一例育肥豬圓環病毒和傳染性胸膜肺炎混感的診斷分析

韋景利

（廣西壯族自治區來賓市武宣縣東鄉鎮農業農村綜合服務中心 廣西來賓 545908）

豬圓環病毒病是由豬圓環病毒引發的一種高度接觸性傳染病，該病毒主要定殖于機體的淋巴細胞，能夠引起豬群免疫抑制[1]。作為豬群的常見病，豬圓環病毒病不僅給廣大養殖戶帶來了巨大的經濟損失，還增加了豬群繼發感染和混合感染的機率。豬胸膜肺炎是由胸膜肺炎放線桿菌引起的一種典型呼吸道傳染病，該病發病率高，傳染性強。尤其是自2000 年后，該病在我國多個地區呈現出暴發流行趨勢，損失慘重[2]。當豬群免疫力低下時，該病極易趁虛而入，與其他呼吸道病原微生物發生混合感染或繼發感染，增加死亡率，增大經濟損失。筆者根據近期診治的一例豬圓環病毒和傳染性胸膜肺炎混合感染的病例情況進行分析總結，以便為相似癥狀的病例提供參考。

1 發病過程

2021 年11 月5 日，廣西壯族自治區來賓市某3 000 頭育肥豬場部分豬只突然發病，出現采食量下降、高熱，咳嗽、呼吸困難等為主要癥狀的疾病，豬群的咳嗽比例約20%左右，平均體重40～60 kg。了解得知，出現發病情況后，該養殖戶曾使用阿莫西林，慶大霉素，魚腥草等藥物進行治療，但效果不佳。經筆者對病死豬只進行病理剖檢，結合實驗室診斷結果，最終確診該豬群為豬圓環病毒PVC2 和傳染性胸膜肺炎混合感染。隨后，根據筆者的臨床疾病防控經驗及實驗室藥敏試驗結果，采取了一系列防治措施，經過14 d后豬群的病情明顯好轉。最終將該豬群的全程死淘率控制在5%。

2 臨床癥狀

發病豬只精神沉郁，體溫升高達40～42 ℃，采食量明顯下降或廢絕，被毛松亂，皮膚蒼白，擁擠聚堆，不喜走動，流膿性鼻涕，呼吸困難，咳嗽、呈明顯的腹式呼吸，眼瞼水腫，眼結膜潮紅，呈犬坐姿勢。在患病豬只的耳朵、頸部及背部皮膚表面可見出血斑塊。個別豬只不表現任何明顯的癥狀，突然死亡。病死豬只的鼻腔和口腔內有大量的泡沫樣血液流出。

3 病理變化

將部分病死豬只進行病理剖檢，剖檢發現病死豬只病理變化基本相似，主要病理特征為：血凝不良，全身淋巴結腫大，特別是縱膈淋巴結和腹股溝淋巴結充血腫脹明顯，淋巴結切面濕潤，有大量渾濁液體流出。氣管支氣管周圍有大量炎性細胞浸潤，肺臟病變嚴重，大面積充血腫脹，肺泡擴張，心葉、間葉、膈葉出現紫紅色壞死灶，質地堅硬，邊緣鈍圓，肺間質增寬。胸腔積液呈淡黃色，胸膜變厚，表面彌散性附著黃白色纖維素樣滲出物，滲出嚴重病例，造成肺臟，胸膜，心包粘連。腎臟蒼白貧血，腫大，腎皮質有不同大小的壞死點，肝臟，脾臟，膽囊腫脹，出血。

4 實驗室診斷

結合臨床癥狀和病理變化，初步診斷為豬胸膜肺炎和其他病毒性疾病混合感染。隨后，采集病死豬只的肺臟、淋巴結和血液送檢，分離血清，通過PCR（聚合酶鏈式反應）檢測技術，分別進行了豬偽狂犬、豬圓環病毒病、豬繁殖與呼吸障礙綜合癥病毒鑒定；同時進行了細菌分離培養，及染色鏡檢；最后進行藥敏試驗。

4.1 病毒鑒定

分別采集發病豬場10 頭病死豬只的肺臟、淋巴結、脾臟、血液等病料加入適量的DMEM 后剪碎研磨，勻漿10 000 rpm，離心取上清，置于-80 ℃冰箱保存。參照所使用的試劑盒的說明書步驟進行病毒的DNA 提取，以提取得到的DNA 為模板，分別加入含豬偽狂犬、豬圓環病毒病、豬繁殖與呼吸障礙綜合癥病毒、豬胸膜肺炎引物的反應體系，加入待檢樣品DNA 模板，按照PCR 方法進行病毒基因片段擴增，擴增產物置于1%的瓊脂糖凝膠電泳上跑膠，最后使用紫外凝膠成像儀器進行結果分析。經過上述PCR 檢測，結果顯示：豬偽狂犬與豬繁殖與呼吸障礙綜合癥病毒呈陰性，瓊脂糖凝膠電泳上出現豬圓環病毒引物、豬胸膜肺炎的引物對應大小的條帶，表明樣品PVC2、豬胸膜肺炎結果呈陽性，陽性率分別為80%和90%。詢問得知，該養殖場從未進行豬圓環病毒疫苗免疫，因此推斷該場豬群此次為野毒感染[3]。

4.2 細菌分離培養

無菌操作采集患病豬只的肺臟和淋巴組織，接種于巧克力瓊脂平板和含有5%山羊血的鮮血瓊脂平板上，置于37 ℃恒溫箱中培養36 h 后，仔細觀察菌落的生長狀態，發現無溶血現象的發生，菌落表面光滑，半透明狀，呈“衛星狀”生長。無菌操作挑取單個菌落涂片，經過革蘭氏染色后鏡檢，可看見革蘭氏陰性絲狀及球桿狀短小桿菌，無芽孢，確診為豬傳染性胸膜肺炎陽性，結果與PCR 結果一致。

4.3 藥敏試驗

檢測分離株對所選6 種藥物的敏感性，在細菌分離培養基的平板表面貼上頭孢氨芐、阿莫西林、頭孢噻肟鈉、氟苯尼考、替米考星、阿奇霉素藥敏片，置于37 ℃恒溫箱中培養24 h 后，測量抑菌環的直徑，以此判斷藥物的敏感性，為治療藥物的選擇提供依據。藥敏試驗結果顯示氟苯尼考的抑菌圈最大，抑菌圈直徑均〉23 mm，表明其對本次分離到的豬傳染性胸膜肺炎高度敏感；阿莫西林、頭孢噻肟鈉和替米考星次之，抑菌圈直徑在15～19 mm 之間，中度敏感；阿奇霉素抑菌圈直徑為0，表明其對本病不敏感。

根據現場調查，結合臨床癥狀及病理剖檢變化以及上述實驗室檢測結果，確診該豬場為豬圓環病毒PVC2 和傳染性胸膜肺炎混合感染。

5 防治方案

根據實驗室確診結果，為本豬場制定了如下疾病處理方案：

5.1 緊急接種

豬只全群使用豬圓環病毒PVC2 基因工程滅活疫苗，進行緊急免疫接種，免疫順序為先健康豬，后患病豬，最后發病嚴重豬。為防止免疫過程中出現應激，接種前中后3 d 在飲水中加入多維和黃芪多糖類保健藥物，提高豬群的整體抗應激能力。

5.2 治療用藥

對于發病豬群進行對癥治療，對于表現高熱癥狀的豬群，肌肉注射氨基比林，劑量5～10 mL，1～2 次/d，連用3～5 d，緩解高熱癥狀。結合藥敏試驗結果，選擇20 mg/kg·bw 氟苯尼考搭配0.2 mL/kg·bw 黃芪多糖注射液進行配合治療，1 次/d，連用7 d。同時在豬群日糧中添加氟苯尼考、黃芪多糖粉劑和卡巴匹林鈣，劑量參考使用說明，飲水中添加多維和電解質，增強豬群整體的抗病能力。

5.3 加強飼養管理

根據外界氣溫變化，在確保豬舍溫度的前提下，及時調整豬舍的通風量，減少舍內氨氣、硫化氫等有害氣體含量，增大舍內氧氣供給；靜默生產，盡量避免驅趕豬群，以免造成豬群應激；對于發病的豬舍采取隔離管理，每天用1:200 的過硫酸氫鉀帶豬噴霧消毒，及時清掃舍內糞便及污物，保持舍內環境清潔[4]。對病死豬只采用深埋等無害化處理方式進行處理。

使用上述方案對患病豬群進行治療至第7 天時，患病豬群體溫恢復正常，采食量逐漸上升，14 d 后豬群精神狀況恢復，死亡率得到有效控制，沒有繼續出現發病狀況；同時對于未發病的棟舍采用上述方法進行了保健預防。

6 討論

細菌、病毒、寄生蟲等各類病原微生物的存在，嚴重制約著養豬業的飛速發展，減少和消滅各類病原微生物對豬群的危害，受到廣大科技工作者和養豬從業者的廣泛關注。近年來，豬群發病多呈現混合感染的態勢，感染后表現的臨床癥狀十分復雜[5]，增加了診斷難度。對于該病防治的關鍵在于早發現、早確診，病原明確后，采取針對性預防和治療措施，才能有效控制該病的發生。

結合該養殖戶豬群此次發病情況來看，主要是由于該場區免疫程序設置不合理，豬圓環病毒PVC2 疫苗免疫缺失，導致豬群抗體水平低下，極易受到野毒攻擊而發病。加之本豬場內生物安全防控體系不健全，日常飼養管理水平低下，造成發病豬舍內飼養環境較差，氨氣味重，豬群密度高，養殖戶日常消毒意識較差，病原微生物在豬舍內頻繁滋生，從而導致了豬傳染性胸膜肺炎繼發感染的發生。

筆者認為要杜絕該病的發生，首先必須要加強廣大養殖戶的標準化養殖意識，根據本地區和本場的實際情況制定科學合理的免疫程序，嚴格執行免疫操作。其次，飼養管理水平低下是導致繼發感染的主要誘因，這就要求廣大養殖戶在日常飼養過程中務必重視豬舍內的飼養管理工作，保證豬舍內飼料、飲水供應充足，溫濕度適宜，通風良好，將日常帶豬消毒工作落到實處，盡量減少豬舍內各類病原微生物的含量，將發病風險降到最低。最后，混合感染性疾病的臨床癥狀復雜，單純依靠臨床癥狀和病理剖檢特征很難找到真正的致病源，因此，對于混合感染性疾病的確診必須要依靠實驗室診斷技術手段，明確病原，對癥治療。對疾病的治療不得盲目用藥，以免導致耐藥菌株和藥物殘留的出現，可以采用藥敏試驗選擇高敏感性抗菌藥。

綜上所述，只有采取綜合防治措施，從免疫接種、生物安全防控、加強飼養管理等各個環節著手，才能極力避免豬圓環病毒PVC2 和傳染性胸膜肺炎混合感染的發生。