禽組織和禽蛋中獸藥殘留快速檢測技術研究進展

劉書余，郭亞文，湯亞云，高鵬飛，管凡荀，朱雅麗，謝愷舟,

（1.揚州大學動物科學與技術學院，江蘇揚州 225009；2.教育部農業與農產品安全國際合作聯合實驗室，江蘇揚州 225009）

禽肉和禽蛋是人類非常重要的蛋白質來源。肉組織和蛋中的獸藥殘留會對人類健康產生嚴重影響（如抗菌素耐藥性和致癌性）[1]，這使得控制獸藥殘留成為確保消費者健康的重要參數。在家禽生產中常用獸藥主要有生長促進劑[2]、驅蟲劑[3]和抗生素[4]等，用來提高動物機體免疫力和快速增長。雖然獸藥在防治禽病、促進家禽生長和提高飼料轉化率方面發揮了一定的積極作用，但伴隨著國內肉雞養殖逐漸向著集約化、規模化的方向發展，養殖場所產生的污水、禽類糞便都對周邊的養殖環境產生了很大影響，所以造成禽類養殖環境中病原微生物多，禽類抗病力弱，養殖者不得不加大獸藥的使用量，導致獸藥殘留在家禽組織、器官和食用產品中，從而危害消費者的健康。目前已經報道了測定動物源性食品中獸藥的分析方法，其中大多數使用液相色譜或氣相色譜-串聯質譜[5?9]。然而，盡管這些方法通常被驗證用于確證分析目標化合物，但這些儀器方法需要昂貴的設備、耗時的樣品處理和經驗豐富的人員，很難滿足食品質量安全快速檢測的需要。因此，為解決畜禽食品安全這一具體問題，開發簡單快速、靈敏度高、準確的方法來檢測禽組織和禽蛋中獸藥殘留物是當務之急。大多數國家也開始為食品安全提出更高的要求，檢測技術趨于高科技、序列化、快速測量、便攜式和商業化[10]。本文綜述了近十年來禽組織和禽蛋中獸藥殘留快速檢測技術的研究進展，比較了不同快速檢測技術在應用方面的優缺點，探討了多種快速檢測技術在禽組織和禽蛋中的未來發展趨勢，以期為禽類食品中獸藥殘留評估、檢測和監管提供理論基礎。

1 獸藥殘留種類及危害

1.1 常見殘留獸藥種類

獸藥殘留是指飼料中添加被攝入后以及用藥后蓄積或存留于畜禽機體和產品（如雞蛋、肉品等）中原型藥物及其代謝產物，包括與獸藥有關的雜質殘留。禽組織和禽蛋中常見獸藥殘留種類如表1。畜牧中獸藥主要被用于各種動物疫病防治和臨床研究，若過度使用，容易造成藥物在動物體內殘留，使動物具有耐受性，在人體食用這些有藥物殘留的動物后，藥物被人體吸收，從而影響人體內部環境[11?12]。《中國食品安全發展報告（2019）》指出2018 年食品抽檢中農獸藥殘留不符合標準占不合格樣品總量的15.4%，主要是禽類產品和鮮蛋中檢測出禁用和限用獸藥，其中鮮蛋的不合格率為3.9%[13]。2020 年實施的GB 31650 2019《食品安全國家標準 食品中獸藥最大殘留限量》中規定，產蛋期禁用達氟沙星、二氟沙星、恩諾沙星、沙拉沙星、氟甲喹、噁喹酸這六種喹諾酮類藥物[14]，2021 年江蘇省市場監管局通報1 批雞蛋中恩諾沙星超標[15]，同年，山西大同市抽檢出雞肉樣品中恩諾沙星超標；山東省和安徽省分別抽檢出2 批次和1 批次雞蛋中氟苯尼考殘留超標[16]，由此可見，禽組織、禽蛋中藥物殘留問題嚴峻，建立快速的檢測方法用于檢測禽組織和禽蛋中的藥物殘留迫在眉睫。

表1 禽組織和禽蛋中常見藥物殘留種類Table 1 Types of common drug residues in poultry tissues and eggs

1.2 危害

畜禽養殖中的不合理使用獸藥、不遵守停藥期等濫用現象導致禽組織和禽蛋中藥物殘留超標，獸藥殘留會使細菌產生耐藥性、導致人體中毒、腸道內菌群失調、發生過敏反應、三致作用以及環境污染。2016 年，英國經濟學家O’Neill 發表的《全球抗菌藥物耐藥回顧：報告及建議》中指出細菌耐藥性導致每年死亡70 萬人[26]。根據相關研究報道，每生產1 kg雞肉會消耗148 mg 抗菌藥物[27]，中國每年生產的抗菌藥物有近一半都用于畜牧養殖業[28]，當攝入含有抗菌藥物的動物源性食品時，人體內腸道菌群與抗菌藥相互作用破壞體內菌群的動態平衡，影響腸道吸收，進而引發各種疾病。長期攝取含有獸藥殘留物的動物源性食品，會在人體內不斷蓄積并引起中毒和過敏反應，中毒產生的癥狀如頭暈乏力、惡心嘔吐、腹瀉等，嚴重者呼吸困難、昏迷、休克、骨頭壞死[29]；過敏反應如皮膚出現紅斑、丘疹、糜爛，更嚴重會出現膿包、水皰等[30]。同時還會使人類有致畸、致癌、致突變的風險，硝基呋喃類藥物會對人體肝和腎等器官造成損傷，嚴重危害人們的生活安全，此類藥物已被我國和其他多個國家禁止使用[31]。其次，各種藥物與代謝物會隨著動物的糞便、尿液等排泄物排出體外，一些化學成分會對土壤結構造成破壞，污染水環境，進而威脅當地畜牧業的穩定發展[32]。

2 快速檢測技術的定義及種類

獸藥殘留快速檢測技術，又稱快檢技術，是化學儀器分析和驗證檢測技術中一種比較簡單的操作，快速靈敏、檢測時間比較短、儀器條件要求不高、易于現場完成目標成分分析。快速檢測技術的目的是從大量具有未知風險的食品樣品中快速篩選可疑樣品。該技術的特點是快速、靈敏，適合大批量樣品的初步篩選。獸藥殘留檢測中常用的快檢技術的特征對比如表2 所示。

表2 常用獸藥殘留快檢技術特點Table 2 Characteristics of commonly used rapid detection techniques for veterinary drug residues

快速檢測技術方法根據分子生物學原理劃分，主要包括了免疫學技術、生物傳感器技術、表面增強拉曼光譜技術、微生物抑制分析技術等。檢測對象基本上覆蓋了農藥殘留、獸藥殘留、飼料添加劑殘留、生物毒素、違禁化學添加物、激素、病原與微生物毒素等。根據產品形式被分為檢測卡、試紙法、試劑盒、快速檢測儀等。根據檢測項目結果可以分為定性檢測、限量檢測、半定量檢測以及定量檢測[33]。

2.1 免疫學技術

免疫學技術因具有對抗原抗體交叉結合酶的高度特異性，因此在抗體分析研究上具有快速、靈敏的優點，并且它操作極其簡便、無須配置昂貴的儀器設備就可以做到在現場即時采樣即時分析。免疫學方法主要包括酶聯免疫吸附法、膠體金免疫技術、生物芯片技術、化學發光免疫分析法等[34]。

2.1.1 酶聯免疫吸附法 酶聯免疫吸附法（Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）是指一種設備簡便且易人工操作、檢測結果快，靈敏度穩定和準確度高，能實現現場樣品快速檢測等一系列特點的新型檢測方法。其原理是利用抗原抗體分子的特異性結構與蛋白競爭性抗原結合，以其作為反應標記物并顯示該反應后的檢驗結果，從而能進行快速定性與定量測定。其檢測原理如圖1，檢測成本較儀器檢測低，能夠充分彌補沒有大型實驗儀器的空缺，適用于小批量樣品快速篩選檢測。目前此研究方法已被廣泛應用于禽組織和禽蛋中的獸藥殘留快速檢測。

圖1 酶聯免疫測定法原理圖Fig.1 Schematic diagram of ELISA

楊建中[35]用酶聯免疫吸附法測定雞肉、鴨組織中殘留的金剛烷胺藥物。在雞肉、鴨肉樣品中的檢測回收率在84%～112%之間，具有較好的準確度和精密度。為雞肉和鴨肉等肉類中金剛烷胺類藥物及代謝物殘留的鑒別和篩選提供了新的思路。李建鯤等[36]采用酶聯免疫吸附法測定雞蛋中氟喹諾酮類藥物殘留，回收率在90.0%～102.0%之間，最低殘留檢測限為3.2 ng/g。He 等[37]建立了一種靈敏的酶聯免疫吸附法用于食品樣品中甲苯咪唑的分析，所得雞肉樣品中添加甲苯咪唑的平均回收率為84.31%～104.96%，與高效液相色譜法的測定結果一致。基于抗原和抗體的特異性結合，使得ELISA 法定量檢測雞蛋中氟喹諾酮類藥物特異性極強，且相比其他方法更為簡單，靈敏度高，檢測限一般可達ng 甚至pg 級別[38]，并且儀器水平要求不高，用酶標儀就可以進行檢測，檢測分析結果相對可靠、穩定，能夠滿足初檢和篩選分析要求，方便生產現場的快速檢測。目前已研制出多種攜帶方便的ELISA 快速檢測試劑盒，加快了ELISA 試劑盒商業化和標準化進程，使越來越多的學者研究改良和完善這種技術的方法。該試劑盒檢測速度快，試劑的保存時間比較長，自動化程度高且使用的有機溶劑較少，對環境造成的污染大大降低。酶聯免疫吸附技術已成為一種不可或缺的獸藥殘留檢測的常規手段，以確保我們的食品安全。

ELISA 技術具有多重優點，但同時也有一定的局限性，ELISA 法檢測結果會受到一些其他不明因子的干擾，不可避免地出現定性假陽性與假陰性。對于不穩定的和分子量較小的化合物難以分析，并且不能同時分析檢測樣品中多種成分。要實現酶聯免疫吸附技術替代傳統檢測技術，研究者們還需要做大量的工作，相信未來通過與色譜技術、質譜技術相結合使用來彌補一些局限性，從而提高檢測結果的精準性，繼而使食品安全問題得到有效解決。

2.1.2 免疫層析技術 免疫層析技術法（Immunoch-romatographic assay，ICA）是由分子色譜層析技術和現代免疫診斷技術相結合而發展起來的一項快速檢測技術。該方法具有操作簡單、反應速度快、成本較低、高通量等優點[39?40]，其中膠體金技術已被廣泛應用[41]。

膠體金免疫技術是指一種以膠體金顆粒為特異性標記物，基于抗原抗體特異性反應的快速檢測方法，可以通過人工目測的方式判斷試驗結果的有效性[42]。其原理是利用化學還原法將氯金酸溶液制備成粒子直徑從幾納米擴大至幾十倍納米半透明性膠體溶液，膠體溶液電荷一般帶負電，能均勻穩定并迅速吸附蛋白質，且不需要改變蛋白質粒子的生物活性，并制成金標抗體或抗體蛋白，當這些特殊金標蛋白粒子迅速大量聚集載體時，使待檢樣品中相應的抗體或抗原在載體的特定部位發生特異性反應而顯色。膠體金免疫層析條是一種快速、靈敏、準確的固相標記檢測技術，具有價格低廉、操作簡便、檢測快速、特異性高等優點，有效解決了傳統檢測方法在醫學、獸醫、動植物病毒檢測、農藥殘留檢測等領域檢測時間長、設備不便、專業性要求高的缺點。其免疫層析試紙條檢測如圖2，利用這一特性制備的膠體金免疫層析試紙條被廣泛應用，可現場定性和半定量檢測，重復性好，可用于藥物殘留的快速初篩，適合臨床及大規模樣品檢測[43]。孫曉崢等[44]開發了一種能夠檢測氟喹諾酮類化合物及其它類抗生素的試紙條，檢測了河北省的雞肉樣品3414 份，所得樣品平均陽性檢出率約占0.76%，有10 種氟喹諾酮類抗生素殘留檢測出陽性，該試紙條可實現對氟喹諾酮類化合物的快速篩選。高素敏[45]建立了一種膠體金免疫層析新方法，用于檢測雞肌肉中的磺胺嘧啶，在100 份雞肉樣品共檢出3 份陽性樣品，采用高效液相色譜法進行了逐一復檢，各項結果保持一致，該方法準確穩定。栗慧等[46]研制出的土霉素膠體金免疫層析試紙條，5～10 min 內即可得出檢測結果，極大地縮短了現場樣品的檢測時間，加快了現場分析的效率，適合國內相關執法部門對土霉素藥物殘留問題的現場檢測。膠體金標記免疫層析技術作為一種新型的免疫學快速診斷和檢測技術，由于成本低、檢測時間短、操作簡便等特點，適合基層和現場使用。從長遠發展來看，膠體金試紙條作為一種快速篩查手段，對建立更敏感、更快捷的獸藥檢測方法將起到積極的促進作用，為畜禽產品中獸藥殘留的監測打下堅實的基礎，該技術將在動物源性食品安全與質量控制方面發揮越來越重要的作用，實現其理想的價值。

圖2 免疫層析試紙條檢測示意圖Fig.2 Detection schematic diagram of immunochromatographic test strip

雖然膠體金免疫層析技術具有檢測準確、快速等優點，但其自身仍有一些方面不足而亟待改善。如簡單快速的市售膠體金試紙只能進行定性或半定量檢測，檢測能力弱，實驗結果假陰性[47]。面對此問題，Wang 等[41]建立了將試紙與便攜式光熱讀卡器相結合的光熱試紙測定法，實現了對13 種獸藥和農藥的定量檢測，具有優異的檢測能力，有著較好的發展潛力及應用前景。

2.1.3 生物芯片技術 生物芯片（Biochip）技術根據抗原識別和特異性抗體結合反應的免疫學原理，采用熒光標記免疫競爭法測定樣品中的獸藥殘留含量。該分析方法具有高通量、高靈敏度等特性。近幾年，我國研究者在此特性方面又取得了一系列的技術進步，已經自行研發并成功應用了獸藥殘留分析的生物芯片技術平臺[48]。生物芯片技術分別包括為生物基因芯片、蛋白質芯片、細胞芯片技術等[49]。其中蛋白質芯片檢測結果靈敏度更高，滿足歐盟和世界大多數國家及組織對蛋白質產品獸藥殘留檢測要求。圖3為蛋白質芯片技術檢測步驟圖，蛋白試劑盒還可以直接實現對各種食用動物如雞肉、雞肝等食品中的獸藥殘留檢測，如磺胺類、鏈霉素、恩諾沙星以及氯霉素等快速檢測。

圖3 蛋白質芯片技術原理示意圖Fig.3 Protein chip technology principle diagram

生物芯片技術具有靈敏度高、特異性強、樣品前處理程序簡單，檢測分析更為快速等一系列優點，還能同時對體內多種獸藥進行連續分析，有效地節省了檢測費用，縮短了整個檢測過程的時間，提高了檢測效率[50]。陳愛亮等[51]開發了一種晶芯獸藥殘留蛋白芯片檢測系統，可在3～5 h 內完成雞肉和雞肝中恩諾沙星、鏈霉素等獸藥的快速檢測。郭志紅等[52]應用蛋白芯片技術建立了雞肉和雞肝中磺胺二甲基嘧啶、恩諾沙星、鏈霉素的高通量篩選方法，各藥物在雞肉和雞肝中的回收率均在80%～106%之間，與色譜法作比較分析，結果表明蛋白質芯片檢測前處理方法簡單快速，結果可靠，可用于這兩種組織中對應獸藥的殘留檢測。

博奧生物芯片公司開發了一個獸藥殘留蛋白芯片檢測平臺，通過此平臺能夠在幾小時內完成肉食品中10 種獸藥殘留的定量分析[53]，具有操作簡單、結果準確、檢測速度快等優點，可廣泛應用于食品安全檢測領域。

2.1.4 化學發光免疫分析法 化學發光免疫分析法（Chemiluminescent immunoassay，CLIA）分為化學發光酶免疫分析法和電化學發光免疫分析法，是在近20 年來發展起來的另一種新型免疫技術，其原理圖見圖4。該方法能將原來具有高靈敏度特點的傳統化學發光分析法與具有高特異性的生物免疫熒光分析法有機結合起來，這種新型技術具有多種優點，如檢測范圍寬、檢測特異性高、操作與過程簡單易學等，對于提高免疫分析法的靈敏度方面有獨特優勢，并且它不存在放射性污染，是一種有潛力的實驗室免疫學檢測方法[54]。

圖4 CLIA 技術原理圖Fig.4 Technical schematic diagram of CLIA

呂月霞[55]建立了一種化學發光酶免疫分析檢測雞肉中的硝基呋喃類藥物，試驗回收率在79%～106%之間，該方法特異性強，靈敏度高。陶曉奇[56]建立了一種用于定量檢測雞肉樣品中的氯霉素的化學發光免疫法，其檢測限為0.0010 μg/kg，回收率87.6%～118.8%，還建立了雞肉樣品中氟苯尼考和氟苯尼考胺的化學發光免疫分析法，其檢測限分別為1.63 和1.18 μg/kg，回收率在70.3%～102.0%范圍內，該檢測分析方法靈敏度高，檢測限、回收率以及穩定性等指標均滿足我國和歐盟獸藥殘留分析的要求。Tao 等[57]基于化學發光酶免疫分析建立了對雞肉中氟苯尼考和氟苯尼考胺的檢測方法，雞肉中提取的氟苯尼考和氟苯尼考胺的檢測限分別為0.526 和0.453 ng/mL，回收率為71.8%～102%和70.3%～100%。化學發光免疫法在畜禽產品獸藥殘留檢測中有良好的應用潛力，是一種優秀的快檢方法。

2.2 生物傳感器技術

生物傳感器技術（Biosensor）是指傳感器能夠將生物分子體內分離的某些酶、組織、免疫系統、細胞凋亡等過程傳導下的一些生化反應迅速轉化為電、熱或光信號，并同時通過這種信號的細微變化來檢測各種目標化合物的智能設備[58]。如圖5 所示，其技術主要原理是先將一個抗原片段或一組抗體片段固定插入到適當的傳感器上，利用其抗原-抗體反應的特異性和在抗原抗體片段上的標記物產生的信號放大等機制來實現檢測[59]。抗原和抗體在結合過程中會發生物理化學參數間的變化，這種變化實時通過傳感器被轉換和放大，從而提供了更高的檢測靈敏度和高選擇性。

圖5 生物傳感器技術原理圖Fig.5 Technical schematic diagram of biosensor

生物傳感器技術操作簡單、可重復性好、易于現場快速檢測，且檢測成本低，在禽類食品安全檢測方面有著廣泛的應用前景。李孝君等[60]制備了一種高靈敏電流型青霉素免疫傳感器，對雞肉中殘留的青霉素進行定量檢測，該傳感器對雞肉中青霉素的最低檢出限為1.90 ng/g，可用于青霉素在實際雞肉樣品的檢測。Chen 等[61]開發了一種基于熒光的復合生物傳感器，用于檢測雞肉和雞肝中殘留的恩諾沙星，每個組織樣品中平均回收率在77%～99%范圍內。Karaseva等[62]研制了一種基于電生聚合物的壓電免疫傳感器，用于檢測雞蛋中微量的氯霉素，使用半抗原-蛋白偶聯物和單克隆抗體以競爭形式進行檢測，檢測限為0.2 ng/mL。Stevenson 等[63]開發設計了一種直接檢測肉類樣品中的頭孢噻呋殘留的新型電化學生物傳感器方法，在15 min 內自動完成檢測，在火雞肉樣品分析中的最高檢測限為約10 ng/mL。基于某種特異性反應的生物傳感器，保持了生物活性物質的特異性強、靈敏度高的優勢，并且極大地簡化了禽肉中獸藥殘留分析過程，提升了檢測通量；傳感器體積小，便于攜帶，有利于野外作業和現場實時檢測，這些特征都使生物傳感器技術在獸藥檢測領域有了較為深入的研究。未來，食品中獸藥殘留生物傳感檢測技術的研究仍將集中在納米技術的應用、換能檢測方法的創新和改進，多通路自動化檢測方案的實現等方面。

2.3 表面增強拉曼光譜技術

隨著光電技術的迅速發展，拉曼檢測技術也有長足的進步，結合納米技術，傳統的拉曼檢測技術已逐步開始向表面增強拉曼光譜技術領域邁進。如圖6 所示，表面增強拉曼光譜技術（Surface-enhanced Raman spectroscopy，SERS）的工作基本原理是將一些表面粗糙金屬經過特殊處理后作為活性基底，受測的物質分子或官能團直接地吸附到該金屬表面，使得被測的物質分子或者官能團所發射來的拉曼散射信號提高105～106倍[64]。

圖6 表面增強拉曼光譜技術原理圖Fig.6 Technical schematic diagram of SERS

表面增強拉曼光譜在食品安全領域具有很強的應用潛力和實用價值，因為它具有快速檢測、抗水干擾以及提供目標指紋結構信息的能力等技術優勢[65?66]。彭義杰[67]基于納米金膠的SERS 快速檢測技術分別對鴨肉中萘夫西林、阿莫西林的殘留進行初步定性檢測與定量分析。研究表明，藥物的最低檢測限為0.2 mg/L，平均回收率為90%～139%，建立的快速定量檢測方法基本上是穩定可行且有效的，能夠實現快速準確測定鴨肉中的青霉素類的殘留，可為SERS 快速檢測技術在定量檢測禽組織中的抗生素殘留的實際應用提供研究基礎。王婷[68]采用SERS技術進行雞肉和鴨肉中的強力霉素、泰樂菌素、氧氟沙星和諾氟沙星抗生素殘留進行檢測，在雞肉樣本建立了PCA-LDA 鑒別模型，鴨肉樣本建立了PCA-SVM鑒別模型，經過預測集驗證兩個模型的分類準確率，其準確率達到93%以上。以上結果說明了利用SERS技術結合多種化學計量學法可以快速、準確地鑒別出禽肉中強力霉素、泰樂菌素、氧氟沙星和諾氟沙星抗生素殘留。該方法具有很好的效果，已被應用于禽組織中相關藥物殘留快速檢測，具有良好的應用前景。

郭紅青[69]應用表面增強拉曼光譜技術對雞肉、鴨肉中殘留的兩種硝基呋喃類代謝物進行快速檢測研究，所得雞肉、鴨肉中硝基呋喃及代謝物回收率為75%～122%，說明應用表面增強拉曼光譜技術可以有效地對禽組織中殘留的兩種硝基呋喃類代謝物進行檢測。Muhammad 等[70]制備SiO2@Au 核殼納米顆粒基底，可用于雞蛋中氟蟲腈的簡便和無標記快速檢測，實現了基于SERS 的雞蛋中氟蟲腈的檢測，為快速檢測雞蛋或其他食品中的氟蟲腈污染提供了一種實用的解決方案。

2.4 微生物抑制分析技術

微生物活性抑制測定法是指根據一種藥物本身能夠直接抑制的特異微生物數量來對生物樣品中出現的藥物殘留進行定性評價分析。培養皿法和試管法是微生物抑制方法的兩個子類型。與培養皿法相比，試管法更適合于動物食品中抗菌藥物殘留的高通量篩選，因為它既不耗時也不費力。微生物顯色法檢測步驟如圖7 所示，當樣品中沒有抗生素殘留或殘留量低于檢出限時，指示菌快速生長產酸，使檢測液pH 下降，指示劑變色。反之，則會抑制指示菌生長，使得檢測液pH 基本不變，指示劑不會變色。微生物檢測方法成本低、敏感性和精確度好，適用于大規模樣品的篩選。目前國內已廣泛地將其作為一種快速初篩獸藥殘留檢測方法投入應用[71]。

圖7 微生物顯色法檢測步驟圖Fig.7 Microbial color method detection steps

Wu 等[72]建立了一種可用于高效快速篩選雞蛋制品中的四環素類、磺胺類、大環內酯類、和喹諾酮類等抗生素的廣譜微生物抑制方法。該方法對雞蛋中各種抗生素的檢測限均低于歐盟的最大殘留限。此外，該試劑盒的假陽性率和假陰性率均為0%，所以該方法對樣品中目標化合物殘留的篩查是可靠的。楊修鎮等[73]建立了一種獸藥散劑中氟喹諾酮類、四環素類、大環內酯類、磺胺類的微生物管碟快速檢測方法，其中的檢測限范圍在1.5～3.5 mg/g，該方法簡單易行，快速可靠，滿足大多數獸藥中非法添加抗菌藥物的檢測需求。王志強等[74]建立了一種微生物紙片法快速檢測雞肉中抗生素殘留的方法，該方法的最低檢出限均達到我國農業部第235 號文件《動物源性食品中獸藥最高殘留限量》的限量要求。沈翠香[75]采用微生物抑制法對雞肉中恩諾沙星進行檢測，檢測限為0.015 μg/mL，回收率80%以上，通過液相色譜法驗證40 份可疑陽性樣品雞肉，其假陽性率為5%，檢測結果基本一致，符合我國農業部、歐盟等規定的殘留分析方法的要求。劉興泉等[76]采用微板檢測方法測定雞蛋中土霉素、四環素、金霉素，以嗜熱脂肪芽孢桿菌為檢測菌，在一個板上進行多個樣品檢測，可以有效檢測出獸藥殘留，并且每個孔的檢測成本極低，是一種簡單快速的微生物檢測方法，適用于基層推廣使用。其未來的發展方向主要是：克服現有分子生物學方法的缺點，繪制各種菌落圖譜，開發在線檢測軟件，能定量測定微生物細胞特征和性能，簡化采集、培養等程序，提高檢測效率。使獸藥殘留的檢測方法向自動化、快速化、特異性強、重復性好，試驗條件標準化及檢測的高精度和高靈敏度發展。

3 小結

目前，酶聯免疫吸附法在獸藥殘留的快速檢測中發展得相對成熟，是國內外動物源性食品中獸藥殘留快速檢測技術的重要方法。酶聯免疫吸附法與傳統儀器方法相比最顯著的優勢是其高靈敏度和特異性、樣品制備簡單、高通量，因此每個樣品的成本低。雖然膠體金免疫技術可以在幾分鐘內得到檢測結果，但又因這種檢測對方法精度限制得過高，容易導致檢測出現假陽性和假陰性結果，因此還需要借助實驗室更加精密的儀器進行定性和定量檢測。化學發光免疫測定法在家禽獸藥檢測中展現出高特異性和高靈敏度，未來可能擴大該方法在臨床診斷、食品安全和環境監測中的應用，特別是在同時分析多種標志物的情況下。生物芯片技術作為生物技術和芯片技術的整合，顯示出優異的高通量、快速響應和便攜性，在家禽獸藥檢測中已應用廣泛。除了以上快檢技術以外，越來越多的關注集中在使用便攜式和自動化儀器（如微流體設備和智能手機）實施創新的生物傳感方法，以賦予生物傳感器更實用、集成、自動化和便攜的功能。它在靈敏度、特異性和準確性方面優于傳統實驗室檢測，并在快速響應和潛在便攜性方面顯示出優勢，是最適用于現場的快速檢測方法之一。此外，隨著信息技術的發展，結合大數據分析和人工智能的生物傳感器很可能成為一種新趨勢，以更有效地監測和預測整個食品供應鏈中的藥物污染，確保食品安全。SERS 在獸藥殘留的檢測中表現出優異的靈敏度、簡單的采樣和快速的測試速度。通過簡單的設計，SERS 基底具有靈活性、適應性強、成本效益高、適合大規模生產等優點。隨著納米技術的發展和儀器的改進，SERS 可以為獸藥殘留物分析提供一種常規且成本效益高的檢測方法。微生物抑制法檢測食品中獸藥殘留操作簡單、快速靈敏、成本低廉，適合養殖場使用，作為獸藥篩檢方法將成為我國未來檢測發展的趨勢。

雖然與國內外大型實驗室儀器檢測法相比，上述這些快速檢測方法相對耗時要短，成本低，但由于我國長期以來缺乏統一快速檢測技術標準和試劑耗材的生產標準，市場上常見的快檢產品質量參差不齊。廠商應根據食品藥品監管總局發布的《食品快速檢測方法評價技術規范》的相關要求對食品中農獸藥殘留，食品添加劑、污染物質等快速檢測方法及相關產品技術進行評估，同時完善國內標準化的快速檢測產品的審核程序，有利于我國規范快速檢測產品市場，更好地服務于食品安全監督，確保食品安全和公眾的生命健康。

4 展望

當前，獸藥濫用問題嚴重，殘留物超標甚至是多倍超標現象屢見不鮮。傳統的小規模、檢測周期長的檢測技術已經無法滿足當前的需求，要從定性和定量兩方面出發，開發出快速、便捷、準確且能短時間內出具較為準確檢測結果的技術已成為未來的發展趨勢，這也必然是食品安全快速檢測的發展方向。

隨著科技的進步和社會經濟的快速發展以及學科交叉的日益緊密，獸藥殘留快速檢測技術也越來越趨于高通量、便攜性和智能化。可以設計和獲得具有廣泛特異性和對多種目標的高親和力的識別元件，同時新型便攜式儀器的設計和新型功能材料的合成有助于促進具有更多目標分析物和更高靈敏度的新檢測方法的發展。對于獸藥殘留快速檢測，可以加強試劑原材料的研發，如核酸適配體、親和體、基因工程抗體等新型識別材料。大力發展生物傳感器、抗體芯片等新型信號輸出技術和免疫親和層析柱、其他基于石墨烯、碳納米管、超分子材料等樣品前處理技術。另一方面，提高設備研發水平，優化儀器效能，結合現代網絡及人工智能技術，實現檢測設備的互聯互通。同時檢測的對象與數據也逐漸擴大，將重點放在不同類型多種藥物殘留同時分析檢測，并通過不同技術的相互融合來提高技術的靈敏度和準確性，確保檢測效率，將手機作為可視化終端，提高產品的便捷性，降低檢測成本，建立更完善的檢測體系，為現階段的食品安全提供強有力的保障。