動(dòng)物口蹄疫的檢疫與防疫探析

文│宋麗 駱幫清 丁幸福 楊紅 文武 徐小和 劉廷鐵 謝鳳萍（湖北省荊門市農(nóng)業(yè)綜合執(zhí)法支隊(duì)）

由RNA病毒科的口蹄疫病毒引起的口蹄疫是一種嚴(yán)重的疾病，主要影響牛、羊和豬等動(dòng)物，也可在動(dòng)物和人之間相互傳染。該疾病具有急性發(fā)熱和高傳染性的特點(diǎn)。臨床癥狀主要表現(xiàn)為在皮膚或黏膜形成水皰和潰瘍，具有高度傳染性、廣泛流行、嚴(yán)重危害和迅速發(fā)病等特點(diǎn)，在疫區(qū)中，發(fā)病率可高達(dá)100%。如果無法及時(shí)控制該病，將會(huì)導(dǎo)致更多的病例，給養(yǎng)殖者帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。因此，對(duì)確診為口蹄疫的牲畜應(yīng)進(jìn)行隔離，并加強(qiáng)日常的防護(hù)工作。筆者旨在通過綜合診斷患有口蹄疫的牲畜，根據(jù)病癥采取具體的防治措施，以避免畜牧業(yè)遭受更大損失。

一、動(dòng)物口蹄疫的診斷

1.口蹄疫傳染源。口蹄疫的傳染源主要是處于潛伏期和發(fā)病期的動(dòng)物。受感染的動(dòng)物通過其器官和排泄物攜帶著口蹄疫病毒。當(dāng)動(dòng)物排出分泌物時(shí)，病毒也被帶到外部環(huán)境中，對(duì)生態(tài)環(huán)境產(chǎn)生重大影響。

2.易感動(dòng)物感染途徑。該病不僅死亡率極高，最可怕的是傳染方式極具多樣性，非常容易擴(kuò)散到各個(gè)地方中去，除日常接觸外，呼吸的空氣與攝入的飲食也是較常見的傳染途徑。

3.口蹄疫的發(fā)病特征。口蹄疫通常在動(dòng)物幼崽中發(fā)病率較高，且很難有效控制病情，常導(dǎo)致養(yǎng)殖場(chǎng)大范圍的疫情暴發(fā)，特別是春冬季節(jié)為口蹄疫的高發(fā)期。該病毒可以通過動(dòng)物的直接或間接接觸迅速傳播，同時(shí)能在動(dòng)物的排泄物和飼料中較長(zhǎng)時(shí)間存活。

（1）早期癥狀。動(dòng)物在感染病毒后的2～4天才會(huì)表現(xiàn)出病癥，存在潛伏期。當(dāng)動(dòng)物受感染時(shí)，口腔和蹄部會(huì)出現(xiàn)水皰。動(dòng)物的口鼻、口腔、腳蹄以及腹部乳房周圍的皮膚也會(huì)出現(xiàn)水皰，動(dòng)物體溫持續(xù)升高，某些部位甚至可能逐漸腐爛。如果動(dòng)物在感染后1～2周才出現(xiàn)癥狀，那些患有水皰的部位將慢慢結(jié)痂。有些動(dòng)物的發(fā)病癥狀可能會(huì)持續(xù)約3周，持續(xù)時(shí)間越長(zhǎng)病情越嚴(yán)重。隨著病情的加重，動(dòng)物體上患有水皰的部位會(huì)在2～3天內(nèi)破裂，嚴(yán)重時(shí)甚至?xí)?dǎo)致蹄殼脫落。在這一階段內(nèi)，如果沒有發(fā)生其他病毒感染，動(dòng)物有可能自愈，但這并不代表病毒會(huì)完全從動(dòng)物體內(nèi)消除。口蹄疫病毒具有特別長(zhǎng)的潛伏期，可以在動(dòng)物體內(nèi)存活達(dá)半年左右。如果在水皰破裂時(shí)同時(shí)感染其他病毒，病情將會(huì)變得更加嚴(yán)重，甚至無法收拾，會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物的蹄部無法正常行走跳躍。

（2）疾病特征。動(dòng)物在感染口蹄疫后，口腔內(nèi)會(huì)出現(xiàn)大量的潰瘍和

水皰，影響其正常進(jìn)食，導(dǎo)致幼崽逐漸消瘦。受感染部位也會(huì)出現(xiàn)多個(gè)小水皰，身體的腐爛現(xiàn)象會(huì)導(dǎo)致出血，尤其在胃部、口腔和腸道等地方。另外，如果動(dòng)物正處于孕期，由于其自身抵抗力下降，一旦感染口蹄疫很可能出現(xiàn)流產(chǎn)的現(xiàn)象。即使是勉強(qiáng)生存的幼仔也可能患有先天性的心肌炎，心包會(huì)出血，幸存率極低。而強(qiáng)壯的成年動(dòng)物由于其自身抵抗力強(qiáng)，死亡率相對(duì)較低。判斷動(dòng)物是否患有口蹄疫，還可以通過身上是否出現(xiàn)虎斑狀病變來推斷。

4.血清學(xué)診斷。

（1）補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)（CFT）。在1952年，Brooksby發(fā)明了免疫熒光試驗(yàn)（CFT，Complement Fixation Test）。這一試驗(yàn)主要基于對(duì)不同抗體進(jìn)行相關(guān)研究，通過對(duì)紅細(xì)胞、補(bǔ)體等指標(biāo)進(jìn)行判斷是否能產(chǎn)生新的抗體。如果產(chǎn)生溶血現(xiàn)象，則結(jié)果為陰性；反之則為陽性。CFT這種判斷方法客觀可靠，但要準(zhǔn)確掌握各種要素的使用量，否則結(jié)果可能會(huì)有偏差。

（2）病毒中和試驗(yàn)（VNT）。在國(guó)際上，口蹄疫病毒的檢測(cè)常常使用病毒中和試驗(yàn)（Virus Neutralization Test，VNT）來確定動(dòng)物是否感染了該病毒。VNT是世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）檢測(cè)口蹄疫病毒的主要標(biāo)準(zhǔn)。許多其他形式的檢測(cè)方法都是參考VNT的基礎(chǔ)上進(jìn)行開發(fā)和應(yīng)用的。這種方法具有極高的敏感性，可以詳細(xì)檢測(cè)口蹄疫病毒的抗原和抗體。然而，VNT的一個(gè)不足之處是必須依賴活體動(dòng)物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。使用活病毒在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行這種檢測(cè)方式的操作要求很高，很少有實(shí)驗(yàn)室能夠滿足這些要求。野外田間試驗(yàn)無法區(qū)分產(chǎn)生的抗體是由于自身免疫還是感染引起的。

（3）瓊脂免疫擴(kuò)散試驗(yàn)（AGID）。AGID（Agar Gel Immunodiffusion）是一種用于檢測(cè)病毒抗原和抗體的方法。在感染了口蹄疫病毒（FMDV）的組織液中提取感染源，然后通過該方法找到病毒的抗原。將提取的抗原放置在瓊脂內(nèi)，可以觀察到血清和抗原的生長(zhǎng)速度，通常只需要兩天就能得出結(jié)果。該方法適用于檢測(cè)曾感染過FMDV或接種過FMDV疫苗的動(dòng)物，該檢測(cè)方法能夠很好地區(qū)分感染動(dòng)物和免疫動(dòng)物。

（4）酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。ELISA（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）是一種新型的檢測(cè)技術(shù)，已經(jīng)得到醫(yī)學(xué)界的廣泛認(rèn)可。ELISA技術(shù)包括液相阻隔、固相結(jié)合和非直接ELISA等多種方式。根據(jù)不同的檢測(cè)內(nèi)容，選擇相應(yīng)的方式進(jìn)行檢測(cè)。通常情況下，ELISA主要用于動(dòng)物疫苗免疫抗體水平或口蹄疫感染的檢測(cè)。固相競(jìng)爭(zhēng)ELISA具有明顯的優(yōu)勢(shì)，是在液相阻斷的基礎(chǔ)上進(jìn)行改進(jìn)的方法。其特異性指標(biāo)高達(dá)99.5%，敏感指標(biāo)達(dá)到100%。后來，OIE指定ELISA作為口蹄疫病毒的主要血清學(xué)檢測(cè)方法，間接ELISA用于診斷抗原，需要使用未結(jié)構(gòu)化的FMD蛋白類型，如2C、3AB、3ABC和3D來檢測(cè)感染狀態(tài)下動(dòng)物的血液抗體和健康動(dòng)物的血清抗體。在不同研究中，使用了合成肽包被抗原構(gòu)成的間接ELISA檢測(cè)儀、國(guó)外的隔斷ELISA檢測(cè)儀以及多克隆抗體的液相阻斷等進(jìn)行了比較。試驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，這三類檢測(cè)儀所得的結(jié)果沒有顯著差異，而合成肽包被抗原構(gòu)成的間接ELISA檢測(cè)儀具有簡(jiǎn)單易用的優(yōu)勢(shì)。同時(shí)，研究者還開發(fā)了用于檢測(cè)口蹄疫的O、A、AsiaI抗體的ELISA方法。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，該檢測(cè)方法的各項(xiàng)指標(biāo)均符合標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)過大量測(cè)試，發(fā)現(xiàn)各項(xiàng)指標(biāo)表現(xiàn)良好，其中變異指標(biāo)降低至10%，證明該診斷方法可以應(yīng)用于口蹄疫病毒的檢測(cè)。

另外，利用以MAb2D8為包被抗體，以HRP作為檢測(cè)因子，借助MAb2E10抗體，開發(fā)出了一種用于檢測(cè)FMDV和Asia1抗體的夾心ELISA法。這種檢測(cè)方法對(duì)于FMDV病毒的檢測(cè)比較敏感，最低可檢測(cè)到103TCID50的病毒，而且可以排除A型FMDV、O型FMDV、牛呼吸道病毒、腸道病毒、牛氣管炎病毒、鼻炎病毒等陰性病毒。

二、動(dòng)物口蹄疫的防疫

1.嚴(yán)格進(jìn)行消毒。為了保障養(yǎng)殖場(chǎng)和周邊環(huán)境的健康，應(yīng)落實(shí)一系列隔離措施和消毒工作。外來車輛和人員嚴(yán)禁進(jìn)入養(yǎng)殖場(chǎng)，以防止帶入病原體。養(yǎng)殖場(chǎng)被隔離處理，并使用戊二醛進(jìn)行消毒。通常每天會(huì)進(jìn)行兩到三次消毒操作，戊二醛的濃度設(shè)置為1%～3%。另外，為了預(yù)防感染，適量的阿莫西林會(huì)加入飼料中。進(jìn)場(chǎng)的車輛必須接受嚴(yán)格的消毒和盤查，不允許外來車輛進(jìn)入工廠區(qū)域，以防止病菌和病毒傳入。在大門口會(huì)設(shè)置消毒池，車輛進(jìn)入后必須通過消毒池，確保徹底消毒，以達(dá)到杜絕外來病原體的目的。

2.做好隔離工作。口蹄疫病毒傳播途徑廣泛，包括患病動(dòng)物排出的糞便和呼出的氣體等，都可能攜帶病原體。一旦確診有口蹄疫的患病動(dòng)物，應(yīng)立即將其隔離飼養(yǎng)，并劃定其活動(dòng)范圍，禁止與其他動(dòng)物接觸，同時(shí)也不允許共用器具。此外，應(yīng)盡快請(qǐng)獸醫(yī)進(jìn)行診斷，以防止疫情擴(kuò)散。由于不同年齡段的動(dòng)物免疫力差異較大，如果條件允許，可以采取分點(diǎn)飼養(yǎng)的模式，以減少病毒傳播的風(fēng)險(xiǎn)。對(duì)飼養(yǎng)人員的要求也應(yīng)加強(qiáng)，要求其不接觸患病動(dòng)物，經(jīng)常進(jìn)行消毒工作，以預(yù)防交叉感染。

3.加強(qiáng)飼養(yǎng)管理。管理者在口蹄疫防控工作中應(yīng)高度重視飼養(yǎng)管理。這包括勤打掃和勤消毒飼養(yǎng)環(huán)境，嚴(yán)格控制各類飼料的流入，以防止患病動(dòng)物傳入。此外，還應(yīng)減少動(dòng)物的應(yīng)激反應(yīng)，及時(shí)觀察動(dòng)物的健康狀況。養(yǎng)殖場(chǎng)應(yīng)建立合理的防疫程序，定期進(jìn)行消毒工作，保持環(huán)境的衛(wèi)生。

4.加強(qiáng)接種管理。動(dòng)物口蹄疫防治的第一措施是進(jìn)行免疫接種，因?yàn)橐呙缱⑸涫亲钣行У姆乐畏绞健Ｓ捎诳谔阋叩膫魅拘暂^強(qiáng)且致死率高，傳播速度也很快，保養(yǎng)動(dòng)物時(shí)應(yīng)注重對(duì)該病的防御，特別是要加強(qiáng)動(dòng)物的疫苗接種以增強(qiáng)抵抗力。當(dāng)前我國(guó)主要使用油佐劑滅活疫苗進(jìn)行口蹄疫的接種，市場(chǎng)上接種范圍已經(jīng)達(dá)到了80%以上。這種疫苗可以在動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生口蹄疫病的抗體，從而減少患病率。接種頻率方面，母畜每年需要接種三次，公畜每年需要接種四次。在配種前一般需要進(jìn)行1～2次免疫。幼崽在斷奶后的15天時(shí)需要進(jìn)行一次接種，30天時(shí)再進(jìn)行一次接種，然后按照正常的免疫程序進(jìn)行接種。

三、結(jié)語

動(dòng)物口蹄疫是一種具有高傳染性和致死率的疾病，在確診時(shí)需要綜合考慮多個(gè)方面的癥狀進(jìn)行診斷。此病不僅對(duì)動(dòng)物健康有威脅，還可以感染人類，因此在養(yǎng)殖過程中對(duì)飼養(yǎng)人員的健康構(gòu)成威脅。為了確保畜牧業(yè)的安全生產(chǎn)和養(yǎng)殖業(yè)的順利發(fā)展，需要加強(qiáng)口蹄疫的診斷與防治工作，并加強(qiáng)免疫和日常監(jiān)測(cè)。這樣可以保證口蹄疫防控工作的質(zhì)量和效果。養(yǎng)殖者應(yīng)當(dāng)認(rèn)識(shí)動(dòng)物口蹄疫防治的重要性，注重疫情的防御控制，及時(shí)治療患病動(dòng)物。發(fā)現(xiàn)類似癥狀后要及時(shí)隔離，對(duì)其活動(dòng)范圍進(jìn)行全面消毒，以防止疾病進(jìn)一步傳播，從而降低經(jīng)濟(jì)損失，保護(hù)養(yǎng)殖戶的利益。