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香菇菌棒集約化生產技術規程

2023-07-18 11:24:12董浩然章爐軍宋春艷尚曉冬于海龍
上海農業學報 2023年3期

周 峰,董浩然,章爐軍,李 玉,姜 寧,宋春艷,尚曉冬,譚 琦,于海龍

(上海市農業科學院食用菌研究所,農業農村部南方食用菌資源利用重點實驗室,國家食用菌工程技術研究中心,上海市農業遺傳育種重點開放實驗室,上海 201403)

香菇(Lentinula edodes)又名花蕈、香信、冬菰、椎茸等,屬真菌界、擔子菌門、傘菌綱、傘菌目、光茸菌科、香菇屬。 因其香氣濃郁,口感滑嫩,兼具營養、保健和藥用價值,深受消費者喜愛[ 1]。 香菇是我國生產量和消費量最大的食用菌,據中國食用菌協會統計,2021 年我國香菇總產量達1 295.72 萬t,占全國食用菌總產量的31.34%。 香菇產業作為我國精準扶貧和鄉村振興的重要抓手,近年來得到飛速發展,目前生產模式逐步由“一家一戶”的小農戶模式向機械化、設施化、集約化的生產模式轉變[ 2]。 我國幅員遼闊,各地生態氣候及設施水平差異較大,而香菇菌棒生產環節工藝繁雜、技術難度大、標準化程度低,造成香菇菌棒質量一致性差別大、菌棒污染時有發生,這大大增加了后期出菇管理的難度和成本,降低了出菇管理的一致性[ 3]。 鑒于此,本研究對香菇菌棒集約化、設施化生產關鍵技術進行了詳細介紹,以期為香菇“設施化制棒、生態化出菇”模式[ 4]菌棒集中制棒環節的進一步規范化推廣提供借鑒和指導,促進香菇產業轉型升級。

1 廠區選址及布局

香菇菌棒工廠的選址,應地勢平坦,排灌方便,交通便利。 為降低污染風險,工廠周圍要求無生活垃圾堆放或填埋場,無雞舍、豬舍等畜禽養殖場,無工業固體廢棄物和危險廢棄物堆放或填埋場等。 環境要求符合GB 3095 中環境空氣二類區質量要求以及NY∕T 528 和NY∕T 5010 中對產地環境的規定。

根據香菇菌棒生產工藝,廠區宜規劃有木屑堆場、原輔料倉庫、攪拌區、裝袋區、滅菌區、冷卻區、接種區、培養區、冷庫、鍋爐房、空調機房等。

2 設施設備

木屑堆場、原料倉庫、攪拌區、裝袋區和滅菌區多采用半封閉式廠房。 根據生產規模配備堆場面積,一般1 000 m2堆場可堆放木屑500 t 左右。 木屑堆場除需排水方便,避免積水導致底部木屑發酸發臭外,還應配備污水處理池和污水處理裝置,處理過的水達到環保要求方可排放,亦可再次利用,用來預濕木屑。 原料倉庫、攪拌區、裝袋區和滅菌區地面應保持清潔,無雜物、無積水,生產過程中及時清理散落料;生產結束后及時清理攪拌鍋、傳送系統和裝袋機內的剩料,避免培養料在機器上結塊發霉,滋生雜菌。

冷卻區、接種區和培養區采用全封閉式廠房,能夠對溫度、濕度、通氣和光照等環境條件進行人工調控。冷卻區和接種區等凈化車間應符合GB 50073 規定的要求。 鍋爐房與建筑物的距離不小于安全距離。

整場區應配有磅秤、攪拌機、自動∕半自動裝袋機、環保蒸汽鍋爐、高壓蒸汽滅菌器、接種機、環境控制系統、鏟車、叉車等設備;壓力容器應經有關部門檢驗合格,符合GB∕T 150 要求;除上述設備外還應配備備用電源。

3 品種選擇

香菇菌種應從具有品種選育或授權品種使用資質的供種單位引種,且種性清楚。 引種后進行適應性出菇試驗,選用適合當地氣候特點和生產模式,高產、優質、抗逆性強的香菇品種。 根據養菌周期,目前主栽的有中短菌齡和中長菌齡品種。 中短菌齡品種養菌周期為90—100 d,菌絲能耐受較高濃度的CO2(0.4%—0.6%),菌棒易起瘤狀物;小溫差刺激即可出菇,菌棒轉潮快,產量高,但子實體易爆出,菇蕾數量多,栽培后期需要疏蕾,因此養菌期間需提前刺孔且刺孔數量多,代表品種有‘滬香F2’‘滬香F3’‘滬香F6’‘滬香F7’‘遼撫4 號(0912)’等。 中長菌齡品種養菌周期為110—130 d,菌絲不耐受高濃度的CO2(0.1%—0.3%),養菌時需加強通風,菌棒不易起瘤狀物;出菇時需要較大的溫差刺激,產量相對較低,但菇型大,菇蓋厚,菇質好,售價高,代表品種有‘申香215’‘L808’等。

4 栽培基質

4.1 原輔料種類及質量

栽培基質是香菇賴以生存和繁殖的基礎,栽培基質的種類、質量和配比對香菇生長發育具有重要作用,栽培基質的顆粒度、透氣性、酸堿度和含水量等理化特性,也是影響香菇生長的重要因素,對香菇產量和質量均有較大的影響[ 5]。

4.1.1 主料

主料是培養基質中質量占比大、以滿足香菇生長發育所需碳源為主要目的的原料。 香菇是木腐性食用菌,木屑是香菇栽培最主要的碳源之一,栽培基質中木屑含量占比高達75%以上[ 6]。 研究表明,不同樹種栽培香菇,其產量、品質差別較大,出菇期也有先后[ 7]。 從利用效果和經濟價值觀察,應采用殼斗科的栲屬、櫟屬、青岡屬、栗屬、水青岡屬、石櫟屬,金縷梅科的楓香屬、蕈樹屬、蚊母樹屬、水絲梨屬,樺木科的榿木屬,杜英科的杜英屬,漆樹科的漆樹屬,胡桃科的化香樹屬,五加科的鵝掌柴屬,榛科的鵝耳櫪屬,豆科的黃檀屬等硬質闊葉樹種[ 8];不應采用香樟、桉、槐、苦楝等含有害物質的闊葉樹種。 含有松節油、萜烯類等有機物質的松、杉、柏等針葉樹種的木屑應堆置6 個月以上[ 9]。 如使用楊樹等速生軟質闊葉樹種,添加比例不宜過多。 蘋果、桃、核桃、桑等樹種及竹類亦可使用[ 10-14]。

木屑應無霉爛、無結塊、無異味、無木條和石塊等雜質、無油污等化學污染;入場時木屑含水率不高于40%;木屑的顆粒度直接影響栽培基質的通氣性和持水性,木屑顆粒太小,栽培基質孔隙度小,通氣性差,影響菌絲生長,從而影響菇蕾的分化和子實體發育;木屑顆粒太大,栽培基質孔隙度大,通氣性好,持水性變差,前期菌絲生長速度快,但水分容易喪失,影響菌絲和子實體生長發育,從而影響香菇的產量和質量。 此外,木屑顆粒度過大,菌絲降解吸收時間長,會延長發菌和出菇周期,同時,粗木屑也容易刺破菌袋,造成污染。木屑顆粒度大小以0.5—1.5 cm 為宜[ 3](圖1)。

圖1 木屑顆粒度Fig.1 Sawdust particles

主料配比可根據當地資源情況,用稻草、麥秸、玉米芯、玉米秸、高粱秸、棉籽殼、廢棉花、棉花秸稈、豆類秸稈、花生秸稈和花生殼、甘蔗渣等農作物下腳料,以及糠醛渣、酒糟、醋糟等原料,部分替代木屑進行香菇栽培,但需提前進行出菇試驗,添加量一般不超過木屑的20%—30%。

4.1.2 輔料

輔料主要有麩皮、米糠、玉米粉、石膏、石灰和碳酸鈣等。 麩皮、米糠、玉米粉要求新鮮、潔凈、干燥、無蟲蛀、無結塊、無霉變、無異味、無雜質,水分含量不超過14%。 水、麩皮、米糠、玉米粉、石膏等應分別符合GB 5749、NY∕T 119、NY∕T 122、GB∕T 10463 和GB∕T 5487 的規定,其他原料要求應符合NY 5099 和NY∕T 5010 的規定。 生產上多使用大片麩皮,因其透氣性好;米糠脂肪含量高,容易酸敗,儲存時間不宜過長;玉米粉一般購買玉米粒自行粉碎,粉碎后盡快使用,避免積壓變質。 石膏宜使用熟石膏;石灰則宜使用生石灰;碳酸鈣宜使用輕質碳酸鈣。

4.2 原輔料儲存

4.2.1 木屑

經檢驗合格的木屑堆放于有防雨設施的木屑堆場;新鮮木屑應及時使用,如不能及時使用,需加水預濕,堆制發酵10 d 以上。 可直接澆水預濕(圖2),將木屑攤平,厚度為30—40 cm,澆水至水從底部流出,然后建堆;亦可將木屑放入攪拌鍋加水預濕(圖3),加水至木屑含水量50%—60%,攪拌15 min 左右,然后建堆。 攪拌鍋預濕能節省水資源,且更均勻一致。 堆制有利于軟化木屑,增加木屑持水性,降低裝袋時形成微孔的概率。 堆制過程中每隔5—10 d 補水翻堆(圖4),進行好氣發酵,防止厭氣發酵導致木屑酸敗,影響香菇菌絲生長。 翻堆亦有利于提高木屑理化性質的一致性。

圖2 澆水預濕Fig.2 Watering prewetting

圖3 攪拌預濕Fig.3 Mixing prewetting

圖4 補水翻堆Fig.4 Water replenishment and pile turning

4.2.2 其他原輔料

麩皮、米糠、石膏等其他原輔料應儲存在干燥、陰涼、通風、衛生的倉庫中(圖5)。 材料與地面用墊倉板隔離,預防堆積發熱。 注意防蟲、防鼠、防潮,不應和有害、有毒貨物一起儲存,嚴防污染。

圖5 原輔料倉庫Fig.5 Raw materials warehouse

5 料棒制作

5.1 栽培配方

推薦使用配方:配方1,櫟木屑78%,麩皮20%,石膏2%,含水量50%—55%,滅菌前pH 6—7;配方2,櫟木屑39%,蘋果木屑39%,麩皮20%,石膏2%,含水量53%—58%,pH 6—7。 在栽培配方的選取上需考慮原材料來源、出菇模式和市場需求等影響因素。 國內出菇模式一般出4—6 潮菇,配方1 生產的菌棒出菇后勁足,產量高,適合自建基地出菇和針對國內市場需求的菌棒供應模式;配方2 生產的菌棒產量主要集中在前2 潮,適合工廠化和周年化出菇,主要針對國外市場菌棒需求,一般出2 潮菇。

5.2 栽培基質制備

按計劃生產數量和配方中各原料的比例準確稱取重量,按照先主料、后輔料的原則順序投料。 利用攪拌機進行兩次攪拌,分別為干拌(一次攪拌)(圖6)和濕拌(二次攪拌)(圖7)。 一次攪拌時投料后先不加水,此時原料黏度低,分散性好,容易攪拌均勻,攪拌時間一般為10—15 min;二次攪拌是在一次攪拌結束后,向培養料中加水直至所要求的含水量,邊加水邊攪拌,攪拌時間為30—60 min。 根據木屑種類和顆粒度,基質含水量50%—58%,以滅菌后料棒不積水為宜。 栽培基質滅菌前pH 為6—7,滅菌后pH 為5.3—5.8 為佳。

圖6 一次攪拌Fig.6 Primary mixing

圖7 二次攪拌Fig.7 Secondary mixing

5.3 裝袋

菌袋折徑主要有15 cm、16 cm、17 cm、18 cm 和20 cm 等規格,菌袋長度一般為55—60 cm。 采用半自動裝袋機(圖8)或全自動裝袋機(圖9)裝袋。 裝袋要求料棒緊實,以折徑17 cm 的菌袋為例,菌棒長度為(40 ±1) cm,裝濕料重為(2 800 ±100)g。 填料結束后機械扎口,要求袋口扎緊不漏氣。 扎口后在接種孔附近扎1—2 個排氣孔(圖10),貼上透氣膠帶。 菌棒碼放之前需通過眼觀、手摸等方式檢查菌棒是否有微孔,發現微孔后需用透明膠帶或透氣膠帶粘貼。 料棒碼放至滅菌小車時,上下層菌棒呈“品字”擺放,最底層料棒的排氣孔需斜45°朝下,上層料棒的排氣孔正面朝下,排氣孔均朝向空隙處,避免排氣孔被堵住,否則高壓滅菌時容易脹袋破損,或冷凝水進入料棒,形成水袋。 菌棒擺放超過5 層,每隔兩層須取出2—3 個菌棒,有利于滅菌蒸汽的流動和熱量傳導(圖11)。

圖9 全自動裝袋機Fig.9 Automatic bagging machine

圖10 排氣孔Fig.10 Exhaust hole

圖11 菌棒碼放Fig.11 Stacking method

6 料棒滅菌及冷卻

6.1 滅菌

裝好的料棒要及時滅菌,以避免培養基質因細菌大量滋生而酸化,從加水攪拌至裝袋結束開始滅菌,4 h 之內完成為宜。 目前一般采用高壓蒸汽滅菌(圖12),滅菌時,料棒升溫比滅菌鍋內空氣升溫滯后60—90 min,因此應在100—105 ℃保持60 min 以上,待料溫與滅菌鍋溫度趨于一致時,再升至滅菌溫度。滅菌溫度為112—119 ℃,保持330 min 以上(圖13)。 滅菌時需檢查排氣閥工作是否正常,鍋內冷空氣排氣不暢,易滅菌不徹底。

圖12 高壓蒸汽滅菌鍋Fig.12 Autoclaves

圖13 滅菌溫度曲線Fig.13 Sterilization temperature curve

6.2 冷卻

滅菌結束后,及時打開高壓滅菌鍋的爐門,待滅菌鍋內溫度降至80 ℃左右時,及時出鍋。 若出鍋不及時,料棒在滅菌鍋內長時間保持高溫,易造成栽培基質營養損失,基質pH 下降,不利于菌絲生長。 料棒出鍋后轉移至冷卻間,進行一次冷卻(一冷)和二次冷卻(二冷)。 一冷又稱風冷,采用通入高效過濾的新鮮空氣將料棒冷卻至50 ℃左右。 二冷又稱強制冷卻,采用制冷風機進行快速降溫,料棒溫度冷卻至26 ℃以下可以接種。 冷卻間凈化等級為萬級。

7 接種

7.1 接種室要求

接種室凈化等級為萬級,接種區域為百級。 員工應穿戴專用連體無塵服、高筒無塵鞋、一次性口罩及醫用手套,風淋后方可進入潔凈區。 每天接種工作結束,接種機的相關部件須拆卸清洗干凈,接種室打掃干凈后,使用新潔爾滅、次氯酸鈉、二氯異氰尿酸鈉或三氯異氰尿酸等消毒液對地面進行消毒,清理的垃圾及時帶出凈化車間。 下班后每天按時進行臭氧消毒,消毒時長為60—120 min。

7.2 菌種質量要求

可使用固體菌種(圖14)或液體菌種(圖15)進行接種。 固體菌種應符合GB 19170 的質量要求,菌種袋表面完整,無破損,封口處干燥潔凈,棉塞或塑料蓋上無污染,松緊適度;培養基邊緣未與容器分離,培養基顏色正常;菌絲長滿容器,潔白濃密,形態均勻,無雜菌菌落,無拮抗線,無高溫抑制線,無原基,允許有少量褐色水珠;無菌條件下檢查無酸臭或霉變異味。 接種前一天使用新潔爾滅、次氯酸鈉、二氯異氰尿酸鈉、三氯異氰尿酸或高錳酸鉀等消毒液進行表面消毒,擦干后將菌種放入菌種預處理間備用。 液體菌種,應菌液澄清透明,無渾濁;大量菌球、菌絲片段均勻懸浮于液體中,菌球形態為球狀、絲狀或叉狀,靜置不迅速分層;有香菇液體菌種特有的香氣,無酸、臭等異味;菌球濕重0.1—0.2 g∕mL,菌球體積比≥85%,菌液pH 3.0—4.0。

圖14 固體菌種Fig.14 Solidspawn

圖15 液體菌種Fig.15 Liquidspawn

7.3 接種

宜采用接種機接種(圖16、圖17 和圖18),接種前對接種機、傳送帶、操作人員雙手、固體菌種外袋或液體菌種接種管道進行全面消毒。 固體菌種一般接3—4 孔,接種深度3.5—5.0 cm,每孔接種15—20 g;液體菌種一般接5—6 孔,接種深度5.0—9.0 cm,每孔接種5—10 mL。 接種后使用透明膠帶或外套袋封住接種孔,然后移至培養庫房進行養菌。

圖16 單工位固體接種機Fig.16 Single-station solid spawn inoculation machine

圖17 四工位固體接種機Fig.17 Four-station solid spawn inoculation machine

圖18 雙工位液體接種機Fig.18 Double-station liquid spawn inoculation machine

8 菌棒培養及管理

8.1 培養室要求

菌棒培養室應保持干凈、干燥、通風、避光。 使用前48 h,地面清洗,晾干后噴灑新潔爾滅、次氯酸鈉、二氯異氰尿酸鈉或三氯異氰尿酸等消毒液對地面進行消毒,使用前24 h 進行臭氧或煙熏消毒。 通風窗應安裝防蟲紗網。 菌棒入庫前通風,無異味后入庫培養。

8.2 培養條件

菌棒培養室環境溫度一般控制在21—24 ℃,菌棒料內中心溫度不超過26 ℃,CO2濃度控制在0.35%以內,空氣相對濕度保持自然。

8.3 培養流程

8.3.1 菌棒前期培養

菌棒接種后15 d 內,菌絲慢慢恢復,逐漸吃料蔓延,菌絲生物量和發熱量均較小,將菌棒“品字”碼放于培養架上進行發菌(圖19);以折徑17 cm 的菌棒為例,擺放密度約200 棒∕m2。 此階段避光培養,室溫控制在22—24 ℃,促使菌絲萌發。

圖19 菌棒前期培養Fig.19 The pre-culture of Xianggu artifical bed-log

8.3.2 菌棒中期培養

菌棒培養13—15 d 后,當接種孔菌圈直徑為6—8 cm 時,菌絲進入快速生長階段,菌棒發熱量增加,需撕掉透明膠帶或脫去外套袋,將菌棒轉至層架上呈“井字”碼放(圖20)或網格架(圖21)上進行培養,以折徑17 cm 的菌棒為例,擺放密度約140 棒∕m2;菌圈直徑10—15 cm,接種孔背面能看到菌絲時,進行一次刺孔(小刺),每個接種口刺孔5—10 個,孔深1.0—2.0 cm,可采用手工和機器刺孔(圖22);菌棒滿袋后5—10 d,根據品種特性和瘤狀物情況,進行二次刺孔(大刺),二刺一般為機械刺孔,每棒刺孔6—12 排,每排6—8 個,孔深3.0—5.0 cm,刺孔應排列整齊,間距均勻(圖23)。 此階段避光培養,因菌棒發熱量大,尤其刺孔后1—2 d,棒溫比室溫高2—4 ℃,需嚴格控制培養室溫度,室溫一般控制在21—22 ℃。

圖20 層架碼放培養Fig.20 Shelf stacking cultivation

圖21 網格架培養Fig.21 Grid rack cultivation

圖22 一次刺孔(小刺)Fig.22 The first oxygenation

圖23 二次刺孔(大刺)Fig.23 The second oxygenation

8.3.3 菌棒后期培養

從刺孔完成至菌棒成熟階段。 二刺增氧后,需提供光照促進菌棒轉色,光照強度為50—200 lx,光質一般可選白光(RBG)或藍光(B),每天光照時間不少于12 h。 菌棒轉色期間棒溫一般比室溫高2—3 ℃,室溫應控制在21—22 ℃為宜;轉色結束后菌棒呼吸減弱,發熱量減少,棒溫一般比室溫高0.5—1.0 ℃,室溫應控制在23—24 ℃為宜。

8.4 菌棒成熟度判斷指標

根據品種特性,不同菌株應達到其品種要求的菌齡方可脫袋出菇。 香菇菌棒成熟度判定指標主要有手感、pH、外觀和氣味等。 手感方面主要表現為菌棒富有彈性,質地由軟變硬,菌袋與菌棒呈分離狀,此時pH 一般降至3.5—4.0;外觀方面主要表現為菌棒轉色均勻,菌皮呈紅棕色或深褐色(圖24),菌棒散發出香菇菌絲特有的香味,無腐爛味,無異味。 可提前5—10 d 取10—30 個菌棒進行出菇試驗,觀察菌棒出蕾情況,幫助判斷菌棒是否成熟。

圖24 成熟菌棒Fig.24 The mature Xianggu artifical bed-log

8.5 管理要求

菌棒入庫后,每天檢查機器設備運轉是否正常,觀察菌棒發菌情況,查看并記錄室溫、棒溫和CO2濃度,根據技術要求及時調整各參數。 發現污染、異常菌棒要及時清理出培養庫房,防止交叉感染,惡化庫房培養環境。 脫袋、刺孔等操作轉移菌棒時,需及時打掃庫房衛生,使用新潔爾滅、次氯酸鈉、三氯異氰尿酸或二氯異氰尿酸鈉等消毒液對庫房地面進行消毒。

9 菌棒貯存

成熟的菌棒可在冷庫中進行短時間貯存(圖25)。 菌棒先速凍至-5—-3 ℃,然后保持在-2—0 ℃,可保存3 個月以內。

10 核心技術

10.1 木屑預處理技術

香菇生產的主要原料為木屑,新鮮木屑可及時使用,但新鮮木屑較硬,持水性差,裝袋時菌棒微孔率高,易造成培養期間菌棒污染率高,對養菌環境造成破壞,進而導致交叉污染。 一般可采用木屑預濕堆置來解決上述問題,木屑預濕堆置一方面可以促使木屑軟化,提高木屑持水性,另一方面木屑經過堆置和翻堆,各項理化性質更加均勻一致。 木屑預濕堆制可大幅降低料棒制作過程中破袋和微孔的發生率,同時提高菌棒后期發菌、出菇的一致性。

10.2 滅菌技術

栽培基質滅菌徹底是食用菌穩定生產的核心。 滅菌時間過短或溫度過低會導致滅菌不徹底,接種后易出現大批量污染;滅菌時間過長或溫度過高會導致栽培基質碳化、pH 過低,不僅造成能源浪費,而且造成培養料營養損失嚴重。 目前,香菇菌袋一般采用聚乙烯材料,可耐受118—120 ℃;如果使用保水膜,一般滅菌溫度控制在112—116 ℃。 滅菌過程要注意調整進氣和排氣比例,滅菌鍋升溫階段加大排氣量有利于鍋內冷空氣排出;滅菌階段適當減少排氣量有利于節省能耗。 要注意滅菌鍋內的料棒升溫速度相對于滅菌鍋內空氣升溫具有滯后性,因此在實際操作中一般鍋內溫度上升至100—105 ℃時要保持60—90 min,以使料棒溫度和鍋內溫度趨于一致,從而保障滅菌效果。 滅菌技術的改進不僅可提高滅菌效果,降低培養基養分損失,有利于后期菌絲生長,還可大幅節省能源消耗,控制滅菌成本,并且可以有效降低滅菌過程中產生的水袋、脹袋比例。

10.3 香菇液體菌種技術

液體菌種是在生物發酵罐中,通過深層培養(液體發酵)技術促使食用菌菌絲體快速生長繁殖而產生的液體形態的菌種,具有制種周期短、成本低、純度高、流動性好、接種效率高、發菌點多等優勢,是食用菌制種產業的發展趨勢,目前液體菌種技術在金針菇、杏鮑菇、黑木耳等品種中已普遍使用。 香菇由于其自身生理特性,前期香菇液體菌種一直未實現規模化應用。 近年來,團隊通過技術攻關,在河南金海生物科技有限公司實現了規模化應用,已利用液體菌種技術生產香菇菌棒1 000 多萬棒,取得了良好的經濟效益。 通過香菇液體菌種的產業化應用,香菇制種周期可縮短70%—80%,發菌周期縮短7—10 d,庫房使用率提升8%,制種成本下降50%以上,香菇液體菌種技術的成功應用將極大促進香菇產業的轉型升級。

10.4 刺孔增氧技術

香菇是好氧型真菌,要根據生產用種特性和菌棒瘤狀物的狀態,選擇合適的時機進行刺孔增氧處理,刺孔的方式和數目不僅直接影響菌絲的氧氣供應,而且對菌棒后期轉色、瘤狀物的發生和出菇蕾數的控制至關重要。 一般短菌齡易爆出的品種,可采取早刺孔、多刺孔的方法來控制瘤狀物的發生;長菌齡不易出菇的品種,可采取晚刺孔、少刺孔的方法來刺激瘤狀物的發生。

致謝:特別感謝河南金海生物科技有限公司、山東御苑生物科技有限公司、山東七河生物科技股份有限公司、延邊德康生物技術有限公司、遼寧峪程菌業有限公司對本技術規程研制過程中各種參數探究、關鍵技術研發及規程規模化示范過程提供人員、場地、材料等的大力支持,使得本規程的作業技術和每一個參數更加適合于產業化生產的需求。

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