亞甲藍分光光度法測定陰離子表面活性劑的影響因素探討

鄧 杰

（廣東省中山生態環境監測站，廣東 中山 528400）

亞甲藍分光光度法GB7494—1987 中測定陰離子表面活性劑常規方法需進行三次萃取[1]、三次反洗，最后將氯仿層合并通過脫脂棉，放入50 mL 容量瓶中再進行比色。而該標準附錄B 中說明在需要快速分析時，可采用一次萃取簡化法，在確保測量結果準確無誤下一次萃取操作過程比較簡單，在大批量測定中花費時間短且不容易積累誤差，同時在測定過程中還不需要使用大量的易揮發、毒性較大的有機試劑三氯甲烷，減輕三氯甲烷對環境和實驗人員的健康安全的影響。

1 實驗部分

1.1 實驗原理

陽離子染料亞甲藍與陰離子表面活性劑作用，生成藍色的鹽類，統稱亞甲藍活性物質（MBAS）。該生成物可被氯仿萃取，其色度與濃度成正比，用分光光度計在波長652 nm 處測量氯仿層的吸光度。

1.2 儀器與試劑

1.2.1 儀器

紫外可見分光光度計GENESYS150。

1.2.2 試劑

詳見《水質 陰離子表面活性劑的測定 亞甲藍分光光度法GB 7494—1987》。

1.3 實驗步驟[2]

1.3.1 三次萃取的步驟

將水樣移至分液漏斗，以酚酞為指示劑，逐滴加入氫氧化鈉溶液（1 mol/L）至水溶液呈桃紅色，再滴加硫酸（0.5 mol/L）到桃紅色剛好消失；加入25 mL 亞甲藍溶液，搖勻后再移入10 mL 氯仿，激烈振搖30 s，注意放氣，再緩慢旋轉分液漏斗，使滯留在內壁上的氯仿液珠降落，靜置分層；將氯仿層放入預先盛有50 mL洗滌液的第二個分液漏斗，用數滴氯仿淋洗第一個分液漏斗的放液管，重復萃取3 次，每次用10 mL 氯仿；合并所有氯仿至第2 個分液漏斗中，激烈搖動30 s，靜置分層，將氯仿層通過玻璃棉或脫脂棉，放入50 mL容量瓶中。再用氯仿萃取洗滌液2 次（每次用量5 mL），此氯仿層也并入容量瓶中，加氯仿到標線，用10 mm比色皿，測定波長652 nm 處的吸光度值，以氯仿為參比測定樣品的吸光度。

1.3.2 一次萃取的步驟

將水樣移至分液漏斗，以酚酞為指示劑，逐滴加入氫氧化鈉溶液（1 mol/L）至水溶液呈桃紅色，再滴加硫酸（0.5 mol/L）到桃紅色剛好消失；加入25 mL 亞甲藍溶液，搖勻后再移入10 mL 氯仿，激烈振搖30 s，注意放氣，再緩慢旋轉分液漏斗，使滯留在內壁上的氯仿液珠降落，靜置分層；將氯仿層放入預先盛有50 mL洗滌液的第2 個分液漏斗，用數滴氯仿淋洗第1 個分液漏斗的放液管，激烈搖動30 s，靜置分層，將氯仿層通過玻璃棉或脫脂棉，放入10 mm 比色皿中，測定波長652 nm 處的吸光度值，以氯仿為參比測定樣品的吸光度。

2 結果與分析

2.1 萃取次數對實驗的影響

從表1 可以看出，國家標準常規方法測定的樣品吸光度比快速分析方法的吸光度要大，且樣品濃度越大吸光度的差距就越大，國家標準常規方法的萃取效率比快速分析方法的萃取效率要高。

表1 不同方法對測定吸光度的影響

從表2 標準曲線的測定中可以看出，國家標準常規方法的曲線相關系數在0.999 5～0.999 6，快速分析方法的曲線相關系數在0.999 4～0.999 5，兩種方法相比，曲線的截距相差不大，斜率相差比較明顯，但是兩種方法的線性關系都良好，相關系數都能滿足曲線的要求。

表2 標準曲線的測定

從表3 可以看出，在國家標準常規方法下測定的不同濃度的標準樣品均符合要求，快速分析方法下測定的不同濃度的標準樣品均符合要求，但是國標常規方法下的標準樣品更接近中值。

表3 標準樣品的測定

2.2 三氯甲烷試劑對實驗的影響

對于三氯甲烷試劑對陰離子表面活性劑的影響，選擇廣東廣試試劑科技有限公司生產的三氯甲烷（分析純500 mL），利安隆博華（天津）醫藥化學有限公司（優級純500 mL）進行測試，測試結果如表4。

表4 不同三氯甲烷對比

由表4 可見，2 個品牌的三氯甲烷的吸光度差別較大，且濃度越高，吸光度的差距就越大，可見三氯甲烷的純度對實驗的吸光度有較大的影響，且含雜質較高、透明度低的三氯甲烷的空白值也大，使用前應驗證三氯甲烷是否符合實驗要求。

3 結論

1）從實驗中可以看出，國家標準常規方法和快速分析方法在標準曲線和測定樣品濃度均滿足實驗要求，國家標準方法萃取效率較高，測定標準樣品更加接近于中值。而快速分析方法在實驗過程中減少了三氯甲烷的用量和萃取次數，降低了監測人員的工作量和對環境的污染。

2）三氯甲烷的純度直接影響實驗的吸光度，在使用前應對三氯甲烷進行驗證。