多產地油用牡丹籽油脂肪酸構成及基本理化指標評價

鄭雅琪，武 藝，袁瑋瓊，汪 濤，呂兆林,2,

（1.北京林業大學生物科學與技術學院，北京 100083；2.北京林業大學林業食品加工與安全重點實驗室，北京 100083）

油用牡丹（Paeonia suffruticosaAndr.）是我國近年來新興的一種木本油料作物，是適宜用作油料作物栽培的牡丹品種，‘紫斑’牡丹（Paeonia rockii（S.G.Haw &Lauener）T.Hong &J.J.Li）和‘鳳丹’牡丹（Paeonia ostii'Feng Dan'）則是其中較為重要的兩個品種，主要分布于黃土高原[1?2]，具有抗干旱、耐貧瘠[3?4]的特點，油用牡丹籽油是油用牡丹最具價值的深加工產品，包含大量的不飽和脂肪酸[5]，其中油酸、亞油酸、亞麻酸含量極高[6]，營養豐富、藥用價值高[7?8]，在抗菌消炎、降血脂、提高免疫力等方面具有顯著作用[9]，在水土保持、醫藥和食用油用方面也具有較高的應用和經濟價值[10]。

劉建華等[11]、Qi 等[12]采用一維GC-MS 聯用技術分別對山東菏澤市牡丹籽油成分進行探究，結果表明山東菏澤牡丹籽油包含10 余種脂肪酸，但由于植物油脂脂肪酸存在同分異構體的影響以及一維GCMS 峰容量不足等問題，并不能準確、完整檢測出牡丹籽油中的脂肪酸成分，全二維氣相色譜-飛行時間質譜聯用技術（GC×GC-TOFMS）是一種高靈敏度、高分辨率、高峰容量的分離技術[13]，與一維GC-MS相比，它通過兩根不同極性的色譜柱提高目標分析物及其同分異構體的分離效果，增加定性的可靠性，并在更短的分析時間內獲得更多的樣品痕量成分信息[14?15]，使結果更加準確完整。Yuan 等[16]利用GC×GC-TOFMS 技術分析黃土高原野生翅果油脂肪酸含量，較一維色譜結果[17]檢測出更多的脂肪酸成分。現有文獻大多僅對油用牡丹籽油中主要脂肪酸成分進行研究，且在脂肪酸成分的同分異構體確定以及痕量成分檢測方面鮮有人關注，利用GC×GC-TOFMS技術可確定并補充油用牡丹籽油脂肪酸成分種類。

隨著環境的變化，高校對內部審計的需求增加，內部審計在強化管理、防范風險、促進學校事業目標的實現上功不可沒。然而，“重監督輕服務”、“重業務輕管理”現象依然存在，高校內部審計轉型的研究和關注越來越多。

本研究選取分布在黃土高原地區的‘紫斑’牡丹和‘鳳丹’牡丹兩個油用牡丹品種，提取油用牡丹籽油，對籽油的含油量、皂化值、過氧化值、折光率、色澤進行檢測，利用GC×GC-TOFMS 技術檢測其籽油脂肪酸種類，探究其營養價值，并分析不同品種不同產地黃土高原油用牡丹品種籽油在含油率、基本理化指標和脂肪酸成分的差異，以期為油用牡丹籽油脂肪酸成分檢測技術提供數據支撐，為黃土高原地區油用牡丹籽油脂肪酸成分差異提供理論支持。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

正己烷、甲醇、無水乙醇、鹽酸、石油醚、三氯甲烷、無水硫酸鈉 北京化工廠；冰醋酸 天津永大化學試劑有限公司；碘化鉀、氫氧化鉀 光復科技發展有限公司；可溶性淀粉 上海麥克林生化科技有限公司；以上試劑均為分析純，水為雙蒸餾水。選取完整、飽滿、無蟲害的油用牡丹籽作為試驗材料。詳細樣品信息見表1。

表1 樣品信息Table 1 Sample information

日本島津GCMS-QP2010Ultra 氣質聯用儀 日本島津公司；Agilent 5977A MSD 全二維氣相色譜-飛行時間質譜聯用儀（GC×GC-TOF/MS）美國Agilent 公司；雪景固態熱調制器SSM1810 雪景科技；RE-201D 旋轉蒸發儀 鄭州市亞榮儀器有限公司；電子天平（感量0.0001 g）賽多利斯儀器（北京）有限公司；98-1-B 型電子調溫電熱套 天津市泰斯特儀器有限公司；DR-M4 多波長數字式阿貝折射計 陜西華夏亨通電子公司。

1.2 實驗方法

油用牡丹含油量和經度、降雨、棕櫚酸、硬脂酸、亞油酸、多不飽和脂肪酸呈顯著負相關（P<0.05），和海拔、十四烷酸、棕櫚油酸、十七烷酸、十七烯酸、α-亞麻酸、花生酸、花生一烯酸、花生二烯酸、神經酸（二十四烯酸）、單不飽和脂肪酸等呈顯著正相關（P<0.05），說明油用牡丹籽油在海拔較高，降水量較少干旱條件下，含油量較高，這可能與植物的抗逆生長作用有關。并且隨著含油量的升高，油用牡丹籽油中的棕櫚油酸、α-亞麻酸、神經酸（二十四烯酸）等脂肪酸含量會增加，棕櫚酸、亞油酸等脂肪酸含量會減少。

式中：X 為牡丹籽油含油量（g/100 g DW）；m1為恒重后接收瓶和脂肪的含量（g）；m0為接收瓶的質量（g）；m2為試樣的質量（g）。

當前科技不斷發展，高科技帶給我們不止生活的便利，在企業管理中信息化管理也十分關鍵。在當前現代化的市場經濟中，高質量和高效率同等重要，因此在建筑工程的管理中將各個部門信息化管理，同步提高管理人員對計算機的使用能力，提高其在計算機技術、電子商務管理技術等方面的熟練度。將數據整合可以為后續的工作提供全面的資料進行參考。同時信息化的管理可以提高核算的準確性，而核算在建筑工程中同樣十分重要，對工程核算進行創新和完善，促進工程項目的順利進行將有利于企業的發展和進步。

在不同產地的‘鳳丹’牡丹籽油研究中，四種‘鳳丹’牡丹籽油中FDX 不飽和脂肪酸含量（88.05%）顯著高于其他三個品種（P<0.05）。四種‘鳳丹’牡丹籽油中脂肪酸含量最高的均為α-亞麻酸，其中FDN中α-亞麻酸含量（38.48%）較其他三種油用牡丹籽油差異顯著（P<0.05），FDX 中油酸和亞油酸含量在4 種鳳丹牡丹籽油中最高，但FDX 在油酸含量上顯著低于ZBG（P<0.05）。FDG 和FDN 的含油量也顯著高于FDS 和FDX（P<0.05），將‘紫斑’牡丹和‘鳳丹’牡丹籽的含油量、籽油皂化值、過氧化值、脂肪酸含量與環境因子進行相關性分析，結果見表4，α-亞麻酸與緯度和海拔呈正相關，與降雨呈顯著負相關（P<0.05）；亞油酸與海拔呈負相關，與降雨呈顯著正相關（P<0.05）；油酸與年平均氣溫呈顯著負相關（P<0.05），說明種植過程中由于生長條件的不同可能會導致‘鳳丹’牡丹籽油脂肪酸含量產生差異。

五是依法治水能力進一步加強。新頒布實施了《重慶市實施〈中華人民共和國水土保持法〉辦法》等法規規章，加大了水行政執法力度，有力維護了水事秩序。

1.2.3 油脂脂肪酸測定

1.2.3.1 脂肪酸衍生化處理 參照Yuan 等[16]的方法，取25 mg 籽油于具塞試管內，加入2 mL 的正己烷溶解油脂，振蕩器上振蕩2 min，加入0.5 mL 的5% KOH/CH3OH 溶液，在振蕩器上振搖2 min，靜置分層后，取上層清液（正己烷相）進行測定。

2016年福建省教育廳頒發了《福建省中等職業學校學生學業水平考試實施辦法（試行）和福建省中等職業學校學生綜合素質評價實施辦法（試行）的通知》。該文件表明了學業水平考試成績不僅是衡量學生升學和畢業的重要條件，還是評價中等職業學校教育教學質量的重要依據。相當于中職生面對“高考”，然而他們卻迷茫、彷徨，依舊抱著“及格萬歲”的心理。

1.2.3.2 全二維氣相色譜-飛行時間質譜聯用技術測定脂肪酸組成 參照Wu 等[14]的方法并在此基礎上作適當修改。

色譜條件：一維柱：DB-Wax（30 m×0.25 mm×0.25 μm），二維柱：DB-17MS（1.195 m×0.25 mm×0.15 μm）；載氣：高純氦氣，流速1 mL/min；進樣口溫度250 ℃，不分流進樣；柱溫箱的升溫程序為：初溫40 ℃，保持10 min，以每分鐘3 ℃升到230 ℃，共73.33 min。

皂化值即測定油脂中游離脂肪酸和甘油酯的含量，油脂的皂化值越小，脂肪酸的分子量越高，油脂越接近于固態[20]。由表2 可知，五種牡丹籽油中FDX皂化值最高，為152 mg/g，FDN 皂化值（137 mg/g）最低，但‘紫斑’牡丹籽油和‘鳳丹’牡丹籽油的皂化值均小于大豆（184～190 mg/g）與花生（185～246 mg/g）[21?24]，說明‘紫斑’牡丹籽油和‘鳳丹’牡丹籽油的油脂較大豆和花生相比更接近固態，脂肪酸的分子量更高。油脂的過氧化值表示過氧化物的含量，是脂肪氧化降解、異味和酸度的指標[25]，過氧化值越高表示油脂被氧化程度越高，新鮮程度越低，五種牡丹籽油中過氧化值為1.24～1.48 mmol/kg，其中FDN 和FDS 的過氧化值最高，顯著高于FDG 和FDX（P<0.05）。油脂的折光率與組成油脂的脂肪酸雙鍵數目有關，雙鍵越多，油脂的折光率就越高。‘紫斑’牡丹和‘鳳丹’牡丹籽油折光率為1.465～1.467，折光率之間無顯著差異（P>0.05）。油脂的色澤是消費者對其品質的最直觀感受，良好的色澤是高品質植物油所具備的要素，通過感官觀察，油用牡丹籽油的色澤呈現出淡黃、透亮，表明實驗制得的油脂具有良好的感官特性。

質譜條件：電子電離源；電離電壓?70 eV；離子源溫度220 ℃；傳輸線溫度230 ℃。采用全掃描方式；質量掃描范圍40～500 amu；檢測器電壓：?1750 V。

利用NIST11 和NIST11s 標準質譜庫對采集到的質譜圖進行檢索。利用脂肪酸混合標準品和質譜庫數據進行脂肪酸定性分析，脂肪酸含量采用面積歸一化[16]的方法，以單個脂肪酸峰面積占總峰面積百分比表示。

1.3 數據處理

2.4.1 油用牡丹在品種和產地方面的差異分析 對產自甘肅的不同品種油用牡丹研究發現，兩者在含油量和籽油不飽和脂肪酸含量方面不存在顯著差異（P>0.05），但ZBG 中的α-亞麻酸和油酸顯著高于FDG，亞油酸含量顯著低于FDG（P<0.05），兩種籽油的脂肪酸成分在含量和比例方面存在差異，與研究者結果研究一致[37]，‘紫斑’牡丹和‘鳳丹’牡丹品種的不同，繁殖方式存在差異，‘紫斑’牡丹通過嫁接和分枝進行無性繁殖，而‘鳳丹’牡丹通過播種有性繁殖，不同的種源以及種植方式可能是脂肪酸含量不同的原因。

2 結果與分析

2.1 油用牡丹籽的含油量

由圖1 可得，五種牡丹籽的含油量（DW）為27.97～36.12 g/100 g，符合已有研究結果[19]，其中，ZBG 的含油量為36.12 g/100 g，顯著高于FDN、FDS、FDX（P<0.05），其次為FDG、FDN、FDS，含油量分別為34.50、33.90 和31.46 g/100 g，FDX 的含油量最小。

圖1 油用牡丹籽含油量Fig.1 Oil content of peony seed oil

2.2 油用牡丹籽油的基本理化性質

SSM 調制器條件：進口溫度：較GC 柱箱溫度高30 ℃；出口溫度較GC 柱箱溫度高120 ℃，最高溫度320 ℃；冷區溫度：?51 ℃；調制周期：6 s。

表2 油用牡丹籽油基本理化性質Table 2 Basic physical and chemical properties of peony seed oil

參照LS/T 3242-2014 牡丹籽油標準，‘紫斑’牡丹籽油和‘鳳丹’牡丹籽油接近或符合標準中對皂化值（158～195 mg/g）、過氧化值（≤6.0 mmol/kg）、折光率（1.465～1.490）的要求，且顏色和過氧化值為一級牡丹籽油標準。

2.3 油用牡丹籽油脂肪酸構成

2.3.1 全二維氣相色譜-飛行時間質譜聯用技術檢測油用牡丹籽油的脂肪酸的構成 牡丹籽油脂肪酸全二維色譜輪廓圖和3D 視圖分別見圖2、圖3，表3為油用牡丹籽油肪酸種類及含量。由表3 可知，‘紫斑’牡丹籽油和‘鳳丹’牡丹籽油不飽和脂肪酸含量在86.17%～88.05%之間，油用牡丹籽油中共檢測出17種脂肪酸，分別為十四烷酸、十五烷酸、棕櫚酸、棕櫚油酸、十七烷酸、十七烯酸、硬脂酸、油酸、亞油酸、α-亞麻酸、花生酸、花生一烯酸、花生二烯酸、山崳酸、二十二烯酸、二十四烷酸、二十四烯酸，其中α-亞麻酸含量最高，為32.43%～38.48%，其次是油酸、亞油酸，含量分別為20.88%～24.42 %、18.98%～28.31%。符合研究者對油用牡丹籽油主要脂肪酸成分[7,11?12,26]研究結果，與此同時二維GC×GC-TOF/MS 技術檢出二十四烷酸（1.14%～1.28%），二十四烯酸（0.43%～0.54%），而研究者利用一維GC-MS 卻未能將其檢測出。因為GC-MS 的一維柱存在共流出的問題，并存在多種成分的信號未能分開的現象，從而導致GC-MS 未能檢測出二十四烷酸，二十四烯酸。而GC×GC-TOF/MS 通過兩種不同極性的柱系統將復雜的基質分離，完美解決了一維柱上的共流出問題，還可以分離同分異構體，大大提高了色譜系統的分離能力，同時 GC×GC 通過調制柱的聚焦特性還提高了檢測的靈敏度，適用于油用牡丹籽油中痕量組分的定性定量分析。

讓學生從這些鮮明的事例中, 明白學好政治的道理, 懂得學好政治課的內容, 可以為以后的學習和生活提供許多幫助, 知道政治課知識是有用的知識.

圖2 牡丹籽油脂肪酸全二維色譜輪廓圖Fig.2 Full two-dimensional chromatographic profile of fatty acids in peony seed oil

圖3 牡丹籽油脂肪酸全二維色譜3D 視圖Fig.3 3D View of full two-dimensional chromatography of fatty acids in peony seed oil

表3 油用牡丹籽油肪酸種類及含量Table 3 Types and content of fatty acids in peony seed oil

不飽和脂肪酸指含有一個或多個雙鍵的脂肪或脂肪酸鏈，從植物油中攝入不飽和脂肪酸有利于改善血栓的形成，降低產生心血管疾病的風險，對肥胖人群和老年人的健康有益[27?28]，α-亞麻酸屬于ω-3 系脂肪酸，它不僅作為構成細胞膜結構的磷脂成分，為身體提供能量，還在抗癌、抗炎、降血脂等方面也有一定的作用[29]；油酸是存在植物油脂中的ω-9 脂肪酸，在預防糖尿病、降血脂[30]等方面具有一定的作用。棕櫚油酸不僅在改善Ⅱ型糖尿病患者的胰島素抵抗癥狀[31]上有一定效果、還具有抗炎等作用[32]。‘紫斑’牡丹和‘鳳丹’牡丹籽油是補充油酸、α-亞麻酸、棕櫚油酸等對人體健康有好處的脂肪酸的良好來源。

不僅如此，由于ω-3 和ω-6 多不飽和脂肪酸兩者之間存在代謝競爭抑制：而當攝入ω-3 不飽和脂肪酸不足時，則ω-6 多不飽和脂肪酸衍生的類二十烷酸、血栓素生成過多，不利于人體健康[33]。一般而言只要將ω-6 系脂肪酸和ω-3 系脂肪酸的攝入比例限制在4:1 就足以讓人體代謝得到良好保障[34]，油用牡丹籽油脂肪酸中（ω-6）/（ω-3）的比例為0.52～0.87，均小于4，油用牡丹籽油是為補充優質ω-3 系脂肪酸的良好來源。

GC×GC-TOFMS 技術新檢出神經酸即二十四烯酸，是組成神經細胞膜的重要成分，有利于提高神經細胞的活躍性并延緩衰老[35]。在改善中樞神經系統以及提高免疫力等方面也有一定作用[36]。人體自身很難合成神經酸，必須靠食物攝取補充。油用牡丹籽油可作為補充神經酸來源。

2.4 油用牡丹差異分析

所有實驗重復三次，采用Origin 2021 進行繪圖，采用SPSS26.0 進行統計學分析（P<0.05）。

1.2.2 油脂基本理化指標測定 皂化值測定參照GB/T 5534-2008《動植物油脂皂化值的測定》；油脂過氧化值測定方法參照GB 5009.227-2016《食品安全國家標準食品中過氧化值的測定》；折光率測定參照GB/T5527-2010《動植物油脂折光指數的測定》；色澤測定參照GB/T5525-2008《植物油脂 透明度、氣味、滋味鑒定法》。

表4 油用牡丹含油量、脂肪酸組分與環生態因子相關性Table 4 Correlation between oil content,fatty acid components and cyclic ecological factors of peony for oil

1.2.1 牡丹籽油的提取 采用索氏提取法[18]提取牡丹籽油：稱取一定量的牡丹籽包在濾紙中，利用正己烷在索氏提取裝置中加熱回流提取4 h，加熱溫度保證虹吸速度保持在5 min 一次，提取結束后，在旋轉蒸發儀除去正己烷，待接收瓶內溶劑剩余1～2 mL時水浴蒸干，再于100 ℃（±5 ℃）干燥1 h，放干燥器內冷卻0.5 h 后稱量。重復以上操作直至恒重（兩次稱量的差不超過2 mg）。牡丹籽油含油量計算公式如下：

油用牡丹籽油皂化值與經度、年平均氣溫、α-亞麻酸呈顯著正相關（P<0.05），與神經酸呈顯著負相關（P<0.05）。過氧化值與緯度呈顯著負相關（P<0.05），說明經度和年平均氣溫越高，油用牡丹籽油的皂化值越高，α-亞麻酸含量越高，神經酸含量越低；緯度越高，油用牡丹籽油的過氧化值越低。

2.4.2 油用牡丹的主成分分析 利用主成分分析法對‘紫斑’牡丹和‘鳳丹’牡丹籽油成分和性質進行分析，使用18 個變量進行統計評估，變量包括含油量、不飽和脂肪酸含量以及含量在0.5%以上的油用牡丹籽油脂肪酸成分。結果見圖4、圖5，PCA 選取了二個主要成分，對總變量累計貢獻率為85.35%（其中PC1=59.19%、PC2=26.16%）。

1.著重學習過程當中的評價。在學習過程中，學生的各方面能力都會得到不同程度的鍛煉，學生的創新意識也會展現，所以對過程的評價很重要。

充足和調配合理的營養是青少年生長發育的物質基礎。青少年正常的生長發育不僅需要足夠的熱量，還需要優質的蛋白質、維生素、礦物質以及微量元素等。任何一個年齡段營養供應不足都會對身體健康和發育造成損害，尤其在生長發育的關鍵時期受損，不僅會影響下一個階段的生長，還有可能會影響終生。如胎兒期及嬰幼兒期營養不良不僅會影響成年后身高，還是導致成年后患高血壓、Ⅱ型糖尿病、冠心病的原因之一；兒童時期長期營養低下，會影響骨的長度及骨皮質厚度，減緩骨骼的成熟，推遲青春期生長突增開始的年齡，造成體格矮小；青春期缺乏足夠的營養可引起突增幅度減低，使身體瘦弱的同時還會影響女性月經初潮年齡。

圖4 牡丹籽油脂肪酸和性質主成分分析圖Fig.4 Principal component analysis of fatty acids and properties of peony seed oil

圖5 五種牡丹籽油的得分圖Fig.5 Score chart of five kinds of peony seed oil

含油量、α-亞麻酸、十四烷酸、棕櫚油酸、十七烷酸、十七烯酸、花生酸、花生一烯酸與PC1 有較大正相關，不飽和脂肪酸、棕櫚酸與PC1 有較大負相關，油酸、花生二烯酸、二十二烯酸、二十四烷酸和不飽和脂肪酸與PC2 有較大正相關，硬脂酸與PC2有較大的負相關。ZBG 在PC1 和PC2 上得分較高，說明它含有更多的α-亞麻酸、十四烷酸、棕櫚油酸、十七烷酸、十七烯酸、花生酸、花生一烯酸、油酸、花生二烯酸、二十二烯酸、二十四烷酸，并且含油量和不飽和脂肪酸較高；FDX 與PC1 有較大負相關，說明它含油量低，但它的不飽和脂肪酸含量高。主成分分析結果與實驗檢測結果相一致。

運用SPSS18.0軟件進行統計分析，組間計量資料對比采用兩獨立樣本 t檢驗和協方差分析，組間計數資料對比采用χ2檢驗，以α=0.05為檢驗水準。

3 結論

本研究采用GC×GC-TOF/MS 技術檢測了黃土高原地區‘紫斑’牡丹和‘鳳丹’牡丹籽油的脂肪酸構成，并檢測了含油量等基礎指標，對其脂肪酸構成等方面進行了差異分析，黃土高原地區‘紫斑’牡丹和‘鳳丹’牡丹的含油量為27.97%～36.12%，基本理化指標接近或符合LS/T 3242-2014 牡丹籽油標準。利用GC×GC-TOF/MS 技術測定脂肪酸構成，其中共含有17 種脂肪酸，較研究者結果多檢出二十四烷酸、二十四烯酸。GC×GC-TOF/MS 技術可以更全面準確地檢測出油用牡丹籽油的脂肪酸成分。不同品種、不同產地的油用牡丹籽油在脂肪酸成分比例和含量、含油量、皂化值、過氧化值之間存在差異，不同的經緯度、海拔、年平均氣溫以及不同品種是產生差異的部分原因，由于植物的抗逆生長作用以及在不同生長時期油用牡丹的變化對籽油的含油量、基本理化指標和脂肪酸成分的影響未能在本實驗中研究，這可以是之后研究油用牡丹籽油產生差異的方向。

本研究可以為‘紫斑’牡丹、‘鳳丹’牡丹籽油中脂肪酸成分檢測技術、后續黃土高原油用牡丹種植以及功能性產品開發提供數據支撐和理論支持。