青錢柳水提物對果糖誘導的代謝綜合征大鼠糖脂代謝的影響

陳靚,田星,鄒雅倩,慕佳,陳絮蒙

(湖南中醫藥大學 藥學院,湖南 長沙,410208)

代謝綜合征(metabolic syndrome, MS)是由多種代謝紊亂狀態構成的癥候群,表現為中心肥胖、血糖血脂異常、胰島素抵抗等核心癥狀,是進一步造成代謝性疾病和心腦血管疾病的重要危險因素,嚴重并長期影響人類生命健康[1]。當前,由于人們飲食習慣和生活方式的不斷變化,導致全球代謝綜合征患病率持續上升。該項疾病機制復雜、病程長、并發癥多,藥物治療難度較大。近年來,大量研究表明一些藥食同源的天然植物及其提取物對代謝綜合征的防治具有較好效果[2-4],受到人們廣泛的關注。通過日常飲食積極開展代謝綜合征防控工作,具有較高的社會價值和經濟價值。

青錢柳 (CyclocaryaPaliurus)也被稱為金錢柳、金錢李等,是中國特有的一種寶貴植物資源。在湖南等南方多省,自古素有將青錢柳作為“甜茶”日常飲用的民間習俗,青錢柳的安全性和風味在長期使用中均得到認可[5]。2013年,青錢柳被批準為“新食品原料”[6],相關功能性食品被相繼研究開發。以青錢柳葉為原料研制的保健茶已成為國家地理標志產品,這也是我國第一個獲美國食品藥品監督管理局認證的保健茶,市場前景良好。雖然已有大量研究表明青錢柳中富含多糖、三萜、酚類等活性成分,其提取物具有降血糖、降血脂、降血壓等多種功效[7-9],但鮮見青錢柳調節糖脂代謝作用和機制的深入研究。因此,本研究通過長期高果糖喂養誘導大鼠代謝綜合征模型,評價青錢柳對動物糖脂代謝紊亂的調節作用,探討其機制是否涉及炎癥及氧化應激。最后通過網絡藥理學分析青錢柳作用于代謝綜合征的物質基礎和潛在靶點-功能-通路,為深入研究開發青錢柳資源提供參考依據和理論基礎。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

SD雄性大鼠,8～10周齡,體質量280～320 g,SPF級,合格證號SCXK(湘)2021-0002。湖南中醫藥大學實驗動物中心購買及飼養,實驗方案(編號LLBH-202206220003)經實驗動物倫理委員會批準實驗方案。

青錢柳干葉產地為湖南常德石門壺瓶山,由湖南省月嶺山農林科技股份有限公司提供。

果糖、葡萄糖,上海麥克林生化科技股份有限公司;總膽固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白(low-density lipoprotein,LDL-C)、高密度脂蛋白(high-density lipoprotein,HDL-C)試劑盒,南京建成生物工程研究所有限公司;大鼠腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白細胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白細胞介素-6(interleukin-6,IL-6)ELISA試劑盒,武漢博士德生物工程有限公司;超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)試劑盒,京建成生物工程研究所有限公司;大鼠晚期糖基化終末產物(advanced glycation endproducts,AGEs)ELISA試劑盒,江蘇菲亞生物科技有限公司。

1.2 儀器與設備

YJCW20/1+1微壓煎藥機,長沙卓成醫療器械有限公司;CA-2610冷卻水循環裝置、NVP-2000隔膜真空泵,東京理化器械株式會社;R-1010旋轉蒸發儀,鄭州長城科工貿有限公司;GA-3型血糖儀及試紙,三諾生物傳感股份有限公司;DLX-880 酶聯免疫儀,美國BIO-TEK儀器有限公司;RM2016病理切片機,徠卡顯微系統(上海)貿易有限公司;真空冷凍干燥機,美國LABCONCO公司。

1.3 實驗方法

1.3.1 青錢柳水提物制備

將青錢柳干葉加入10倍質量的水浸泡30 min,待青錢柳葉軟化后放入提取罐,120 ℃煮沸后煎煮30 min。過濾后將剩余青錢柳葉繼續加8倍質量的水,120 ℃煮沸后煎煮30 min。過濾后將2次所得的濾液合并,76 kPa、56 ℃旋蒸濃縮后冷凍干燥備用。

1.3.2 大鼠代謝綜合征模型構建及分組

動物在標準受控的環境中飼養,條件為:溫度22～24 ℃,濕度55%,通風良好,明/暗周期12 h。本研究意在探究青錢柳作為功能性食品長期攝入對糖脂代謝紊亂的影響,而非不同攝入劑量的作用。因此,根據文獻[10-11]及前期預實驗選擇800 mg/kg·d作為青錢柳干預濃度。適應性喂養1周后,36只大鼠隨機分成4組,實驗設計為:正常對照組(以下簡稱正常組,n=9)、代謝綜合征模型組(以下簡稱模型組,n=9)、青錢柳水提物干預組(以下簡稱青錢柳干預組,n=9)、青錢柳水提物對照組(以下簡稱青錢柳對照組,n=9)。將10%(體積分數)果糖溶液替代飲用水供模型組和青錢柳干預組大鼠自由飲用,10周建立代謝綜合征模型。期間各組喂養及干預方式如圖1所示。每天對大鼠基本形態進行觀察并記錄食物和飲水消耗量,每周測量一次體質量和空腹血糖值。10周后,據“1.3.3節”方法完成口服葡萄糖耐量試驗(oral glucose tolerance test, OGTT)和胰島素耐量試驗 (insulin tolerance test, ITT),量取大鼠腰圍、體長,并根據公式(1)計算Lee′s指數[12]:

圖1 大鼠代謝綜合征模型構建及干預方案Fig.1 Construction of rat metabolic syndrome model and intervention

(1)

實驗結束后,禁食不禁水(普通飲用水,下同)過夜,用戊巴比妥鈉將大鼠麻醉。經腹主動脈插管取血,靜置過夜后離心取上清,分離血清;處死大鼠后迅速分離并漂洗肝臟組織,用濾紙盡量吸干水分后稱取組織質量,按個體肝臟質量/體質量計算相應肝臟指數[13]。將用于組織切片的肝臟組織浸泡于4%(體積分數)多聚甲醛中,過夜后更換浸泡液。其他肝臟組織加入9倍組織質量的冰生理鹽水,組織勻漿機研磨后離心取上清。

1.3.3 OGTT和ITT

OGTT:大鼠禁食不禁水12 h,測量0 min時血糖水平。后經灌胃立即給予大鼠 1.5 g/kg葡萄糖溶液(0.3 g/mL),測量15、30、60、90、120 min時血糖水平。

ITT:大鼠禁食不禁水6 h,測量0 min時血糖水平。后立即腹腔注射1.6 mL/kg胰島素注射液(0.3 U/mL),測量15、30、60、90、120 min時血糖水平。

1.3.4 肝臟HE染色及病理評分

經固定-脫水-包埋-切片-脫蠟等常規步驟后,對各組大鼠肝臟標本進行HE染色。鏡下觀察、拍照并據標準評分。評分標準[14]為:結構,組織結構正常清晰、細胞形態排列整齊(0分);組織結構正常清晰、細胞形態排列輕微變形、偶見脂滴空泡(1分);組織結構改變、細胞形態結構明顯變形、較多脂滴空泡(2分);組織結構顯著異常、細胞形態結構明顯變形、大量脂滴空泡(3分);大面積空泡樣病變(4分)。炎癥,無炎性細胞浸潤(0分);有輕微炎性浸潤(1分);有較多炎性浸潤(2分);有顯著炎性浸潤顯著(3分);有炎性壞死(4分)。胞質染色,胞質染色均一(0分);胞質染色輕微變化(1分);胞質染色明顯(2分);胞質染色顯著變化(3分);組織壞死(4分)。將同一肝臟組織的結構、炎癥、胞質染色評分相加,即為該樣本的肝臟病理評分。

1.3.5 血清及肝臟組織生化指標測定

按試劑盒說明測定大鼠血清和肝臟組織中TC、TG、LDL-C和HDL-C。

1.3.6 血清及肝臟組織炎癥因子、氧化應激和AGEs水平測定

按ELISA試劑盒說明測定大鼠血清及肝臟組織中TNF-α、IL-1β、IL-6和AGEs水平。按檢測試劑盒說明測定大鼠肝臟組織SOD活力和GSH、MDA水平,以反映其氧化應激狀態。BCA法測定肝臟勻漿樣本蛋白濃度以校正結果。

1.3.7 青錢柳活性成分篩選及靶點預測

因多個數據庫中均無法找到青錢柳相關有效成分,故以“青錢柳”和“Cyclocaryapaliurus”為主題詞檢索文獻,進行活性成分篩選。Uniport數據庫 (https://beta.uniprot.org/)比對靶點蛋白標準名稱,Swiss Target Prediction數據庫 (http://www.swisstargetprediction.ch/)估測青錢柳活性成分的潛在靶點。

在Drugbank (https://go.Drugbank.com/)、GenecardS (https://www.genecards.org/ds)、Omim (https://omim.org/)等數據庫檢索代謝綜合征相關疾病靶點,并結合Venny 2.1.0 (https://bioinfogp.cnb.csic.es/tools/venny/)構建有效成分靶點與代謝綜合征的韋恩圖。

在Cytoscape 3.9.1軟件中導入交集靶點并進行分析,完成“青錢柳-成分-靶點-代謝綜合征”關系網絡的構建。利用網絡拓撲學得到青錢柳干預代謝綜合征的主要有效成分,以連接度、介度和緊密度中位數作為其閾值篩選出有效成分。

1.3.8 蛋白-蛋白互作網絡構建和生物功能預測

借助String數據庫 (https://cn.string-db.org/)對青錢柳與代謝綜合征的相關交集靶點進行蛋白-蛋白互作網絡 (protein-protein interaction,PPI)構建與分析,置信度≥0.4。使用Cytoscape軟件,以自由度、中介中心度、接近中心度、鄰里連通性中位數為閾值篩選相關核心靶點。

將找到的交集靶點信息導入David數據庫(https://david.ncifcrf.gov/home.jsp),完成KEGG通路富集分析。

1.4 數據統計與分析

數據均以平均值±標準差表示。采用SPSS 26.0軟件統計,GraphPad Prism 9軟件作圖。組間差異采用One-Way ANOVA或ANCOVA檢驗分析,雙側P<0.05認為有統計學差異。

2 結果與分析

2.1 大鼠基本狀態和體型

自由飲用果糖溶液后,模型組和青錢柳干預組大鼠的攝食量均有下降趨勢,而飲水量則明顯增加。果糖為能量性甜味劑,提供的能量使大鼠產生飽腹感,這可能是其攝食意愿降低的主要原因。此外,果糖造成了大鼠血漿高滲狀態,進而增加其飲水意愿。造模10周后,模型組大鼠體態肥胖、行動遲緩、精神不振、狂躁易怒,青錢柳干預組大鼠體態基本正常、活動能力強、精神狀態良好、不易煩躁,說明青錢柳能明顯改善果糖給大鼠帶來的形態和精神狀態變化。青錢柳對照組大鼠和正常組大鼠基本狀態無異常表現。

體質量反映了機體整體代謝水平。如圖2-A所示,果糖溶液自由飲用2周后,模型組和青錢柳干預組大鼠體重相較于正常組略有下降,結果無統計學差異 (P>0.05),這可能是由于該組大鼠食物攝入量降低造成。4周后,模型組大鼠體質量較正常組顯著升高(P<0.01),且此顯著性差異一直保持至第10周實驗結束。這與前人所建代謝綜合征模型特點一致,長期高果糖攝入可造成大鼠肥胖[15]。4周時,青錢柳干預組大鼠體質量較模型對照組顯著下降(P<0.01),且此優勢一直保持至10周實驗結束。青錢柳對照組大鼠與正常組相比,體質量結果無顯著性差異(P>0.05)。表明青錢柳水提物可使果糖誘導的大鼠體質量增加逐步回歸正常,有效降低其患代謝綜合征風險。

A-體質量變化;B-腰圍;C-Lee’s指數圖2 各組大鼠體型變化Fig.2 Body size of rats注:與正常組比較,*表示P<0.05,**表示P<0.01;與模型組比較,#表示P<0.05,##表示P<0.01(下同)。

腰圍是判斷機體腹型肥胖的重要指標,代謝綜合征核心表現之一即為中心性肥胖。如圖2-B所示,果糖溶液自由飲用10周后,模型組大鼠腰圍較正常組顯著增加(P<0.01)。青錢柳水提物能顯著改善果糖造成的腰圍增加(P<0.01),且對正常飲食的大鼠腰圍沒有影響(P>0.05)。Lee′s指數是評價成年大鼠肥胖的關鍵性指標。10周后,各組大鼠Lee′s指數結果(圖2-C)趨勢與腰圍變化趨勢(圖2-B)完全一致。體重、腰圍及Lee′s指數結果共同說明青錢柳水提物可有效調節代謝紊亂狀態,改善果糖誘導的大鼠體態變化。

2.2 大鼠肝臟變化

肝臟是機體最為重要的代謝中心,當肝臟被代謝性疾病影響將直接反映為肝臟脂質堆積及質量變化[16]。在本研究中(表1),模型組大鼠肝臟指數和肝臟組織TC、TG水平較正常組均顯著增加(P<0.01)。青錢柳水提物可有效控制果糖誘導的肝臟指數(P<0.05)和肝臟組織TC、TG水平變化(P<0.01),提示青錢柳對肝臟的保護作用。

表1 各組大鼠肝臟指數、肝臟TC、TG水平變化Table 1 Liver index, TC, and TG levels in the liver of rats

通過HE染色,對各組大鼠的肝臟進行了病理學檢查及評分,以進一步觀察實驗中動物肝臟的變化。如圖3-A所示,正常組和青錢柳對照組大鼠肝臟組織結構正常清晰、細胞形態排列整齊,無炎性細胞浸潤且胞質染色均一。模型組大鼠肝臟組織結構異常、細胞形態結構變形、出現大量脂滴空泡及炎性浸潤、同時胞質染色也出現變化。青錢柳干預組大鼠肝臟組織病理形態改變不明顯,相較于模型組趨于正常水平,病理學評分平均值較模型組降低45%,結果有顯著性差異(P<0.05)(圖3-B)。驗證了青錢柳對于肝臟的保護作用,同時提示青錢柳可能通過調節肝臟糖脂代謝,改善果糖引起的代謝綜合征變化。

A-肝臟HE染色(100×);B-肝臟病理評分圖3 各組大鼠肝臟病理變化Fig.3 Pathological changes in the liver of rats

2.3 大鼠糖脂代謝變化

代謝綜合征中多種代謝紊亂聚集,已有多項研究報道高果糖誘導的代謝綜合征模型將出現糖脂代謝紊亂,血糖、血脂均改變明顯[17]。如圖4-A所示,高果糖喂養前期,模型組大鼠空腹血糖逐步升高,但與正常組比較并無明顯改變(P>0.05)。果糖喂養6周后至第10周實驗結束,模型組大鼠空腹血糖始終維持在較高水平,與正常組差異明顯(P<0.01)。青錢柳干預組大鼠空腹血糖值一直處于正常范圍內,該組大鼠自第8周起空腹血糖值與模型組差異明顯(P<0.01)。OGTT(圖4-B)試驗結果顯示,通過10周的干預,模型組大鼠血糖調節能力降低(P<0.05),而青錢柳能顯著提高其糖耐量(P<0.05)。ITT(圖4-C)試驗結果可見,模型組大鼠胰島素敏感性降低,青錢柳能一定程度改善其胰島素敏感性,但除60 min時青錢柳組血糖改變與模型組比較有顯著性差異外(P<0.05),其他各時間點2組差異無統計學意義。

A-空腹血糖;B-OGTT;C-ITT圖4 各組大鼠糖代謝變化Fig.4 Glucose metabolism of rats

血脂四項是臨床脂代謝異常相關疾病的經典檢測指標,共同反映著機體一段時間內的脂質代謝情況。如表2所示,與正常組相比,模型組大鼠血清TC、TG和LDL-C水平顯著升高(P<0.01)、HDL-C水平顯著降低(P<0.05),說明在高果糖喂養的長期影響下模型組大鼠已經出現了明顯的血脂紊亂。青錢柳干預組大鼠血清TC、TG和LDL-C水平與模型組相比顯著降低(P<0.01),HDL-C水平無顯著變化(P>0.05)。

表2 各組大鼠血脂變化Table 2 Blood fat of rats

2.4 大鼠血清及肝臟炎癥因子水平

近年來,免疫炎癥已成為代謝性疾病研究的熱門方向。自HOTAMISLIGIL等[18]首次在糖尿病和肥胖動物的脂肪中發現炎癥因子TNF-α表達顯著升高后,又有諸多研究證實其他代謝類疾病也伴隨有整體和/或局部炎癥水平的升高[19-21],慢性炎癥反應已被肯定為代謝性疾病發生發展的關鍵因素。青錢柳中富含多糖、三萜、酚類等活性成分。彭曉娟等[22]在非酒精性脂肪性肝病合并2型糖尿病大鼠模型中發現,青錢柳多糖和青錢柳黃酮能顯著減輕該模型大鼠肝臟脂肪變性及炎癥反應。在本研究的肝臟組織病理學染色結果中(圖3),也觀察到相似現象。因此推測青錢柳對代謝綜合征大鼠糖脂代謝的改善可能涉及炎癥調節。

為證實以上推論,研究檢測了各組大鼠血清炎癥因子水平,以觀察青錢柳水提物對實驗動物免疫炎癥的影響。結果如圖5-A～5-C所示,模型組大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平,與正常組比較顯著上升(P<0.01)。青錢柳干預組大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平,與模型組比較顯著下降(P<0.01)。這一結果表明,長期高果糖喂養將使機體處于炎癥紊亂狀態并誘導的代謝綜合征的發生,而青錢柳可顯著減輕其整體炎癥反應。肝臟作為代謝綜合征病理改變的核心靶器官,其局部組織炎癥處于整體炎癥風暴中心。在本研究中,大鼠肝臟微環境的炎癥水平(圖5-D～圖5-F)同整體的炎癥水平趨向一致,進一步驗證了青錢柳糖脂代謝調節機制可能涉及免疫炎癥這一假說。

A-血清TNF-α;B-血清IL-1β;C-血清IL-6;D-肝臟TNF-α;E-肝臟IL-1β;F-肝臟IL-6圖5 各組大鼠血清及組織炎性因子水平Fig.5 Inflammatory factors levels in serum and tissue of rats

2.5 大鼠肝臟氧化應激水平

氧化應激通常伴隨炎癥共同發生[23],特別是肝臟微環境中的氧化應激強關聯肝臟糖脂代謝紊亂,推動著代謝綜合征的發生發展[24]。如圖6所示,與正常組比較,模型組大鼠肝臟中SOD活力和GSH水平明顯下降(P<0.01),而MDA水平則明顯升高(P<0.01),提示果糖誘導的代謝綜合征模型大鼠肝臟微環境中存在明顯的氧化應激損傷。與模型組比較,青錢柳干預組大鼠肝臟SOD活力和GSH水平明顯升高(P<0.01),而MDA水平則明顯降低(P<0.01)。說明青錢柳可有效改善果糖誘導的肝臟脂質過氧化及氧化損傷,減輕代謝綜合征誘導的肝臟氧化應激損傷和炎癥反應。

A-肝臟SOD;B-肝臟GSH;C-肝臟MDA圖6 各組大鼠肝臟氧化應激水平Fig.6 Oxidative stress levels in the liver of rats

2.6 “青錢柳-成分-靶點-代謝綜合征”關系網絡

傳統的藥用植物研究基于“單一成分-單一靶點-單一途徑”思路,目前青錢柳物質基礎和功能機制研究割裂,不利于后續開發利用。網絡藥理學可利用計算機高級算力從海量文獻及數據庫中篩選化學成分靶點,構建“疾病-靶點-藥物-成分”等多層次網絡,有助于整體性闡明青錢柳不同成分與疾病靶點之間的關聯性[25]。本研究經文獻查閱共獲得青錢柳化學成分354個,經過篩選后保留有效活性成分166個,并將其重新編號為QQL1-166。通過數據庫比對、整合后,獲得445個青錢柳活性成分的潛在靶點。

在GenecardS(2 099個)、OMIM(1 261個)、Drugbank(9個)共3個數據庫檢索、整合后,獲得2 637個代謝綜合征疾病相關靶點。將2 637個疾病靶點與445個青錢柳靶點繪制韋恩圖以獲取交集靶點,得到交集靶點169個。

基于以上有效成分及交集靶點篩選,完成“青錢柳-成分-靶點-代謝綜合征”關系網絡的構建(圖7)。該網絡包括228個節點,580條邊。以連接度≥2、介度≥0.000 871 060 956 581 262及緊密度≥0.330 915 065 722 952,即中位數為閾值篩選。其中青錢柳中46種有效成分、47個潛在靶點達到閾值,進一步提示藥食同源植物青錢柳“多成分-多靶點”的作用特點。

圖7 “青錢柳-成分-靶點-代謝綜合征”關系網絡圖Fig.7 “Component-target-disease” relationship network

將上述結果以連接度、介度、緊密度排序,發現前十的活性成分基本為酚類化合物(表3)。目前已有多項研究提示青錢柳黃酮類和青錢柳酚酸調節代謝的可能作用[26-28],佐證該項分析結果。有趣的是,除巨大的藥用潛力外,植物中的酚類物質通常還決定其感官風味[29]。因此,有理由認為青錢柳酚類物質將是未來功能食品開發的重要部位。

表3 青錢柳干預代謝綜合征活性成分(前10)的拓撲學參數Table 3 Topological parameters of the active components of cyclocarya interfering with metabolic Syndrome (Top 10)

2.7 PPI網絡及KEGG通路富集分析

將169個交集靶點導入數據庫,隱藏沒有作用關系的節點,繪制PPI網絡。該網絡共167個節點,2 964條邊。以自由度≥12、中介中心度≥0.072 817 303、接近中心度≥0.509 090 909、鄰里連通性≥54.583 333 33,即中位數為閾值進一步篩選相關靶點,最終得到青錢柳干預代謝綜合征的潛在靶點共20個,相互關系如圖8-A所示。在這20個強相關靶點中,IL、SOD、NOS等多項炎癥、氧化應激相關靶點與本研究動物實驗結果指向一致并相互印證,提示青錢柳干預代謝綜合征的作用機制涉及炎癥及氧化應激。

為預測青錢柳作用可能涉及通路,將169個交集靶點進行KEGG通路富集。分析后共得到141條通路,排名前20的通路如圖8-B所示。其中AGE-RAGE信號通路的可信度位居首位。AGE是由葡萄糖、果糖等還原糖分子與機體物質發生反應形成的配體,有多種形式。AGEs與細胞膜上對應的受體RAGE結合產生效應,啟動下游信號級聯,廣泛參與代謝性疾病、動脈粥樣硬化及神經退行性病變等多種疾病的發生發展[30-31]。本研究進一步檢測了各組大鼠AGEs水平變化,以驗證網絡藥理學結果。在血清(圖8-C)和肝臟組織(圖8-D)中,模型組AGEs水平相較于正常組顯著升高(P<0.01),青錢柳干預組AGEs水平相較于模型組則顯著降低(P<0.01)。體內AGEs的形成受多因素影響,血糖濃度和機體代謝能力是其中較為重要的影響因素[32]。高糖狀態下,大量AGEs產生后作用于受體,激活NF-κB等信號,上調氧化應激水平、引起炎癥反應,進而加劇疾病發展[33]。新近研究發現,許多天然化合物可抑制內源性AGEs的形成并控制疾病發展[34]。因此,推測青錢柳可能通過抑制內源性AGEs生成發揮抗炎和抗氧化應激的作用,AGE-RAGE可能是青錢柳抗代謝綜合征的關鍵性通路。

3 結論

作為一種功能性甜味劑或能量補充,果糖早已廣泛應用于食品工業。現代加工食品和飲品中大量添加果糖或果葡糖漿以改善風味,造成全球果糖消費逐年上升。果糖在帶來“甜蜜”的同時,也在逐漸侵蝕著人民的美好生活。高果糖飲食造成的糖脂代謝異常將影響人體健康,顯著增加代謝綜合征的發生率和心血管疾病死亡率[35]。本研究建立了果糖誘導的代謝綜合征模型,通過10周的干預,結果顯示青錢柳水提物可顯著改善果糖誘導的大鼠基本狀態、體型、肝臟變化和糖脂代謝紊亂。這一作用可能與青錢柳緩解肝臟脂質過氧化及氧化損傷,調節整體及肝臟微環境中免疫炎癥作用有關。網絡藥理學結果與動物實驗結果相互印證,同時提示其發揮糖脂代謝調節的物質基礎主要為酚類物質,涉及AGE-RAGE等信號通路。此外,在本研究中,長期灌胃青錢柳水提物的大鼠并未出現明顯不良反應,一定程度上說明了青錢柳作為功能食品長期使用的安全性。

綜上所述,本研究運用動物模型和網絡藥理學方法,探究青錢柳水提物對果糖誘導的大鼠代謝綜合征模型糖脂代謝紊亂的調節作用,并從炎癥和氧化應激的角度初步探討了青錢柳的糖脂代謝調節機制。結果表明,青錢柳用于代謝綜合征防治的潛力較大,并有利于其應用于功能性健康食品開發。后期可通過深入研究AGE-RAGE等相關信號通路,進一步研究青錢柳對于糖脂代謝調節的具體作用機制和物質基礎。