胺鮮脂對箱根草組培快繁的影響

摘??? 要：為解決箱根草組培苗增殖和生根效率低難以實現規模化生產的問題，將胺鮮脂與6-BA、NAA和IBA復配使用，進行了箱根草芽增殖和生根培養的試驗研究。結果表明：當添加4.0 mg·L-1胺鮮脂時，芽增殖可達11.3倍，株高達到2.5 cm以上的苗占比69.0%，表現效果最佳；添加1.0 mg·L-1胺鮮脂時，促進生根效果最佳，生根率達到100%，培養25 d時具有10條及以上根數的苗占比達73.3%。將6-BA、NAA和IBA與胺鮮脂復配使用后，有效促進了其效能發揮，使箱根草不定芽增殖倍數由6.7增加到11.3，增殖培養后符合生根標準的苗增加134.2%，生根率提高達45.6%，使箱根草的增殖、生長和生根效果更好，大幅提高了生產效率和苗的質量，使生產成本降低66.5%。上述研究成功建立箱根草組培快繁技術體系，實現了低成本生產優質種苗。

關鍵詞：胺鮮脂；益培靈；箱根草；芽增殖；生根培養

中圖分類號： Q943.1?????? 文獻標識碼： A?????? DOI 編碼：10.3969/j.issn.1006－6500.2023.08.001

Effect of Diethyl Aminoethyl Hexanoate on Tissue Culture and Rapid Propagation of Hakonechloa macra 'Aureola'

WEI Jinli

（Beijing Florascape Company Limited， Beijing 100093， China）

Abstract：In order to solve the problem of low proliferation and rooting efficiency in tissue culture seedlings of Hakonechloa macra 'Aureola'， which is difficult to achieve large-scale production， a combination of 6-BA， NAA， and IBA with DA-6 was used to conduct experimental studies on bud proliferation and rooting culture. The results showed that when 4.0 mg·L-1 DA-6 was added， the proliferation of buds could reach 11.3 times， and 69.0% of seedlings with a height of over 2.5 cm accounted for the best performance; When 1.0 mg·L-1 DA-6 was added， the best effect was to promote rooting， with a rooting rate of 100%. After 25 days of cultivation， the proportion of seedlings with 10 or more roots reached 73.3%. After the combination of 6-BA， NAA， and IBA with DA-6， their efficiency was effectively promoted， resulting in an increase in the proliferation rate of adventitious buds from 6.7 to 11.3. After proliferation and cultivation， the number of seedlings that meet the rooting standards increased by 134.2%， and the rooting rate increased by 45.6%. This improved the proliferation， growth， and rooting effects of Hakonechloa macra 'Aureola'， significantly improving production efficiency and seedling quality， and reducing production costs by 66.5%. This study successfully establishes a tissue culture and rapid propagation technology system for Hakonechloa macra 'Aureola'， achieving low-cost production of high-quality seedlings.

Key words：DA-6; yipeiling; Hakonechloamacra 'Aureola'; bud proliferation; rooting

箱根草（Hakonechloa macra 'Aureola'）是原產于日本箱根地區的一種禾本科多年生植物。葉片有金色和綠色相間的條紋，具有很高的觀賞價值，近年來備受愛好者和園藝工作者們的青睞，廣泛應用于花境、庭院造景和盆栽家庭園藝中。因其自然不結實而沒有種子，一般只能采取分株的常規方式來繁殖，又因其生長很慢繁殖效率低而使得市場上一物難求，價格昂貴，故而采用組培技術實現快速繁殖勢在必行。箱根草雖為禾本科的一種觀賞草，因其莖稈纖細且木質化程度高，在組培繁殖過程中生長和增殖緩慢，尤其是根系形成緩慢且少，甚至不生根，生產繁殖效率低，成本高昂，實現規模化量產已成為亟待解決的難題。

胺鮮脂（diethyl aminoethyl hexanoate，簡稱：DA-6）是美國科學家在20世紀90年代發現的一種具有廣譜性和突破性效果的高效能植物生長調節劑。它作用于植物時，能提高過氧化物酶和硝酸還原酶的活性，提高葉綠素的含量加快光合速度，調節體內養分的平衡，促進植物細胞的分裂和伸長，促進植物地上部分和根系的發育，因其獨特的多功能作用，在農業上得到廣泛應用。如王晨霞等[1]用生物活性物質提高玉米種子萌發及抗鹽能力試驗結果表明，胺鮮脂對胚根的促生長作用最佳；鮑榮粉等[2]用胺鮮脂噴施毛桃幼苗，胺鮮脂能夠提高毛桃的抗逆性，從而促進生長。另外，將胺鮮脂和農藥以及一些植物激素一起復配施用，可用于解藥害[3-4]、提高化肥利用率[5]、果品儲藏表皮處理[6]、調控育苗質量[7]、促進種子萌發[8-9]、改善土壤細菌群落[10]、增產[11-12]等各個方面，均有促進作用，取得了良好效果。但是，截至目前，胺鮮脂在植物組織培養中的應用，在國內僅有1次報道[13]。

本研究擬將胺鮮脂應用于箱根草的組培繁殖中，與6-BA、NAA和IBA復配使用，以促進苗的增殖、生根和生長，提高箱根草的組培快繁效率，實現低成本規模化量產。研究結果可為胺鮮脂在更多植物的組培生產和更多領域的應用提供參考，也可作為一些植物組織培養規模化生產過程中提質增效降本的借鑒方法。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

植物材料：箱根草的組培瓶苗。

藥物試劑：純度為98%的胺鮮脂。

培養基：以前期篩選出的最佳增殖培養基（MS添加適宜濃度的6-BA和NAA）為基礎增殖培養基；以前期篩選出的最佳生根培養基（1/2MS添加適宜濃度的IBA和NAA）為基礎生根培養基。

1.2 試驗方法

1.2.1 不同濃度胺鮮脂對芽增殖的影響 以箱根草的增殖苗為材料，在基礎增殖培養的基礎上，分別添加1.0、2.0、4.0、6.0 mg·L-1不同濃度的胺鮮脂（胺鮮脂添加量下同），與6-BA和NAA復配使用進行增殖培養，以不添加胺鮮脂的基礎增殖培養基為對照，每個處理5瓶，每瓶接種7株，重復3次，培養45 d將苗進行切分轉接，轉接后統計數據結果。

1.2.2 不同濃度胺鮮脂對生根的影響 以箱根草大小適宜生根培養的苗為材料，在基礎生根培養基的基礎上，添加不同濃度水平的胺鮮脂，將胺鮮脂與基礎生根培養基中添加的生根劑NAA和IBA復配使用進行生根培養，以不添加胺鮮脂的基礎生根培養基為對照，每個處理5瓶，每瓶接種15株，重復3次，分別于培養15、25 d時觀察統計生根結果。

1.2.3 不同濃度胺鮮脂對苗生長的影響 將生根培養30 d的苗，從培養瓶中取出后，目測法測量根數和根長，尤其是平均根長的測量是以目測絕大多數的根所達到的長度為準進行計量記錄數據，根長精確到1 mm。然后用衛生紙包住苗的根基部，稍微用力擠壓，使衛生紙充分接觸苗根基部，反復更換3～4次新紙，吸干苗根基部帶有的培養基和水分，就進行鮮質量的稱量，稱量工具為范圍220 g可讀性0.1 mg的電子分析天平，稱量數值讀取到0.1 mg，下同。鮮質量稱完后，將用報紙包起來的苗放入80 ℃的干燥箱中烘干12 h，在干燥箱中冷卻8 h后取出，進行干質量的稱量，1次取出1個處理的5個重復稱量完后，再取出稱量下一個處理。

1.3 數據處理

使用SPSS 18.0和Excel 2010軟件工具對試驗數據進行整理、統計和分析，并對差異顯著指標進行 Duncan 檢驗和比較，不同處理間采用單因素比較。

2 結果與分析

2.1 不同濃度胺鮮脂對芽增殖的影響

在添加不同濃度胺鮮脂的增殖培養基中培養45 d后，將苗進行切分轉接。轉接時，將高度達到2.5 cm以上并且葉片數及大小規格符合生根標準的苗接入生根培養基，將不符合生根標準的小芽苗接入增殖培養基。轉接后，經過數據統計及分析得出，在增殖培養基中添加胺鮮脂后，對箱根草的芽增殖和生長都有明顯地促進作用，隨著胺鮮脂添加濃度由低到高的遞增，苗的增殖倍數也隨之增高，尤其是濃度由1.0 mg·L-1增加到2.0 mg·L-1時芽的增殖倍數顯著增加；當濃度由 2.0 mg·L-1增加到4.0 mg·L-1時芽的增殖數量達到最高值；當濃度繼續增加到6.0 mg·L-1時，芽的增殖數量出現了減少的現象，說明芽的增殖受到了抑制，但差異不顯著。由轉接出的增殖苗和生根苗的數量可以得出，隨著胺鮮脂添加濃度的增加，可接種生根的大苗數量和占比在逐漸增加，小苗的占比正好相反，體現出胺鮮脂的濃度越高越有利于促進苗的生長（表1）。

2.2 不同濃度胺鮮脂對生根的影響

從試驗結果來看，適當濃度的胺鮮脂時對箱根草根的形成與生長促進作用顯著。當濃度過高時抑制作用明顯。隨著培養時間的延長，高濃度的胺鮮脂對根形成和生長的抑制作用逐漸減輕，并且最初添加的胺鮮脂濃度越大，生根率及根的數量和長度的變化越大，對根的形成與生長的促進作用表現越明顯，根的長度也越長。

由表2可知，培養15、25 d時，處理A的生根率均達到100%，具有10條及以上根數苗的占比均高于其他各處理，效果最佳；處理B的生根率也達到100%，但具有10條及以上根數苗的占比略低于處理A， 效果次之；處理C培養15 d時的生根率為86.7%，顯著低于處理B，具有10條及以上根數苗的占比也顯著低于B；處理D的生根率均明顯高于CK，但在培養15 d時，具有10條及以上根數苗的占比相較CK低很多，25 d時明顯增多，但仍低于CK，表現出了胺鮮脂濃度過高時對根系生長的抑制性，但隨著培養時間的延長抑制性逐漸減弱。

由表3可知，培養15 d時，處理A的平均根長最長，顯著長于其他處理，效果最佳；從處理B到C和D逐漸變短，對根生長的促進作用逐漸減弱，但相較CK來說仍表現出了明顯促進作用。培養25 d時，各處理的平均根長整體有所增長，均長于15 d，此時處理D的平均根長為最長，效果最佳；處理A的平均根長長于對照和處理B。不論培養時間是15 d還是25 d，添加了胺鮮脂的各處理苗的根均長于對照，表現出明顯的促進根生長的作用，并且培養時間從15 d到25 d之間根長隨著胺鮮脂濃度越高變化越大。

2.3 不同濃度胺鮮脂對苗生長的影響

試驗結果表明，胺鮮脂對苗生長及物質的積累有著良好的促進作用。并且，隨著胺鮮脂濃度的增加，對苗生長及物質積累的促進作用也越顯著。

由表4可知，添加了胺鮮脂的處理，苗生長的物質積累均高于對照。干質量從處理A到B、C和D逐步增高，隨著胺鮮脂添加濃度的增加呈逐漸上升趨勢，且濃度越高變化越大，干物質積累越多。鮮質量從處理A到B有明顯的增加，處理C有所降低，除略微高于CK之外低于其他各處理，處理D為最大，顯著高于其他處理。

3 討論與結論

3.1 胺鮮脂對苗增殖和生根的影響

由不同濃度胺鮮脂對箱根草的增殖和生根影響的試驗結果發現，在苗增殖階段，胺鮮脂的促進作用趨勢隨著胺鮮脂濃度的增加，呈先上升后下降趨勢，在胺鮮脂濃度為4.0 mg·L-1時增殖效果最佳，而苗的高度隨著胺鮮脂的濃度增加呈上升趨勢，這與劉松年等[7]在不同濃度胺鮮脂對辣椒幼苗生長的影響結果一致；生根階段，胺鮮脂的作用濃度與增殖階段有所不同，在胺鮮脂濃度為1.0 mg·L-1時生根效果達到最佳，之后呈下降趨勢。另外，在一定時間內，當胺鮮脂的濃度達到一定值時，對苗生長及生根的促進作用達到最佳效果；而當胺鮮脂的濃度超過這個臨界值后，就會對芽的形成和根生長促進作用減弱，呈下降趨勢甚至會起到抑制作用；隨著培養時間的延長，這種抑制現象會逐漸減輕至消失，并且表現出隨著胺鮮脂濃度越高促進作用變化越顯著，充分體現出胺鮮脂對植株和根系生長的促進作用。

3.2 胺鮮脂對苗生長物質積累的促進

由胺鮮脂對苗生長影響的試驗結果可以看出，隨著胺鮮脂添加量逐漸增加，苗生長物質的積累呈逐步上升趨勢。從整體上來說，胺鮮脂對苗生長尤其是干物質的積累增加有著明顯的促進作用，這一結果與王蘭英等[14]將胺鮮脂應用于麥冬的塊根膨大促進效應中取得顯著的促進效果相一致。

3.3 添加胺鮮脂對生產成本的影響

在培養基中添加了胺鮮脂后，苗芽增多的同時也較以前變粗壯了[15]，苗的高度達到接種生根規格需求的生長時間也有所變短，生根培養15～20 d就能生根出苗，較之前培養生根的時間縮短10～15 d，并且只要高度達到要求，即使苗是叢生的狀態生根效果也很好，完全改變了以前帶有叢生芽時生根很困難或者不生根的狀態，充分體現出胺鮮脂對生根的促進作用。這一點驗證了齊德強等[16]將胺鮮脂用于水稻機插秧根系形態及抗性生理的影響試驗中所取得的結果。另外，添加胺鮮脂后，在有效促進苗增殖、生根和生長的同時，對箱根草的花葉性狀沒有任何影響。這些綜合的利好因素，使箱根草增殖效率提高達69.7%，生根率提高達45.6%，增殖和生根效果更好；添加胺鮮脂后，增殖培養后符合生根標準的苗增加134.2%，大幅提高了苗的質量和生產效率，生產成本降低66.5%，實現了高效低成本規模化量產。

在將研究驗結果推廣應用到其他植物種類中時，結果發現，胺鮮脂的最佳作用濃度因植物種類不同而不同。另外，胺鮮脂對植物生根以及生長的促進作用與6-BA、NAA、IBA這樣的植物生長調節劑之間是否存在著相同與不同之處，還有待進一步研究探討。

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收稿日期：2023-06-15

作者簡介：魏進莉（1975—），女，寧夏固原人，高級工程師，主要從事植物組織培養以及脫毒技術和工廠化生產技術研究。