核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體蛋白3 與高血壓患者發(fā)生左心室肥厚的關(guān)系研究

曾蓮，潘宏彬，羅秀峰，王新云

左心室肥厚作為高血壓患者最常見的靶器官損傷，可引起心力衰竭、腦梗死等心腦血管疾病，其已被證實(shí)是高血壓患者發(fā)生心腦血管疾病和全因死亡的獨(dú)立危險(xiǎn)因素［1-2］。臨床試驗(yàn)證實(shí)，盡管高血壓患者的血壓得到長(zhǎng)期有效控制，但仍有部分患者會(huì)發(fā)生左心室肥厚，提示左心室壓力和容量負(fù)荷并非左心室肥厚的單一致病因素［3-4］。炎癥反應(yīng)在高血壓及其靶器官損傷的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮了關(guān)鍵性作用［5］。核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體蛋白3（NOD-like receptor protein 3，NLRP3）是廣泛存在于細(xì)胞質(zhì)的多蛋白復(fù)合物，其可調(diào)節(jié)白介素（interleukin，IL）-1β、IL-18等多種促炎細(xì)胞因子的成熟和分泌，進(jìn)而調(diào)控炎癥反應(yīng)［6-7］。已有研究證實(shí)，高血壓患者NLRP3及IL-1β水平明顯升高［8］。且NLRP3激活后也可參與多種心血管疾病的進(jìn)展過程［9］。目前僅有一項(xiàng)研究表明，NLRP3與高血壓患者心肌功能損傷有關(guān)［10］，尚未見NLRP3與高血壓患者發(fā)生左心室肥厚關(guān)系的研究。因此，本研究旨在探討NLRP3與高血壓患者發(fā)生左心室肥厚的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 回顧性選取2021—2022年廣西壯族自治區(qū)南溪山醫(yī)院收治的382例高血壓患者為研究對(duì)象，其中男203例，女179例；年齡40～67歲，平均（53.9±4.8）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合《中國(guó)高血壓防治指南（2018年修訂版）》［11］中高血壓的診斷標(biāo)準(zhǔn)；（2）完成動(dòng)態(tài)血壓監(jiān)測(cè)及心臟超聲檢查；（3）臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）繼發(fā)性高血壓者；（2）肝、腎功能不全者；（3）合并惡性腫瘤者；（4）接受激素治療者；（5）合并先天性心臟病、心肌病者；（6）伴有認(rèn)知障礙、精神疾病者；（7）伴有視、聽覺障礙者；（8）急性冠脈綜合征者。本研究通過廣西壯族自治區(qū)南溪山醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（審批號(hào)：nxsyy-2021-037）。

1.2 臨床資料收集 （1）人口學(xué)資料：記錄患者的性別、年齡、BMI、高血壓病程、吸煙史、飲酒史、糖尿病史。（2）實(shí)驗(yàn)室檢查指標(biāo)：血脂指標(biāo)（TC、TG、HDL-C、LDL-C）、血尿酸。（3）動(dòng)態(tài)血壓監(jiān)測(cè)結(jié)果：采用深圳市星脈醫(yī)療儀器有限公司生產(chǎn)的WBP-02A型動(dòng)態(tài)血壓監(jiān)測(cè)儀收集患者24 h平均收縮壓（24 h systolic blood pressure，24 h SBP）、24 h平均舒張壓（24 h diastolic blood pressure，24 h DBP）、白晝平均脈壓（day pulse pressure，DPP）、夜間平均脈壓（night pulse pressure，NPP）及24 h動(dòng)態(tài)脈壓。（4）心臟超聲檢查結(jié)果：采用美國(guó)GE公司生產(chǎn)的Fortis彩色多普勒超聲儀測(cè)量左心室舒張末期內(nèi)徑（left ventricular end diastolic dimension，LVEDD）、左心室收縮末期內(nèi)徑（left ventricular end systolic dimension，LVESD）、室間隔厚度（interventricular septal thickness，IVST）、左心室射血分?jǐn)?shù)（left ventricular ejection fraction，LVEF）及左心室后壁厚度（left ventricular posterior wall，LVPW），計(jì)算左心室質(zhì)量指數(shù)（1eft ventricular mass index，LVMI）。LVMI=左心室質(zhì)量（left ventricular mass，LVM）/體表面積，其中LVM=0.8×1.04×〔（IVST+左心室后壁厚度+LVEDD）3-LVEDD3〕+0.6；體表面積=0.006 1×身高（cm）+0.012 8×體質(zhì)量（kg）-0.152 9。LVMI＞115 g/m2（男性）、＞95 g/m2（女性）判定為左心室肥厚［12］。（5）NLRP3 mRNA相對(duì)表達(dá)量：入院時(shí)采集患者清晨空腹靜脈血5 ml，采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測(cè)血清NLRP3 mRNA相對(duì)表達(dá)量，采用SYBR Premix Ex TaqTMⅡ熒光定量試劑盒（購(gòu)自Takara公司），上游引物為：5'-CTTTGGTATCGTGGAAGGACTC-3'，下游引物為：5'-GTAGAGGCAGGGATGATGTTCT-3'，以甘油醛-3-磷酸脫氫酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）作為內(nèi)參。反應(yīng)體系嚴(yán)格參照說明書配置，反應(yīng)條件為95 ℃ 30 s、95 ℃ 5 s、60 ℃30 s，共50個(gè)循環(huán)。反應(yīng)結(jié)束后，確認(rèn)PCR的擴(kuò)增曲線及溶解曲線，設(shè)置3個(gè)復(fù)孔，取平均值。采用Ct值計(jì)算NLRP3 mRNA相對(duì)表達(dá)量，ΔCt=CtNLRP3-CtGAPDH。根據(jù)血清NLRP3 mRNA相對(duì)表達(dá)量中位數(shù)將高血壓患者分為高表達(dá)組和低表達(dá)組。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 25.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。計(jì)數(shù)資料以相對(duì)數(shù)表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料符合正態(tài)分布以（±s）表示，兩組間比較采用成組t檢驗(yàn)；采用多因素Logistic回歸分析探討高血壓患者發(fā)生左心室肥厚的影響因素；采用ROC曲線分析血清NLRP3 mRNA相對(duì)表達(dá)量預(yù)測(cè)高血壓患者發(fā)生左心室肥厚的價(jià)值。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 臨床資料 382例高血壓患者血清NLRP3 mRNA相對(duì)表達(dá)量為0.01～0.75，中位數(shù)為0.34，高表達(dá)組（血清NLRP3 mRNA相對(duì)表達(dá)量≥0.34）194例，低表達(dá)組（血清NLRP3 mRNA相對(duì)表達(dá)量＜0.34）188例。兩組性別、年齡、BMI、高血壓病程、有吸煙史者占比、有飲酒史者占比、有糖尿病史者占比、TC、TG、HDL-C、LDL-C、24 h DBP、LVEF比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；高表達(dá)組血尿酸、24 h SBP、DPP、NPP、24 h動(dòng)態(tài)脈壓、LVEDD、LVESD、IVST、LVPW、LVMI及左心室肥厚發(fā)生率高于低表達(dá)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

2.2 高血壓患者發(fā)生左心室肥厚影響因素的單因素分析 382例高血壓患者發(fā)生左心室肥厚108例，未發(fā)生左心室肥厚274例。未發(fā)生左心室肥厚與發(fā)生左心室肥厚患者性別、年齡、BMI、高血壓病程、有吸煙史者占比、有飲酒史者占比、有糖尿病史者占比、TC、TG、LDL-C、24 h DBP、LVEF比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；發(fā)生左心室肥厚患者HDL-C、血尿酸、24 h SBP、DPP、NPP、24 h動(dòng)態(tài)脈壓、LVEDD、LVESD、IVST、LVPW、血清NLRP3 mRNA相對(duì)表達(dá)量高于未發(fā)生左心室肥厚患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 未發(fā)生左心室肥厚與發(fā)生左心室肥厚患者臨床資料比較Table 2 Comparison of clinical data between patients without left ventricular hypertrophy and patients with left ventricular hypertrophy

2.3 高血壓患者發(fā)生左心室肥厚影響因素的多因素Logistic回歸分析 以高血壓患者是否發(fā)生左心室肥厚（賦值：否=0，是=1）為因變量，以表2中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的變量（排除心臟超聲檢查指標(biāo)）（HDL-C、血尿酸、24 hSBP、DPP、NPP、24 h動(dòng)態(tài)脈壓、血清NLRP3 mRNA相對(duì)表達(dá)量）為自變量（均為實(shí)測(cè)值），進(jìn)行多因素Logistic回歸分析，結(jié)果顯示，血尿酸、24 h SBP、DPP、NPP、24 h動(dòng)態(tài)脈壓和血清NLRP3 mRNA相對(duì)表達(dá)量是高血壓患者發(fā)生左心室肥厚的獨(dú)立影響因素（P＜0.05），見表3。

表3 高血壓患者發(fā)生左心室肥厚影響因素的多因素Logistic回歸分析Table 3 Multivariate Logistic regression analysis of influencing factors of left ventricular hypertrophy in hypertensive patients

2.4 血清NLRP3 mRNA相對(duì)表達(dá)量預(yù)測(cè)高血壓患者發(fā)生左心室肥厚的價(jià)值 ROC曲線分析結(jié)果顯示，血清NLRP3 mRNA相對(duì)表達(dá)量預(yù)測(cè)高血壓患者發(fā)生左心室肥厚的AUC為0.706〔95%CI（0.651，0.761）〕，最佳截?cái)嘀禐?.42，靈敏度為57.41%，特異度為78.47%，見圖1。

3 討論

高血壓左心室肥厚指因高血壓導(dǎo)致的左心室重量增加，其病理表現(xiàn)為左心室室壁增厚及心肌重量增加和以心肌細(xì)胞肥大、心肌纖維化為主的心肌重構(gòu)，進(jìn)而增加高血壓患者預(yù)后不良的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)［13］。本研究Logistic回歸分析結(jié)果顯示，血尿酸、24 h SBP、DPP、NPP、24 h動(dòng)態(tài)脈壓和血清NLRP3 mRNA相對(duì)表達(dá)量是高血壓患者發(fā)生左心室肥厚的影響因素。

血尿酸可促進(jìn)IL-1β、超敏C反應(yīng)蛋白等炎癥因子的表達(dá)及Ⅰ型膠原蛋白的生成，促使心肌纖維化和Ⅰ型肌纖維轉(zhuǎn)換為Ⅱ型肌纖維，從而促進(jìn)左心室肥厚的發(fā)生和發(fā)展［14］。24 h SBP、DPP、NPP、24 h動(dòng)態(tài)脈壓均為動(dòng)態(tài)血壓監(jiān)測(cè)指標(biāo)，這些指標(biāo)升高提示患者血壓較高、血壓波動(dòng)大、動(dòng)脈僵硬度增加，從而導(dǎo)致左心室負(fù)荷和心肌耗氧量增加，引起左心室肥厚［15］。已有研究表明，在高血壓導(dǎo)致左心室肥厚的過程中除血壓、脈壓等血流動(dòng)力學(xué)因素發(fā)揮重要作用外，炎癥因子、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路等也可能發(fā)揮了重要作用［16］。炎癥因子可抑制內(nèi)皮細(xì)胞合成、分泌一氧化氮，進(jìn)而導(dǎo)致血管收縮和舒張功能失調(diào)，且可促進(jìn)細(xì)胞間黏附分子1、血管細(xì)胞黏附分子1的產(chǎn)生，加強(qiáng)單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞對(duì)心肌組織的浸潤(rùn)，促使心肌纖維化和心室重構(gòu)，從而引起左心室肥厚［17］。MIYAGAWA等［18］研究指出，腫瘤壞死因子α（tumour necrosis factor-α，TNF-α）作為一種促炎因子在左心室肥厚的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用，其可以通過NF-κB和p38 MAPK途徑抑制過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔助活化因子1α，提高葡萄糖的氧化能力，下調(diào)酮酸脫氫酶激酶4，降低過氧化物酶體增殖物激活受體及甾醇相關(guān)受體α的轉(zhuǎn)錄因子的DNA結(jié)合活性，從而促使心室肥厚。此外，有研究表明，IL-18與左心室肥厚的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，IL-18與其受體結(jié)合后可誘導(dǎo)細(xì)胞因子、黏附分子等的表達(dá)，加重炎癥反應(yīng)，從而導(dǎo)致心肌細(xì)胞肥大，進(jìn)而引起左心室肥厚［19］。

血清NLRP3可激活I(lǐng)L-18等炎癥因子，進(jìn)而激活炎癥信號(hào)通路，引發(fā)和加重炎癥反應(yīng)［20］。目前研究已證實(shí)，NLRP3信號(hào)通路在高血壓患者中被激活進(jìn)而誘發(fā)血管內(nèi)炎癥反應(yīng)，促進(jìn)高血壓病情進(jìn)展［21］。而這一作用機(jī)制可導(dǎo)致高血壓患者心室壓力負(fù)荷長(zhǎng)期過大，促使心肌細(xì)胞肥大和心肌纖維化，進(jìn)而誘導(dǎo)左心室肥厚的發(fā)生。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，血清NLRP3表達(dá)水平與IL-1β、IL-18、TNF-α水平呈正相關(guān)，NLRP3表達(dá)水平升高可放大炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)，引發(fā)炎性損傷［22］。由此可見，血清NLRP3也可能通過調(diào)節(jié)IL-1β、IL-18、TNF-α等炎癥因子而介導(dǎo)炎癥反應(yīng)，進(jìn)而促使高血壓患者發(fā)生左心室肥厚。同時(shí)，本研究ROC曲線分析結(jié)果顯示，血清NLRP3 mRNA相對(duì)表達(dá)量預(yù)測(cè)高血壓患者發(fā)生左心室肥厚的AUC為0.706〔95%CI（0.651，0.761）〕，具有一定預(yù)測(cè)價(jià)值。

一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，抗炎藥吡非尼酮可下調(diào)NLRP3水平，進(jìn)而減少心肌細(xì)胞中IL-1β水平，有利于治療高血壓引起的心肌纖維化［23］。此外，有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，NLRP3抑制劑可降低對(duì)高血壓大鼠收縮壓，減輕血壓波動(dòng)，提示可通過NLRP3這一靶點(diǎn)治療高血壓及逆轉(zhuǎn)其引起的靶器官損傷［24］。但目前尚未見將NLRP3抑制劑應(yīng)用于高血壓治療的臨床研究，未來還有待開展多中心、大樣本量的前瞻性研究進(jìn)行證實(shí)，以為高血壓伴發(fā)左心室肥厚患者的防治提供新思路。

綜上所述，血清NLRP3 mRNA相對(duì)表達(dá)量較高（≥0.34）者左心室肥厚發(fā)生率較高，血尿酸、24 h SBP、DPP、NPP、24 h動(dòng)態(tài)脈壓和血清NLRP3 mRNA相對(duì)表達(dá)量是高血壓患者發(fā)生左心室肥厚的獨(dú)立影響因素，且血清NLRP3 mRNA相對(duì)表達(dá)量對(duì)高血壓患者發(fā)生左心室肥厚有一定預(yù)測(cè)價(jià)值。但本研究仍存在一定局限性：本研究為回顧性研究，可能存在一定偏倚；不同性別左心室肥厚的診斷標(biāo)準(zhǔn)不一致，性別與NLRP3也可能具有交互作用；未觀察患者血清NLRP3 mRNA相對(duì)表達(dá)量的動(dòng)態(tài)變化情況。

作者貢獻(xiàn)：曾蓮進(jìn)行文章的構(gòu)思與設(shè)計(jì)，論文撰寫及修訂；王新云進(jìn)行研究的實(shí)施與可行性分析，負(fù)責(zé)文章的質(zhì)量控制及審校，對(duì)文章整體負(fù)責(zé)、監(jiān)督管理；潘宏彬進(jìn)行資料收集，統(tǒng)計(jì)學(xué)處理；羅秀峰進(jìn)行資料整理。

本文無利益沖突。