妊娠婦女高危型人乳頭瘤病毒感染特點及基因分型

樊 榮,王雪梅

(北京市通州區中西醫結合醫院 1.病理科;2.婦產科,北京101100)

子宮頸癌在女性常見惡性腫瘤中發病率居第二位,人乳頭瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染是導致宮頸癌的主要原因,其中高危型人乳頭瘤病毒持續感染是引起宮頸癌的最主要原因。隨著HPV在女性中感染率的增加,妊娠期婦女感染HPV的患者在逐年上升。國外文獻報道妊娠期HPV感染在5.5%～65%,平均為24%[1]。國內有研究顯示HPV的感染率為13.42%[2]。另有報道妊娠期子宮頸癌的患病人數占妊娠總人數的1.5/10萬～12/10萬,是妊娠期間最常見的惡性腫瘤[3]。目前,對妊娠期宮頸癌臨床篩查和預防不到位,積極監測高危型HPV分布及其亞型流行情況,對妊娠期宮頸癌防治具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 臨床資料

收集251例妊娠婦女臨床資料,其中18～25歲患者67例,26～35歲患者168例,36～45歲患者16例;所有患者均有性生活史,沒有宮頸病變手術史及其他惡性腫瘤疾病史,均處于妊娠狀態。

1.2 主要試劑與儀器

DNA提取試劑盒、熒光定量PCR試劑盒均購至上海之江生物技術有限公司;AUTRAX全制動核酸提取儀購至上海之江生物技術有限公司;醫用核酸擴增儀購買自上海宏石公司;超速離心機購買自貝克曼庫爾特公司。

1.3 HPV檢測與分型

醫護人員用窺陰器暴露宮頸,用無菌棉拭子將宮頸口過多的分泌物擦去,取出專用宮頸刷置于宮頸口,單向旋轉4-5圈以獲得足量的上皮細胞樣本,然后將宮頸刷頭部放入含有3 ml宮頸細胞保護液的樣本瓶中,4℃保存待測。24 h內對樣本進行高危型HPV檢測及基因分型。

1.3.1DNA提取 將樣本放入AUTRAX全制動核酸提取儀中進行DNA提取。

1.3.2PCR擴增 將AUTRAX全制動核酸提取儀中完成的總反應體系管放PCR擴增儀,PCR擴增條件：94℃ 2 min預變性,93℃ 10 s變性、62℃ 31 s退火和延伸,經40個循環。

1.4 統計學分析

收集患者臨床資料,包括患者年齡、性生活次數等,采用統計學分析軟件SPSS25.0對數據進行統計學分析。P<0．05判定為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同年齡妊娠婦女高危型HPV感染情況

251例妊娠患者,感染高危型HPV患者39例,感染率15.54%。18～25歲、26～35歲、36～45歲妊娠婦女HPV感染率分別為6.0%、19.05%、18.75%。其中26～35歲妊娠婦女高危型HPV感染率最高,36～45歲感染率次之(χ2=6.889,P<0.05)。年齡是影響妊娠婦女高危型HPV感染的因素。

2.2 不同性生活特征妊娠婦女高危型HPV感染情況

首次性生活年齡<18歲、性伴侶個數為2個及以上、性生活次數3次/周以上的妊娠婦女高危型HPV感染率明顯高于其他患者(P<0.05),首次性生活年齡、性伴侶個數、性生活頻率都是影響妊娠女性高危型HPV感染的因素,見表1。

表1 不同性生活特征的妊娠婦女高危型HPV感染情況

2.3 不同妊娠和分娩方式妊娠婦女高危型HPV感染情況

妊娠次數<2次、≥2次患者數分別為176和75例,高危型HPV感染數為21例和18例,感染率分別為11.93%和24.0%(χ2=5.836,P<0．05)。分娩方式為自然生產和剖宮產患者分別為197例和54例,感染數為27例和12例,感染率分別為17.78%和33.33%,(χ2=2.342,P>0．05)。妊娠次數是影響妊娠婦女高危型HPV感染的因素。

2.4 不同妊娠階段中妊娠婦女高危型HPV感染情況

妊娠早期(≤12周)高危型HPV感染者15例,感染率為14.88%;妊娠中期(>12周且≤27周)高危型HPV感染者20例,感染率為24.39%;妊娠晚期(≥28周)高危型HPV感染者4例,感染率為36.36%;(χ2=6.986,P<0.05)。妊娠中、晚期是影響妊娠婦女高危型HPV感染的因素,見表2。

表2 不同妊娠階段妊娠婦女高危型HPV感染情況

2.5 不同經濟狀況及受教育程度妊娠婦女高危型HPV感染情況

月收入≤2800元和>2800元患者分別為118和133例,感染數分別為25和14例,感染率分別為21.19%和10.53%,差異有統計學意義(χ2=5.141,P<0．05)。大學以下學歷、大學以上學歷患者數分別為139和112例,高危型HPV感染數分別為28和11例,感染率分別為20.14%和9.82%,(χ2=5.036,P<0．05)。經濟狀況和受教育程度是影響婦妊娠婦女高危型HPV感染的因素。

2.6 基因分型

251例妊娠婦女,感染高危型HPV者39例,感染率15.53%。對39例感染高危型HPV患者進行基因分型,結果表明,妊娠婦女高危型HPV單一感染率為71.79%,多重感染率為28.21%。單一高危型HPV感染類型中,52型感染率64.3%(18例),其次是58型感染率為35.7%(10例)(P<0.05);多重高危型HPV感染類型中,二重感染率63.64%,三重感染率36.36%,P<0.05,見表3。

表3 妊娠婦女高危型HPV感染情況

3 討論

女性一般自18歲左右趨于成熟,歷時約30年。此時為卵巢生殖功能與內分泌功能最旺盛時期。在此期間,身體各部分發育成熟,出現周期性的排卵及行經,并具有生育能力。通常從40歲以后,女性卵巢功能開始衰退,機體對HPV清除能力減弱,陰道內微生態平衡功能減弱,進而導致宮頸上皮內瘤變、甚至宮頸癌的可能性增加[4]。因此,不同年齡女性對HPV清除能力存在差異。本研究調查結果顯示,不同年齡段妊娠婦女均有HPV感染發生,其中以26～35歲者居多,其次是36～45歲妊娠者。26～45歲的女性性行為相對較頻繁,可能有多個性伴侶,導致該群體患者更容易發生HPV感染[5]。除年齡外,不同性生活特征、不同妊娠階段和分娩特點都也是影響妊娠女性發生HPV感染的主要因素。首次性生活年齡較早的患者,性激素分泌水平增加,過早性行為和活躍的性生活,會導致HPV感染可能性增加[6]。因此,為了減少HPV感染,需要積極的安全教育宣傳,減少過早性行為。同時性伴侶個數以及性生活次數也是影響妊娠女性發生HPV感染的主要因素,性伴侶個數增多,發生交叉感染可能性增加;頻繁的性生活,可能改變患者自身免疫系統,降低患者自身對HPV清除能力,還可能使潛伏的HPV感染復發。本研究結果顯示隨著妊娠次數的增加,宮頸受損程度增加,亦增加HPV易感性;妊娠次數≥2次,其妊娠期發生HPV感染率明顯增高,以上結果與文獻報道一致以上結果與文獻報道一致[7];有文獻報道行剖宮產分娩者感染率高于自然生產患者以上結果與文獻報道一致[7],本研究結果顯示兩者無差異,可能是樣本量少導致數據有差異;因此臨床中應關注多次妊娠的婦女,積極監測HPV感染情況,及時進行管理,及時發現其他疾病的可能性。在妊娠期中胎盤分泌大量雌孕激素、絨毛膜促性腺激素、胎盤生乳素等均可抑制母體免疫應答,母體呈現出自然的免疫耐受或免疫無應答狀態,母體抵抗病毒能力下降[8]。有研究結果顯示,不同區域及人種中妊娠期HPV感染發生率差異較大(5.4%～68.8%),在妊娠中晚期感染率較高[9-10]。本研究調查結果顯示妊娠晚期HPV感染率為36.36%,明顯高于妊娠早期和中期。受教育程度較低的妊娠婦女HPV感染率明顯高于其他患者,這可能與患者長期衛生習慣差、知識缺乏、對性行為衛生不重視有關。同時,經濟狀況較差者感染率明顯高于其他患者,這與患者生活的營養條件、洗浴條件、HPV感染篩查不及時、衛生保健用品購買能力等有關[11]。

在妊娠期,因免疫力低下,抗病毒感染能力下降,HPV復制表達活躍,致使HPV母體感染率均高于非孕期,如同時有妊娠合并癥(妊娠合并糖尿病等),感染率增加[12]。除免疫狀態之外,妊娠期盆腔充血、生殖系統血供豐富,陰道分泌 物增加等也是孕期 HPV等病原體生長的極有利條件。本研究調查結果與相關研究結果一致[13],妊娠婦女高危型HPV單一感染率比多重感染率顯著增高;單一高危型HPV感染類型中,以52型為主,其次是58型、16型;多重高危型HPV感染類型中,二重感染率顯著高于三重感染率。有研究報道孕婦HPV感染可能導致了早產、胎膜早破、胎兒生長受限,與不良母嬰結局具有一定相關性[14]。妊娠期HPV感染可以發生母嬰傳播,據國外文獻統計,孕期HPV感染母嬰傳播率為4%～79%不等[15]。Wu等[16]報道妊娠期中國婦女子宮頸異常細胞檢出率為8%～12%。妊娠期婦女CIN 發病率約為 1.3‰～2.7‰[17],有研究表明 CIN 2/3的孕婦罹患子宮頸癌的風險是正常人群的2～5倍[18]。因此,妊娠期人乳頭瘤病毒(HPV)感染應得到臨床的重視。