臍帶血免疫球蛋白E 和臍血Th1、Th2 細胞因子表達水平對嬰幼兒過敏性疾病的早期預測價值

鐘永興，嚴菊英，張徵

過敏性疾病是指IgE 介導的I 型過敏反應性疾病，近年來，其發病率在全球范圍內逐年遞增，已成為全球關注的熱點問題[1]。近年來，隨著不斷深入研究發現，子代過敏性疾病的發生發展與臍帶血IgE、T淋巴細胞亞群密切相關，但具體臨床意義有待進一步研究[2]。本文旨在探討臍帶血IgE 及臍帶血細胞因子對嬰幼兒過敏性疾病的診斷價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 納入2019 年1 月至2020 年12 月于紹興市婦幼保健院成功分娩的足月新生兒400例，納入新生兒均檢測出生時臍帶血IgE、臍帶血Th1、Th2 細胞因子水平。對其追蹤隨訪2 年，共隨訪到341 例（85%），根據是否發生過敏性疾病分為過敏性疾病組（98 例），未發生的納入對照組（243 例）。本研究經紹興市婦幼保健院醫學倫理委員會審批通過，家屬均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 納入及排除標準 納入標準：（1）所有新生兒出生無窒息搶救史，均為足月兒；（2）經培訓過的兒科專家診斷為過敏性疾病。排除標準：（1）出生時伴有呼吸、凝血、肝功能、腎功能、神經系統、循環系統等嚴重臟器疾病者；（2）合并惡性腫瘤者；（3）臨床及隨訪資料不完整者。

1.3 方法

1.3.1 臍帶血采集、檢測 胎兒分娩后，由受過專業培訓的醫護人員收集孕婦分娩時的臍帶血（臍靜脈血）4 ～6 ml，6 ～24 h內分離血清，置—70℃保存，待檢。采用ELISA 法進行IgA 測定，任何IgA ＞30 IU/L 視為污染標本，予以排除，本研究臍血標本均未被母血污染，符合要求。IgE 采用電化學發光法（德國羅氏診斷有限公司）檢測，細胞因子測定采用Bio-Plex 懸浮芯片系統。

1.3.2 隨訪 分別于嬰兒出生時，生后1、3、6、12、18及24 個月進行問卷調查，包括孩子性別、出生方式、出生季節、喂養方式、家庭過敏性疾病或疾病史、有無飼養寵物、母親孕期吸煙史、家族成員吸煙史等。

1.4 觀察指標 記錄新生兒隨訪期間過敏性疾病發生情況。過敏性疾病定義：明顯的過敏性疾病是通過出現特應性皮炎、支氣管哮喘、過敏性鼻結膜炎、過敏性蕁麻疹或胃腸道過敏的癥狀或體征來診斷的。如果有在檢查時未觀察到的特定癥狀或體征，則可能存在過敏性疾病，包括瘙癢性性濕疹、感染期間或其他情況下反復出現的喘息、持續的鼻分泌物或沒有呼吸道感染的打噴嚏和眼睛瘙癢。

1.5 統計方法 采用SPSS 26.0 軟件進行數據整理和分析。計量資料以均數±標準差表示，采用獨立樣本t檢驗；計數資料采用2檢驗；相關性分析采用Pearson相關分析；以ROC曲線評估過敏性疾病患兒特異性檢測指標，根據Youden 法確定預測過敏史疾病患兒的最佳臨界點。P ＜0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 過敏性疾病發生情況 所有新生兒隨訪2 年，隨訪到341 例，隨訪率85%。341 例中出現過敏性疾病98 例，發病率為28.74%，其中嬰兒濕疹30 例、過敏性鼻炎26 例、喘息性支氣管炎18 例、急性毛細支氣管炎15 例、蕁麻疹和藥疹9 例。

2.2 兩組一般資料比較 兩組性別、出生方式、出生季節、喂養方式、家中有無飼養寵物、母親孕期吸煙史及家庭成員吸煙史差異均無統計學意義（均P ＞0.05），兩組家庭過敏性疾病或疾病史差異有統計學意義（P ＜0.05），見表1。

表1 兩組患兒基本資料比較例例

2.3 兩組臍帶血IgE、Th1 及Th2 水平比較 過敏性疾病組臍血IgE、IL-4 均高于對照組，IL-2、IL-10、TNF- 及IFN-r均低于對照組，差異均有統計學意義（均P ＜0.05），見表2。

表2 兩組臍帶血IgE、Th1 及Th2 水平比較

2.4 臍帶血細胞因子和IgE 的相關性 Pearson 相關分析顯示，IL-1 與IL-8、IL-17A、IL-12p70 均呈正相關（r=0.31、0.33、0.33，均P ＜0.05），IL-17A 與IL-12p70 呈正相關（r=0.31，P ＜0.05），見表3。

表3 相關變量間的相關性

2.5 ROC 曲線 ROC 曲線顯示，IL-4、IgE 曲線下面積均為0.82。IL-4、IgE 的臨界值分別為0.61pg/ml、0.67 IU/ml時，其區分過敏性疾病與非過敏性疾病的敏感性分別為89.8%、76.5%，特異性分別為70.6%、74.8%，見圖1。

圖1 ROC 曲線

3 討論

過敏性疾病可發生于皮膚、鼻、眼部、支氣管、腸道等全身各個組織器官[3]，其機制為過敏源作用于機體不同靶點導致不同過敏性疾病發生，這可能與過敏刺激形成的高IgE 過度免疫應答有關。過敏易感體質發生過敏性疾病的風險更高，更易發生過敏性鼻炎、特應性皮炎、過敏性哮喘三大過敏性病[4]，而子代發生過敏性疾病的風險與其父母有過敏性疾病史密切相關[5-6]，本研究結果亦與之相符。

Th1 和Th2 細胞（產生特定的細胞因子分別是IFN- 和IL-4）被認為是調節過敏變態反應的主要細胞群，其機制主要是環境過敏原優先激活Th2 細胞及釋放Th2 相關細胞因子導致機體Th1/Th2 失衡[7-8]。IL-4 可促進B 細胞反應和IgE 的分泌，IL-4 與IgE存在正向促進作用，這可以解釋本研究中過敏性疾病組臍血IgE、IL-4 均高于對照組原因。此外，本研究發現IL-2、IL-10、TNF- 、IFN-r 低于對照組，表明臍血TH2 因子占優勢可能導致子代過敏性疾病發生，這也進一步證實Th1/Th2 失衡與過敏性疾病發生發展有關，且在圍產期已經存在。孕期母體臍血Th2 占優，Th1/Th2 失衡，Th1/Th2 相關細胞因子變化，會促進日后過敏的發生[9-10]。另外國內學者最新研究指出臍血中IL-10 分泌機制受損，TNF- 、IFN-r濃度較低，可能會導致變應原免疫耐受失調，導致日后哮喘、喘息、過敏性鼻炎風險增加[11]，本研究結果與以上研究結論相符。

本研究顯示IL-1 與IL-8、IL-17A、IL-12p70 和IL-17A與IL-12p70 呈正相關，表明人體內各種細胞因子是相互促進的。細胞因子在自分泌反饋回路中進一步促進T 細胞分化，會進一步刺激過敏反應和嗜酸性炎癥、以及上皮和平滑肌細胞最終導致過敏等病理學癥狀的發生[12]。而臍血IgE、臍血細胞因子IL-4 可作為嬰幼兒過敏性疾病的預測因子，這與國內臍血IgE、IL-4 檢測對2 歲內嬰幼兒特應性疾病有一定預測作用的結論相符[13]。用IgA 作為生物標志物評估臍帶血與母體血液的污染，結果IgA 均＜30 IU/L，提示臍血標本未被母血污染[14]，排除了潛在的臍血IgE 的錯誤分類的可能。

利益沖突 所有作者聲明無利益沖突

作者貢獻聲明 鐘永興：實驗操作、論文撰寫；張徵：數據整理、統計學分析；嚴菊英：研究指導、論文修改、經費支持