為0.001、0.01 mg/kg。待溶劑揮發(fā)后，加入5 mL乙腈和5 mL水，超聲10 min，180 r/min 振蕩20 min 混勻，然后1 000 r/min 離心5 min，取上層提取液過0.22μm 濾膜，LC MS/MS測定。

1.4.4 檢測條件

液相色譜條件：色譜柱：Agilent ZORBAX Extend C18(2.1 mm×50 mm，3.5μm)；柱溫：30 ℃；進樣體積：10 μL；流速：0.4 mL/min。

表1 流動相洗脫程序

MS 條件：掃描模式：ESI MRM Negative，噴霧氣流速：3 L/min，DL 溫度：250 ℃，加熱塊溫度：400 ℃，干燥氣流速：15 L/min。

表2 離子對及參數

2 結果與分析

2.1 重復性

將5.0μg/L 氨磺樂靈標準溶液重復進樣7 次，檢測該方法中保留時間和響應值(峰面積)的重復性。試驗結果見表3，保留時間平均值為0.487 0 min，RSD 為0.110%；峰面積平均值為1.06×105，RSD 為1.91%。符合分析方法質量控制要求。

表3 氨磺樂靈檢測重復性

2.2 水中添加回收試驗

溶劑配標為0.5～50.0μg/L 時，氨磺樂靈的峰面積與質量濃度呈線性相關，標準曲線方程為y=1.68×104x+4.01×103(r=0.999 9)，各質量濃度點準確度范圍為90.8%～111.0%；基質配標為0.5～50.0μg/L時，氨磺樂靈的峰面積與質量濃度呈線性相關，標準曲線方程為y=1.14×104x+3.28×103(r=0.999 1)，各質量濃度點準確度范圍為88.5%～109%。

利用斜率計算基質效應，結果為31.9%，基質效應>20%，因此以基質配標得到的標準曲線進行定量。基質效應的計算結果見表4。

表4 基質效應結果

水中添加回收試驗分別設置1.0、10μg/L 2 個添加水平，每個添加水平設置5 個平行，同時設1 個空白對照，空白自來水在目標出峰處無干擾。1.0、10 μg/L 添加水平的平均回收率分別為104%和109%，RSD 分別為4.62%和2.40%。試驗結果見表5 及圖1。

圖1 水中添加回收試驗質譜圖

表5 氨磺樂靈水中加標回收率

2.3 土壤中添加回收試驗

溶劑配標為0.5～50.0μg/L 時，氨磺樂靈的峰面積與質量濃度呈線性相關，標準曲線方程為y=1.80×104x+4.24×103(r=0.999 9)，各質量濃度點準確度范圍為86.9%～107%。基質配標為0.5～50μg/L時，氨磺樂靈的峰面積與質量濃度呈線性相關，標準曲線方程為y=7.60×103x+2.21×103(r=0.999 3)，各質量濃度點準確度范圍為86.9%～113%。利用斜率計算基質效應，結果為57.8%，基質效應>20%，因此以基質配標得到的標準曲線進行定量。基質效應計算結果見表6。

表6 基質效應結果

土壤中添加回收試驗分別設置0.001、0.01 mg/kg 2 個添加水平，每個添加水平設置5 個平行，同時設1 個空白對照，空白土壤提取液在目標出峰處無干擾。0.001、0.01mg/kg 的平均回收率分別為94.8%和85.4%，RSD 分別為3.53%和4.78%。試驗結果見表7 及圖2。

表7 氨磺樂靈土壤中添加回收率

圖2 土壤中添加回收試驗質譜圖

3 結論

對氨磺樂靈在水和土壤中的殘留量檢測研究中，建立了高效液相液質聯用儀(LCMS/MS)的分析方法。測得在水中1.0、10.0μg/L 和土壤中0.001、0.01 mg/kg 共4 個添加水平下平均回收率和相對標準偏差，均符合《農藥登記 土壤和水中化學農藥分析方法建立和驗證指南》(NY/T 3151—2017)和《食品安全國家標準食品中農藥最大殘留限量》(GB 2763—2012)要求。該方法靈敏、有效，適合實驗室大批量檢測。