山東縊蟶人工繁育試驗及高鹽對幼蟲生長的影響

崔玉龍 姜珊 吳彪 曹偉 于貞貞 陳聰聰 趙磊

摘要 研究了山東地區縊蟶人工繁育過程及鹽度對幼蟲生長的影響。結果發現，山東地區能夠順利培育縊蟶苗種，其受精卵在23 ℃條件下發育24 h便可進入D形幼蟲階段，浮游期約為8 d，每天生長約15 μm，變態后生長速度穩步加快；將幼蟲在14、21、28鹽度梯度下培育發現，隨著鹽度的升高，其殼長生長速率顯著下降（P<0.05）。該研究結果可為山東地區開展縊蟶人工繁育提供參考。

關鍵詞 縊蟶；人工繁育；鹽度；幼蟲；生長

中圖分類號 S 968.3? 文獻標識碼 A? 文章編號 0517-6611（2023）07-0085-03

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2023.07.021

Experiment on Artificial Propagation and Effect of High Salinity on Larvae Growth of Sinonovacula constricta in Shandong

CUI Yu-long1，JIANG Shan1，WU Biao2 et al

（1.Rongcheng Marine Economic Development Center，Rongcheng，Shandong 264300;2.Yellow Sea Fisheries Research Institute，Chinese Academy of Fishery Sciences，Qingdao，Shandong 266071）

Key words The artificial breeding process of razor clams in Shandong and the effects of salinity on the growth of larvae were studied.The results showed that razor clam could be successfully propagated in Shandong，and their fertilized eggs could enter the D-shaped larval stage after 24 h of development at 23°C.The larval stage was about 8 days，with a growth rate of about 15 μm per day，and the growth rate steadily accelerated after larval stage;the larvae were bred under three salinity of 14，21 and 28，and it was found that the shell length growth rate decreased significantly with the increase of salinity （P<0.05）.The results of the study provide a reference for the artificial propagation of razor clams in Shandong.

Key words Sinonovacula constricta;Artificial propagation;Salinity;Larvae;Growth

基金項目 寧波市“科技創新2025”重大專項（2019B10005）；寧波市重大科技攻關暨“揭榜掛帥”項目（2021Z114）。

作者簡介 崔玉龍（1981—），男，山東威海人，工程師，從事水產養殖研究。通信作者，碩士，主要從事貝類遺傳育種與繁育工作。

收稿日期 2022-04-07；修回日期 2022-05-12

縊蟶（Sinonovacula constricta）為軟體動物，屬瓣鰓綱簾蛤目竹蟶科，常棲息于河口有淡水注入的軟泥底質中，是我國傳統的四大海水養殖貝類之一。縊蟶廣泛分布于中國、日本和朝鮮等國的沿海地區［1］，在我國浙江、福建的貝類養殖中占有重要地位。

近年來，縊蟶養殖業呈快速穩定發展趨勢，養殖區域從浙江、福建向周邊的江蘇、山東、廣東等省份迅速擴展［2］。山東東營、濱州、青島縊蟶養殖規模不斷擴大，成為北方灘涂養殖的新亮點［3］。但縊蟶人工繁育主要集中在浙江、福建兩地，山東地區的養殖苗種均來自南方，尚無縊蟶苗種規模化人工繁育的相關報道。海陽市漁業技術推廣站分析比較了北方自然繁殖的苗種與浙江苗種，發現北方苗種更加適應當地自然環境，養殖經濟效益比南方苗種更具優勢，可避免長途運輸苗種，減少投資，降低養殖成本［4］。隨著縊蟶在山東養殖規模的不斷擴大，亟需開展苗種規模化、本土化生產。

鹽度是影響貝類生長發育及新陳代謝的重要環境因子［5］。牡蠣和貽貝等大多數瓣鰓綱貝類具有密封且堅厚如石的殼來保護柔軟的身體，而擁有兩片薄而不封閉的殼的縊蟶選擇了深挖洞的生活方式［6-7］，這導致縊蟶最先面臨水體鹽度波動、氨氮上升和溶氧下降等不利環境。因此，縊蟶是研究應激反應和適應的理想生物。林筆水等［8-9］研究了不同鹽度下縊蟶幼蟲生存、生長及發育狀況，發現縊蟶幼蟲對鹽度的變化很敏感，高鹽度海水會使其存活率較低、生長緩慢、無法變態等，且長期生活在較高鹽度海域的縊蟶所繁衍的幼蟲對高鹽的耐受能力強于低鹽耐受力。縊蟶適應鹽度范圍是4～28［10］，最適鹽度范圍為15～25［11］。蟶體大小不同，對鹽度的適應能力略有不同，相對而言，小蟶更耐淡，大蟶更耐咸［10］。然而在實際生產過程中，縊蟶的人工育苗和養殖經常受到高鹽度海水的影響。為此，筆者開展了山東本地縊蟶的工廠化苗種繁育關鍵技術摸索，同時研究了不同鹽度下幼蟲的生長情況，以期為山東地區縊蟶本土化規模繁育提供基礎資料和參考。

1 材料與方法

1.1 親貝采集與催產 縊蟶親貝于9月中旬取自煙臺萊陽五龍河入海口處。于低溫、陰干條件下運回育苗場后，選擇殼表無損傷、無附著物且殼長5 cm以上的個體為親貝，持續陰干至22：00之后移至產卵池充氣刺激，產卵池水溫23 ℃、鹽度14，持續充氣刺激至翌日02：00后便可產卵。

1.2 幼蟲培育 縊蟶受精卵發育24 h后，大部分可達到D形幼蟲階段，挑選健康、活力好且上浮的幼蟲轉至育苗池分池培育，培育密度為10 ind/mL，保持水溫23 ℃，每日早晚換水，換水量為50%，換水后投喂等鞭金藻（Isochrysis galbana）和牟氏角毛藻（Chaetoceros muelleri）。

1.3 幼蟲附著 在1/3幼蟲出現眼點并有伸足現象時移入附苗池，利用去除雜質并消毒后的細沙作為附著基。

1.4 稚貝培育 稚貝初始培育密度為2×106顆/m2，隨著個體的生長而逐漸降低，一般8 d降低密度50%。每日早晚換水，換水量為80%。每日投餌2～4次。

1.5 不同鹽度培育幼蟲試驗 試驗鹽度使用海水和曝氣24 h的自來水配制，設置14、21、28 3個鹽度，每組3個生物學重復，水溫保持20 ℃以上。受精卵發育24 h后移入各鹽度養殖池中，幼蟲培育期間每2 d利用顯微鏡測量縊蟶幼蟲殼長。

1.6 數據分析 試驗數據采用Excel 2019進行統計和作圖分析，采用SPSS 26進行差異顯著性檢驗，顯著水平為0.05（P＜0.05）。

2 結果與分析

2.1 幼蟲發育前期觀察 由圖1可見，受精9 h后胚胎發育至原腸期，長約70 μm，植物極細胞內陷形成一個小孔，稱為原口或胚孔，形成原腸胚，24 h后發育成D形幼蟲，殼長約100 μm，覆蓋兩片透明的半圓形貝殼，頂端初步形成面盤和纖毛，靠面盤上纖毛的擺動向前游動；D形幼蟲期2～3 d，形成黃色的消化盲囊，殼長生長至140 μm；發育4 d的幼蟲開始形成殼頂，不甚明顯，面盤發達，在靜水中能自由游動，殼長約150 μm；殼頂幼蟲期約有3 d，貝殼向卵圓形發展，并進一步形成柱狀的足原基，消化盲囊變黃褐色，殼長生長至180 μm；發育7 d的幼蟲部分出現眼點，足開始收縮，面盤開始萎縮，殼長約200 μm；發育8 d的幼蟲面盤退化，纖毛環脫落，面盤幼蟲期終止，足伸出殼外，內部器官逐漸完善，殼長約為220 μm（表1）。

2.2 幼蟲與稚貝的生長 表1是縊蟶幼蟲和前期稚貝的生長情況。D形幼蟲期生長較快，殼長以每天20 μm的速度增長；殼頂幼蟲期生長速度減緩，殼長每天生長約15 μm；眼點幼蟲期生長速度變快，每天生長約20 μm；前期稚貝生長速度慢，但生長速度隨時間呈穩步增長。

2.3 不同鹽度縊蟶幼蟲前期生長的影響 鹽度對縊蟶幼蟲生長的影響如圖2所示。試驗結果表明，隨著鹽度的升高，其生長速率顯著下降（P<0.05），鹽度14組生長最快，試驗期間共生長約120 μm，增長率約116 %；鹽度21組生長緩慢，生長約50 μm，增長率約50 %；鹽度28組生長最慢，只生長約38 μm，增長率僅40 %。在試驗的第3、5、7、9天，不同鹽度組的平均殼長兩兩之間均有顯著差異（P<0.05）；在同一鹽度組中，不同試驗天數的平均殼長兩兩之間也均有顯著差異（P<0.05）。試驗結果說明，鹽度對縊蟶幼蟲前期生長存在顯著影響。

3 討論

縊蟶作為我國重要的經濟貝類，養殖規模不斷擴大，近些年規模化的人工養殖已北延至山東東營等地，發展前景十分廣闊。有關縊蟶人工繁育的試驗已有很多報道，福建、浙江在20世紀50年代就開始人工育苗試驗，但由于當時大量催產的技術未能解決，僅限于實驗室小水體育苗［12］。至20世紀70年代末，陳文龍等［13］首次采用循環水池進行縊蟶人工育苗試驗，不僅連續4年均獲成功，而且其單位水體出苗量都提高數倍；有學者采用流水刺激或冷凍刺激進行大量催產，取得了良好的效果，為人工育苗積累了寶貴的經驗［12］。該研究利用山東本地縊蟶作為親貝在東營進行了苗種生產試驗并獲得成功。在20 ℃、鹽度14培育條件下幼蟲浮游期約8 d，其中D形幼蟲期2～3 d，殼頂幼蟲期約3 d，眼點幼蟲期約2 d。浮游期間殼長平均每天增加約15 μm，至200 μm左右便可附著變態，25 d殼長便可達到600 μm的出苗規格。但北方地區的育苗有一定的局限性。北方地區縊蟶繁育催產，須充分了解當地縊蟶繁育生物學［1，14］自然繁殖習性，謹慎選擇育苗開始時間。山東萊陽地區縊蟶的盛產期是8—9月，該研究的親貝采自9月中旬，其性腺發育較好，是該研究獲得成功的重要前提。其次，北方地區自9月晝夜溫差變大，特別是進入10月后隨時都可能大幅度降溫，所以應選擇保溫性較好的育苗車間。

鹽度是海洋生物的重要環境因子。縊蟶在有淡水流入的內灣或河口附近繁殖，在此環境中，理化因子變化較大，特別是鹽度變化更為明顯，縊蟶幼蟲能生活在這樣的環境中，說明它是一種廣鹽而又略偏低鹽的種類［15］。目前，關于鹽度對海洋貝類浮游幼蟲生長的影響已有很多報道［16-21］，發現鹽度對海洋貝類浮游幼蟲生長產生了顯著影響。與縊蟶有相似生活鹽度的近江牡蠣（Crassostrea ariakensis），其在高鹽脅迫下的幼蟲生長嚴重受限［5，22］，這與該研究得出的隨著鹽度的升高，縊蟶幼蟲生長速率顯著下降結果一致。同一試驗天數，不同鹽度組平均殼長兩兩之間均有顯著性差異；同一鹽度組，不同試驗天數平均殼長兩兩之間也均有顯著性差異，這也與林筆水等［8-9］對福建地區縊蟶幼蟲的試驗結果相似。因此，在縊蟶育苗過程中，應注重培育鹽度的調整和控制，避免高鹽度對幼蟲的危害。

雖然鹽度21、28的高鹽環境導致縊蟶幼蟲生長變慢，但其殼長依然保持一定程度的生長，初步說明其具有在鹽度28甚至更高鹽度環境下生長發育的潛力。以上研究表明，縊蟶幼蟲對高鹽環境的抗性具有一定的可塑性，并且依照林筆水等［9］的研究，這種耐高鹽機制源自遺傳變異，這種機制是開展耐高鹽縊蟶育種的基礎。截至目前，我國已育成縊蟶“申浙1號”［23］和“甬樂1號”［24］兩個新品種，其分別針對生長性狀和耐低鹽性狀作為育種目標進行選留。迄今無耐高鹽新品種的報道。未來有必要開展縊蟶耐高鹽性狀的遺傳學分析，為選育耐高鹽縊蟶新品種奠定基礎。

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